Способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза

)5 0 01 й 33/68 ЕНТНО К 31 И 6 1, флт,1);Г 1 г ( АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ гзаболеваний. Цель; повышение точности способа, Сущность изобретения: у больного в остром периоде заболевания берут пробу крови, пробу делят на две части, каждую часть разводят средой 199 в соотношении 1;2, 1:4, 1;8, 1;16, 15:2, 1:64, в каждое разведение добавляют аутолимфоциты в концентрации 2 млн. клеток на 1 мл с последующей предварительной инкубацией в течение 40 мин одной части пробы при 15 С, а другой - при 37 С, а затем в каждое разведение добавляют комплемент в стандартной концентрации с дальнейшей инкубацией в течение 3,5 ч и определениемжизнеспособных аутолимфоцитов и при значении этого показателя 20 и выше в любом из разведений прогнозируют затяжное течение сальмонеллеза. 2 табл. ленной авторами заявки оп кономерности, эаключающ случае затяжного течения реакция лимфоцитотоксичн жительна (20 ф 6 погибших л ше) в одном или нескольк При этом лимфоцитотокс проявляться как в холодово вом режиме или в обоих ре менно. В то же время при прогнозе заболевания (ост течение) реакция термоэа цитотоксичности отрицате положительна (1-56).Необходимость исслед лимфоцитотоксичности в двввввЪ ования реакции вух режимах и 6 МУ СВИДЕТЕЛЬСТВ 1) 4902641/142) 17.01.916) 30.08.93, Бюл. ЬЬ 321) Луганский медицинский институт2) Н.Д.Ющук, В.М.фролов, В.А.Зюзин,.А.Пересадин и А.Д.Старик6) Определение кортизолрезистентнойопуляции лимфоцитов у больных сальмоеллезом. 2-ой Всесоюзный сьезд инфекцинистов, Ташкент, Медицина, УЗ ССР, 1985,. 69 - 71.4) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЗАЯЖНОГО ТЕЧЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА7) Способ прогнозирования теченияальмонеллеза. Использование: медициа, касается способов диагностики и пронозирования течения инфекционных Изобретение относится к медицине иасается способов диагностики инфекционных заболеваний.Целью изобретения является повышение очности и наде)кности способа прогнозироания затяжного течения сальмонеллеза,Эта цель достигается оценкой функциоального состояния лимфоцитов перифериеской крови больных сальмонеллеэом при омощи реакции термоэависимой лимфоциотоксичности в двух режимах - холодовомри+15 ОС) в тепловом (при+37 С) под воэействием сыворотки крови больных, раэвеенной в 2-64 раза.Использование данного предложениятало возможным благодаря впервые выявытным путем заейся в том, что, в сальмонеллеза ости резко полоимфоцитов и выих разведениях. ичность может м, так и в тепло- жимах одновреблагоприятном рое циклическое висимой лимфольна или слабо 1837237разведениях в каждом иэ них обусловлена тем, что эта реакция может быть, как показано авторами заявки опытным путем, резко положительна лишь в одном каком-то разведении одного иэ режимов, а в остальных - отрицательна или слабо положительна.Способ осуществляется следующим образом, Сыворотку крови больного сальмонеллезом, взятую в остром периоде заболевания, разводят средой 199 в концентрациях 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 и 1/64, Аутологические лимфоциты выделяют в градиенте плотности фикол-верографина (с удельной плотностью 1,076), инкубируют с аутосывороткой во всех разведениях в концентрации 2 млн клеток/мл в течение 40 мин. Инкубация проводится при температуре+37 С (тепловой режим) и+15 С (холодовой режим), после. чего в пробирки добавляется комплемент, приготовленный из стандартного коммерческого сухого комплемента, предназначенного для постанов. ки реакции связывания комплемента (РСК).После добавления комплемента инкубация продолжается при тех же температурных режимах в течение 3,5 ч, Затем производится суправитальное окрашивание лимфоцитов трипановым синим и в камере Горяева подсчитывается количество клеток, нежиз неспособных вследствие лимфоцитотоксического действия сыворотка крови больного, выражаемое в % отношении к общему числу лимфоцитов.При наличии отрицательной или слабоположительной (2 - 5 о ) реакции лимфоцитотоксичности сыворотки больного дают заключение о малой вероятности развития затяжного течения сальмонеллеза (менее 5%), Резко положительная (20 и более) реакция лимфоцитотоксичности, вне зависимости от того, регистрируется она в тепловом (+37 С), холодовом (+15 С), или в обоих режимах одновременно, свидетельствует о высокой вероятности формирования затяжного течения сальмонеллеза. При этом более высоки показатели лимфотоксичности, и чем в, большем числе разведений они выявляются, тем больше вероятности формирования затяжного течения сальмонеллеза.В связи с этим при положительной реакции лимфоцитотоксичности сыворотки необходимо осуществлять коррекцию лечения, в частности, назначать препараты имунно модулирующего действия, что способствует улучшению прогноза.При неопределенных результатах реакции(от бодо 190 ) необходимо ее повторение в динамике через 3-5 дней, при этом в5 10 15 20 25 30 35 40 подавляющем большинстве случаев, как показывает клинический опыт, она снижается до 5 или повышается до 20 ои более, что дает основание для заключения о вероятности затяжного течения сальмонеллеза,В клинике инфекционных болезней Ворошиловградского медицинского института проведено сопоставление эффективности существующего способа (прототип) и предлагаемого способа прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза. Полученные результаты сведены в табл,1.Как следует из таблицы, предлагаемый способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза имеют преимущества передсуществующим (прототип), поскольку егоинформативность по одиагностики выше на 21,7 ч. 1,5% Р0,05), При этом его результаты хорошо воспроизводимы и получаются уже через 4,5 ч от момента начала постановки реакции, что весьма важно для клинической практики.При предлагаемом способе прогнозирования одиагностики достоверно выше, чем при существующем, что свидетельствует о достижении цели изобретения - повышения точности и надежности способа прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза.П р и м е р. Больная К., 65 лет, пенси.- онерка, Страдает атеросклерозом, гипертонической болезнью, хроническим гипоацидным гастритом, холециститом, колитом. Заболела остро, беспокоила тошнота, многократная рвота, обильный зловонный зеленоватого цвета стул с примесью слизи, боли в животе, слабость, повышение температуры до 38,5 ОС. Заболевание связывает с употреблением в пищу несвежей колбасы. Клинически заподозрен сальмонеллез. Диагноз подтвержден бактериологически выделением из кала и промывных вод желудка возбудителя - сальмонеллы тифимуриум. Лечение прово дилось солевыми растворами, поливитаминами, детоксицирующими препаратами, Состояние больной улучшилось, температура нормализовалась на 3 день лечения, прекратилась тошнота и рвота, появился 50 аппетит. Тем йе менее сохранялся неустойчивый стул, повторно из кала выделена сальмонелла. Это заставило подумать врача о возможности формирования затяжного течения сальмонеллеза. С целью уточнения 55 прогноза заболевания проведены иммунологические исследования. Исследование кортизолреэистентной популяции лимфоцитов (способ-прототип) дало неопределенные результаты. Исследована реакция термоэависимой лимфоцитотоксичности,1837237 Таблица 1 Предлагаемый способ Существующий способ,При этом получены показатели, приведенные в табл,2,Таким образом, в тепловом режиме полчена резко положительная реакция лимфоцитотоксичности в разведениях 1/8 и 1/16, 5положительная в разведениях 1/4, в то жевремя в холодовом режиме реакция былалишь слабоположительной. Положительнаяреакция лимфоцитотоксичности дала основание для прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза у больной К., что вдальнейшем подтвердилось при клиническом наблюдении. Дальнейшее лечение всвязи с этой особенностью клинического течения заболевания включало иммуномодуляторы. Наступило выздоровление,Использование предлагаемого способапозволяет повысить точность прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза и,следовательно, индивидуализировать про.реактивов и может осуществляться в усло Количество обследованных больныхРезультаты реакции положительны: предполагается затяжное течение сальмонеллезаИэ них фактически сформировалось затяжное течение сальмонеллеза% совпадения ожидаемого и фактического результатовРезультаты реакции отрицательны -предполагается отсутствие затяжного теченияИз них фактически затяжное течениесальмонеллеза отсутствовалоСформировалось затяжное течение сальмонеллеза% совпадения ожидаемого и фактического результатовВсего случаев формирования затяжноготечения сальмонеллезаВ том числе возникновение затяжного течения совпало с прогнозомЛожноположительные результатыЛожноотрицательные результатыПроцент диагностики виях диагностических лабораторий больници других учреждений практического здравоохранения. Формула изобретения Способ прогнозирования затяжного течения сальмонеллеза, включающий иммунологический анализ крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, пробу крови у больного берут в остром периоде заболевания, пробу делят на две части, каждую часть разводят средой 199 в соотношении 1:2, 1:4, 1:8,1:16, 1:32, 1:64, в каждое разведение добавляют аутолимфоциты в концентрации 2 млн клеток в 1 мл с последующей предварительной инкубацией в течение 40 мин одной части пробы при 15 ОС, а другой - при 37 С, затем в каждое разведение добавляют комплемент в стандартной концентрации с последующей инкубацией в течение 3,5 ч и определением процента жизнеспособных аутолимфоцитов и при значении этого показателя 20% и выше в любом иэ разведений прогнозируют затяжное течение сальмонеллеза,1837237 Таблица 2 Составитель А. МарусенкоТехред М.Моргентал Редактор А, Обр ор Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина,Заказ 2863 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5