Способ получения секалотрикум

)5 А 01 Н 1/04 ЗОБРЕТЕНИЯ ПИС ОРСКО ЛЬСТВ К АЛОТРИедовательский ость осу.В,Новиков ид, при ктро- алотий А.И. Испольдля получения икаля, Новое в сельскохозяйстя степь, 1987,Изобретение относится к биотехнологии, в частности к селекции растений, и может быть использовано для получения секалотрикум,Известен способ получения секалотрикум (фиг.1), включающий скрещивание тетраплоидной ржи (ВВВВ, 2 п = 28) с гексаплоидн ыми трити кале (ААВ В ВВ, 2 и = =42), последующее скрещивание гибридов Р 1 с гексаплоидными тритикале и выделение секалотрикум среди гибридов (1).Недостатком этого способа является длительность и низкая эффективность. В первый год проводят скрещивание тетраплоидной ржи с гексаплоидными тритикале, получают гибридные семена, высевают их и выращивают растения Е 1. На второй год часть растений Г 1 самоопыляют, а вторую часть растений повторно скрещивают с гексаплоидными тритикале, получают гибридные семена. На третий год высевают гибридные семена, выращивают растения, изучают формообразование и выделяют предполагаемые секалотрикум по морфологическим признакам растений (колос, листья, восковой налет). Выделенные растения лжают ениях упроам жи с ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ0 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯРИ ГКНТ СССР(56) Гончаров С.В, и Туровскзование тетраплоидной ржирекомбинантных форм тритселекции и семеноводствевенных культур, Каменнас. 152-155.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕК КУМ(57) Использование: селекция и семен ство зерновых культур (получение исх го материала и продукции). Сущн изобретения; получение секалотрикум ществляют путем скрещивания тетрап ной ржи с гексаплоидным тритикале этом в год скрещивания проводят эле форез глиадина гибридных семян, сек рикум отбирают по наличию а-зо глиадиновом спектре. 3 ил., 1 табл. отрикум неконстантные и про епляться в след ющих пок секал до расщ У ол (фиг,1).Цель изобретения - ускорение и щение способа.Способ получения секалотрикум предусматривает скрещивание тетраплоидной ржи (ВВВВ, 2 п = 28) с гексаплоидными тритикале (ААВВВВ, 2 п = 42) с использованием ржи в качестве материнского компонента, при этом выделение секалотрикум среди гибридов проводят путем диск-электрофореза запасных белков гибридных зерен и по наличию глиадина в-зоне электрофореграмм, маркирующих геном тритикале, отбирают формы секалотрикум (фиг.2),Установленное новое свойство - наличие глиадина в а - зоне электрофорегр м запасных белков гибридных зерен, полученных от скрещиваний тетраплоидной р гексаплоидными тритикале в процессе получения секалотрикум, служит маркером по следних. Проведение диск-электрофореза запасных белков гибридных зерен и определение наличия глиадина в а-зоне электрофореграмм позволяет ускорить способ,1734602 50 снизить трудоемкость процесса за счет целенаправленного отбора форм секалотрикум в Е 1,В таблице даны электрофоретические спектры глиадина секалотрикум и их исход ных родительских форм.Пример 1.Скрещивают тетраплоидную рожь Верасень с гексаплоидными тритикале Л - 374 - 1 (таблица). Полученные гибридные 10 зерновки и их исходные родительские формы анализируют методом диск-электрофореза запасных белков - глиадинов, Для анализа используют половину зерновки без зародыша, а вторую часть зерновки с заро дышем оставляют для посева, Половинки зерновок измельчают, заливают 10-кратным обьемом 2 М мочевины и оставляют на холоде на ночь. Элекрофорез осуществляют в цилиндрических полиакриламидных гелях 20 (7,5 О) длиной 7,5 см и диаметром 0,5 см в режиме: ацетатный буфер при рН 3,1 от анода к катоду 5 ч 30 мин, причем первый час ток на трубку подается силой 2 мА, а затем 4 мА. После электрофореза гели поме щают в 7 О-ный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ) до проявления компонентов глиадина в виде апалесцирующих полос.Известно, что в электрофоретическом спектре глиадина ржи отсутствует а-зона - 30 родовой признак ржи фиг.За), у тритикале присутствуют все зоны - а, /3, у, ш, представленные на фиг,Зб, Из 33 проанализированных электрофоретических спектров глиадина выделены 19 зерновок с наличием 35 компонентов глиадина в а-зоне, маркирующих геном тритикале (фиг.Зв), а остальные 14 зерновок со спектром без а-зоны (фиг.Зв), Половинки семян с наличием глиадина в а-зоне и без него высевают в поле, 40 выращивают растения, изолируют каждое растение пергаментным изолятором для предотвращения опыления чужой пыльцой. В результате из отобранных секалотрикум с глиадинами в а-зоне получены фертильные 45 растения секалотрикум, у которых в среднем на колос завязалось 11,3 зерновки против 1,5 зерен на колос у прототипа. Из семян без глиадина в а-зоне получены растения исходной материнской формы, Форма секалотрикум Верасень х Л - 374 -выделена для включения в селекционный процесс.Пример 2,Скрещивают тетраплоидную рожь Верасень с гексаплоидными тритикале АД 206 таблица). Анализ гибридных зерновок и их исходных родительских форм, отбор секалотрикум проводят согласно примеру 1, Из 73 проанализированных зерновок получено 22 гибридные формы секалотрикум. Форма секалотрикум Верасень х АД 206 выделена для включения в селекционный процесс,П риме рЗ.Скрещивают тетраплоидную рожь Папарать с гексаплоидными тритикале Л - 301 (таблица), Анализ гибридных зерновок и их исходных родительских форм, отбор секалотрикум проводят согласно примеру 1, Из 46 проанализированных зерновок выделено 23 гибридные формы секалотрикум. Форма секалотрикум Папарать х Л - 301 выделена для включения в селекционный процесс,Настоящий способ сокращает сроки создания секалэтрикум на 1 г, так как позволяет целенаправленно получать их в год скрещивания тетраплоидной ржи с гексаплоидными тритикале без дополнительного скрещивания гибридов Е 1 с гексаплоидными тритикале, что значительно упрощает процесс и позволяет получать константные нерасщепляющиеся секалотрикум,Формула изобретения Способ получения секалотрикум, включающий скрещивание тетраплоидной ржи с гексаплоидным тритикале с использованием ржи в качестве материнского компонента, идентификацию и отбор секалотрикум среди гибридов, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, идентификацию проводят в год скрещивания путем электрофоретического разделения глиадинов гибридных семян и отбор ведут по наличию а-зоны в глиадиновых спектрах,1734602 Изучено зерновок Исходная форма, гибрид Г 1Встречаемых спектров глиадина Белковая формула глиадина 17 17 2345 2345 78 2345678 12 45 20 20 567 2345 191417 33 17 567 2345 2345 2345 12 45 45 5567 2323 46 567 2345 2345 2345678 2345 78 45 45 П р и м е ч а н и е,- выделенные формы секалотрикум,1 год Р бв к к х дяввак Их(ЗХ=42 2 И х 4 хх 28 2 гол,х ЯдЯЯК с 4 Р 10 0 л ЫЛ ЕИИЕ яюЯД (ь ЯЯйй л ЯЯ Г 4 хЯЯВ 6 КЯ Сбх и Верасень - оз, рожь Л-1 - оз. тритикалеВерасень х Л-1 -гибрид То же Верасень - оз. рожь АД 206 - оэ. тритикалеВерасень х АД 206 -гибрид То же Папарать - оз. рожь Л- оз. тритикале Папарэть х Л-гибрид То же Ю свеям 1. 3 гйхай1734602 У Ьеа Рг 5. сееаРе Е г внйй к ДДВВНВ 11 г Редактор Т. Курков рректор О. Кра аказ 1755 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина 101 Ги иаэс