Способ определения нарушений в системе обмена липидов

(51)5 О 01 И 33/ 30 РЕТЕНИ ии МЗ ГанелиГОСУДАРСТВЕННЫИ .КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Уральский политехнический институт им. С.М,Кирова(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЙ В СИСТЕМЕ ОБМЕНА ЛИПИДОВ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления нарушений в системе обмена липидов, особенно на ранних стадиях заболевания. Целью изобретения является повышение чувствительности и точности способа. Цель достигается тем, что выделенные общие лиИзобретение относится к медицине, в частности к лабораторному исследованию крови при нарушениях в системе обмена липидов.Наиболее близким к предлагаемому является биохимическое исследование липидного спектра крови с определением величины общего холестерина, липопротеидов высокой и низкой плотности, триглицеридов и индекса атерогенности,Однако при указанном способе нередко наблюдается несоответствие между клинической симптоматикой, морфологическим субстратом и липидным спектром (даже при выраженном клиническом проявлении заболевания примерно в 1/3 случае регистрипиды сыворотки крови кристаллизуются на подложке и в поляризованном свете при увеличении в 160 раз определяется морфологичесий тип текстуры. При обнаружении изотроп ной текстуры (ИТ) подтверждается отсутствие нарушений в системе липидов, при текстуре миелиновых форм (МФ) и при наличии веерных кристаллов (8 К) - наличие нарушений в системе липидов, Выявление текстур в процессе лечения, наличие динамики перехода текстур ВКМФ ИТ говорит об эффективности лечения и наоборот. Для повышения точности способа закристаллизованные на подложке липиды помещают в фотометр между скрещенными поляризаторами, определяют светопропускание через текстуру и при его значении больше 30% а подтверждают наличие нарушений в системе липидов, а при меньшем или равном значении - их отсутствие. 1 з,п.ф-лы, 2 табл. руются нормальные показатели отдельных компонентов липидного обмена). Кроме того, способ не позволяет диагностировать ранние стадии заболевания.Цель изобретения - повышение чувствительности способа.Цель достигается тем, что в способе, включающем выделение общих липидов сыворотки крови, последние кристаллизуют на подложке и определяют морфологический тип текстуры в поляризованном сеете. При обнаружении изотропной текстуры (ИТ) подтверждают отсутствие нарушений в системе липидов. при текстура мивлиновых форм (МФ) и при веерных кристаллах (В К) - их наличие. Выявление указанных текстур впроцессе лечения, наличие динамики перехода текстур ВК МФ ИТ говорит об эффективности лечения и наоборот.Для повышения точности способа кристаллизованные на подложке липиды помещают в фотометр между скрещенными поляризаторами и определяют светопропускание через текстуру; при его значении больше 30% подтверждают наличие нарушений в системе обмена липидов, а при меньшем или равном значении - их отсутствие.Кристаллизация выделенных липидов и определение текстур в поляризованном свете позволяет выявить изменения, которые известными методами не обнаруживаются, что обеспечивает обнаружение нарушений на более ранней стадии,установленные типы текстур соответствуют оценкам о наличии или отсутствии нарушений в системе липидов,Фотометрическое исследование обеспечивает оценку количества оптически-активных текстур, кристаллизованных общих липидов, повышая тем самым информативность способа.Способ осуществляют следующим образом.Берут пробу венозной крови пациента, выделяют общие липиды сыворотки крови по методу Фолча, Каплю полученного субстрата помещают между предметным и по- кровным стеклами и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 сут, Полученную ячейку помещают в поляризационный микроскоп и определяют морфологический тип текстуры, наблюдаемый в скрещенных поляризаторах. Ячейку помещают между скрещенными поляризаторами и измеряют светопропускание через ячейку в процентах при условии, что показания составляют 4 - 5% при отсутствии образца между поляризаторами и 100% при помещении на место образца стандартной оптической кюветы размером 1 х 1 см с водным раствором О-глюкозы (114 г/л), Для повышения достоверности делают по 3 ячейки для каждого субстрата,При регистрации изотропной структуры (ИТ) с единичными двулучепреломляющими включениями без определенной морфоло-. гии подтверждают отсутствие нарушений в системе липидов, При регистрации текстуры миелиновых форм (МФ) и текстуры веерных кристаллов (ВК) делают вывод о наличии нарушений в системе обмена липидов.При регистрации светопропускания30% делается вывод об отсутствии нэрушений в системе липидов, при30% - обих наличии,Контроль состояния системы липидов в5 динамике осуществляется следующим образом.Изменение текстур в динамике леченияв направлении ВКМФ+ИТ свидетельствуето благоприятной коррекции нарушенного10 липидного метаболизма. Сохранение текстур или их изменение в направлении МФ - ВК указывает на неэффективность лечения.Изменение в динамике лечения исходных значений светопропускания от величин1530% к диапазону30% говорит обэффективности лечения, Сохранение в динамике исходных значений светопропускания30% или его увеличение свидетельствует о неэффективности лечения,20 Диагностика.П р и м е р 1. Больной М., возраст 56 лет,Биохимия; ОХС (общий холестерин) 7,64ммоль/л, с-ХС (липопротеиды высокойплотности) 1,09 ммоль/л, ТГ (триглицериды)25 2,78 ммоль/л, ИА (индекс атерогенности)6,01, тип ДПЛ (диспипопротеидемии) ПБ,Оценка биохимических показателей (прототип): атерогенная дислипопротеидемия.Текстура; ВК, фотометрия -90%,30 Оценка биофизических изменений: наличие нарушений в системе липидов.Клинический диагноз: ИБС, прогрессирующая стенокардия (через 18 дней послеисследования развился трансмуральный35 инфаркт миокарда).П р и ме р 2. Больной Ивозраст 47 лет.Биохимия: ОХС 5,84 ммоль/л, а-ХС 1,41ммоль/л, ТГ 2,02 ммоль/л ИА 3,14, тип ДЛПнорма,40 Оценка биохимических показателей:без отклонения от нормы.Текстура; ВК, =72%,Оценка биофизических изменений: наличие нарушений в системе липидов.45 Клинический диагноз: ИБС, стенокардия И функционального класса,П р и м е р 3. Больной Ч., возраст 33 г,Биохимия: ОХС 7,25 ммоль/л, а-ХС 0,82ммоль/л, ТГ 1,51 ммоль/л, ИА 7,84, тип ДЛП50 Па,Оценка биохимических показателей:атерогенная дислипопротеидемия.Текстура: И; =20%,Оценка биофизических показателей;55 без отклонений от нормы,Клинический диагноз: практически здоров.П р и м е р 4, Больной Твозраст 34 года.Биохимия: ОХС 3,96 ммоль/л, а-ХС 0,961723527 Как показала клиническая апробация,достоверность способа обеспечивается более чем в 90% случаях. Данные апробацииприведены в табл, 1 и 2,5 ров 1. Способ определения нарушений в системе обмена липидов путем отбора веноз ной крови, экстракции общих липидов споследующей регистрацией их содержания, отличающийся тем,что,сцелью повышения чувствительности способа, экстракт общих липидов кристаллизуют на 15 предметном стекле, затем регистрируюттип текстуры в поляризованном свете и при обнаружении текстуры миелиновых форм и веерных кристаллов определяют нарушения в системе обмена липидов.20 2, Способ по и. 1, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения точности способа, кристаллизат липидов на предметном стекле помещают в фотометр между скрещенными поляризаторами, измеряют свето пропускание через текстуру и при егозначении более 30% определяют наличие нарушения в системе обмена липидов. Таблица 1Характеристика предлагаемого способа в сравнении с прототипом:диагностика Больной Опыт Биохимия липилов Возраст Предлагаемыйспособ Результаты биохимичес Результатыбиофизическогоконтроля Клиническоезаключение ОХСЫ-ХС ТГ кого контекс-1, 2ура ля Наличие нару- ИБС: прогрессируюшений в систе- Юая стенокардия ме липндов 65 8,75 Лислипопро- ВКтеидемия 1 М 40 7,44 1,73 3,30 5,08 ИБС стенокардия 1 Ч фумкц, класса 70 То ке н ВК 2,23 2 ф 40 7,11 1,17 3 Р 40 3,83 1,24 ИБС;стенокардияП функциональногокласса 65 0,56 2,13 н н ВК ИБС стенокардия1 Ч функциональногокласса ВК 50 -нНБС:стенокардияШ функциональногокласса 36 5,84 1,58 1)92 2,7 "иВК 79 "н 5 С Практически здоров с отягоюенмой нас- ледственностью 1,81 Наличие нарушений в сис 4,801,65 2,12 Без отклонений от 6 Л 31 теме.липидов нормыБез откло- Мф нений от нормы Практически здоров 0,40 30 Наличие нарушений е системе липидов 3,86 2,75 7 Р 24 0,50 0,79 . 1,01 Без отяпонений -"от нормы 28 ч 3,65 1,82 8 С 21 9 Г 22 2,32 ы 5,85 1,76 1,03 ммоль/л, ТГ 1,65 ммоль/л, ИА 3,13, тип ДЛПнорма. Оценка биохимических показателей:без отклонения от нормы. Текстура: И, =25%, Клинический диагноз: практически здоКонтроль лечения.П р и м е р 5. Больной Звозраст 61 год, Диагноз; ИБС, стенокардияфункционального класса.Лечение: ультрафиолетовое облучение крови (УФО).Биохимия до УФО; ОХС 6,82 ммоль/ч, а-ХС 1,58 ммоль/л, ТГ 5,40 ммоль/л, ИА 3,32, тип ДЛП ПБ.Текстура до УФО: =470,.Биохимия после УФО: ОХС 5,84 ммоль/л, а-ХС 0,76 ммоль/л, ТГ 4,56 ммоль/л, ИА 6,63, тип ДЛП Ч,Текстура после УФО: И, =30%.Результаты контроля: по данным биохимических показателей лечение неэффективно, по данным предлагаемого способа лечение эффективно.Клиническое заключение: эффект хороший, снижение суточного потребления нитроглицерина,4 3 39 4,861,71 0,97 1,82 Формула изобретения% 1 сО Ла оО Эх1М 99 Мо ф 1- 9 с й о сс Хл х 1- л х с Э Э Е 1- е х с 3 а 1о1 Эои: х2х сс) 3 С О 1 х Ф 9 1 С 1 со а 9 9 а у 1- х о с С 1 х а Э ЭМ о 11еоЭх Ф19 1-т хЭЖ 1о Э х х й 9 9 е сч .0 м л м со е е т