Способ определения эффективности лечения ревматоидного артрита у детей

(71) Казахский наинститут педиатри(56) Поражение состаз, И-я Всесоюзн1983),М 1983, 241 ф ЕКТИВ ОГО АРТ ЛЕНИ МАТО В 6 чно-исследовател дицине, абыть ис- ективноа удетей, точности дополниина и не- в плазме этих по" ей. 1 табл. кии ится к ме и и может еления эфф ого артрит овышение тся за счет а 1 антитрипс ринолиза отношени оровых дет Б. Х. Хабижанов удистой стенки и ге я конференция (Ми к,ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНРЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Изобретение относится к медицине, а именно педиатрии, точнее детской ревматологии, и может быть использовано для контроля эффективности лечения и прогнозирования течения ревматоидного артрита у детей.Целью изобретения является повышение точности способа.Для достижения цели в плазме крови больных детей дополнительно определяют а 1-антитрипсин (а 1 АТ) неферментативный :фибринолиз (НФ) после лечения, находят отношение этих показателей к аналогичным показателям уздоровых детей.Способ осуществляется следующим образом.У больных утром берут кровь для исследования в пробирки с 3,8%-ным раствором цитрата натрия в отношении 1:9 и определя-. ют уровень а 1 АТ и НФ и высчитывают отношение этих показателей к норме. Активность а 1 АТ в плазме крови определя(54) СПОСОБ ОПРЕДЕНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ РЕВРИТА У ДЕТЕЙ(57) Изобретение относименно к ревматологипользовано для опредсти лечения ревматоиднЦель изобретения - испособа, Цель достигаетельного исследованияферментативного фибкрови и определения соказателей относительно зд ли по Нивяровском Пасторовой.Реактивы. 0,85% го натрия;плазма человека (оксалатная или цитратная) дефибринированная. Для освобождения плазмы от фибриногена ее прогревают в течение 3 мин при 56 С, После этого быстро помещают в лед;0,2%-ный раствор фибриногена Каунас- (ф ского предприятия бакпрепаратов; р плазминоген; плазмин, полученный активацией плазминогена препаратом стрептокиназы, Приготовление, 40 кг плазминогена растворяют в 10 мл физ, раствора, В раствор плазмино-, ф гена добавляют 0,1 мл стрептокиназы, содержащей 500 еди инкубируют в водяной бане при 37 С в течение 10 мин;тромбин без плазминогена (20 ед,в 1 мл) Каунасского предприятия бакпрепаратов.Определение медленно действующих антиплазмидов а 1 АТ, 0,2 мл разведенной1:9 дефибринированной плазмы предварительно инкубируют с 0,2 мл плазмина при 37 С в течение 1 ч. Затем добавляют 0,2 мл 0,20 ь-ного раствора фибриногена и 0,1 мл тромбина. После образования сгустка отмечают время полного его лизиса, Полученное значение времени лиэиса сгустка характеризует суммарный уровень антиплаэминов - быстро и медленно действующих, Для расчета медленно действующих антиплазминов (а 1 АТ) из полученного значения времени лизиса вычитают время лизиса сгустка, характеризующее содержащеемакроглобулина (а 2 МГ) для той же испытуемой плазмы, Получают время лизиса, характеризующее уровень а 1 АТ. Уровень а 1 АТ в крови больного рассчитывают в процентном отношении от уровня этого антиплазмина в крови здорового донора, принимаемого за 1000. Например, время лизиса сгустка при определении щ МГ в крови больного 38 мин, время лиэиса сгуст. ка при определении суммарных антиплазминов равно 72 мин. Тогда, время лизиса, характеризующее только уровень а 1 АТ будет 72 - 38 г 34 мин (у больного), Таким же образом определяют время лизиса, характеризующее уровень а 1 АТ у здорового человека 25 мин, Расчет в процентах уровня а 1 АТ у больного производят по отношению к 100 уровню здорового.Например 25 - 10034 - х х = 136 а 1 АТ у больногоОпределение неферментативной Фибринолитической активности.Реактивы;фибриноген бычий (Каунасского пред приятия бакпрепаратов);бромбин без плаэминогена (Каунасского предприятия бакпрепаратов);трисоксиметиламинометан (реанол); соляная кислота 0,1 н, (фиксаналы); натрий лимоннокислый 3,800-ный рас-.твор;монойодуксусная кислота (к, ч);Е-аминокапроновая кислота (р-р Е-АККгоден в течение 2 ч с момента приготовления);натрий хлористый 0,85-ный раствор, Приготовление реактивов. Трис-НС-буфер, рН 7,35. Для приготовления этого буфера готовится раствор триса - 24,33 г +1,0 л Н 20 и 0,1 н, р-р НС. Затем смешивается 425 мл.0,1 н,НО и 250 мл р-р триса. Полученный раствор доводят до 1 л водой. Проверяют рН на потенциометре, который должен быть 7,35, Этот буфер хранится в холодильнике в течение года, Если40 образец плазмы делится на 2 частиОбразец плазмы+ 0,05 мл фиэ. раствора 0,05 мл Е - АКК4-60(,-ный р-р в Физ. раствореРаствор Е-АКК должен быть свежеприготовленный, Образцы плазмы помещают в термостат при 37 С точно на 10 мин, Чашка.Петри делится на 2 части,.На левую сторону чашки капаем автоматической микропипеткой 0,05 мл контрольной плазмы (плазмы+ Физ.раствор)., на правую сторону чашки 0,05 мл плазмы с Е-АКК (опытный образец)Для каждого больного готовится два образца плазмы - опытный и контрольный. Чашки с образцами плазмы ставятся в термостат на 2 ч. Слева определяется суммарная фибринолитическая активность, справа нефер 102025 30 35 появились хлопья, буфер нужно отфильтровать.0,27 ь-ный р-р фибриногена (20 мг фибриногена + 100 мл трис НО буфер + 25 млОр 5 -ный р-р хлористого натрия ). С учетом солей фибриногена навеску взвешивать 580Р-р монойодуксусной кислоты (150 мг сухой кислоты+50,0 мл трис НС 1 буфера, рН7,35)Тромбин без плазминогена - 2 мг тромбина+ 1 мл Физ, раствора, если активность тромбина 2000 ед. во флаконе, если активность 1000 ед то навеска тромбина 4 мг, раствор тромбина готовится перед опытом.К 100 мл раствора фибриногена добавля от 40 мл монойодуксусной кислоты, раствор выдерживается в термостате при 37 С 15 - 60 мин, но не более часа (монойодуксусная кислота блокирует Х 1 И фактор).Приготовление фибриновых пластин, В химическом стаканчике смешивают 5 мл раствора Фибриногена с монойодуксусной кислотой, добавляют 0,1 мл раствора тромбина, смешивают и быстро выливают в чашку Петри, покачивая ее. Чашку ставят. на ровную поверхность стола, прикрывая крышкой, но не закрывают ее. Для полного застывания фибриногена чашка выдерживается 1 ч на столе, затем в крышку помещаются фильтровальная бумага, чашку закрывают и в таком виде она сохраняется в холодильнике при+4 С недели, Указанного количества фибриногена достаточно для приготовления 28 чашек.Приготовление образца плазмы. Цитратную кровь, взятую в соотношении 1:9, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 мин (бедная тромбоцитами плазма). Одинментативный фибринолиз. Через 2 ч чашки вынимают из термостата и измеряют в мм зоны лизиса по двум диаметрам. При перемножении диаметров получают площадь зонывмм.Например, неферментативный фибринолиз ЭНФ равен 7 мм х 7 мм = 49 мм . В таблице представлены результаты исследований НФ и а 1 АТ у детей с ревматоидным артритом.Таким образом, отношение а 1 АТ здорового и больного ревматоидным артритом с благоприятным течением заболевания должно быть в пределах 0,65 - 0,67 Н Ф в пределах 0,74-0,77. При неблагоприятном течении соответственно 0,40 - 0,42 и 0,88 - 0,93.П р и м е р 1, Больная К-ва Б., 14 лет, Находилась в клинике института с 27 апреля 1988 по 28 июля 1988 года с диагнозом: ревматоидный артрит, преимущественно суставная форма, полиартрит, активность И стсеронегативный вариант, К-стадия. Способность к самообслуживанию сохранена. Сопутствующий диагноз: хронический гастрит в фазе умеренного обострения.При поступлении состояние больной тяжелое за счет. болевого суставного синдрома, Жалобы на скованность по утрам, ограничение движений, деформацию суставов. Забрлела остро 20/- 88 г., когда появилась припухлость и болезненность правого коленного сустава. Лечилась.у хирурга, но улучшения не было, Через три недели появились боли, припухлость и ограничение движений в левом коленном, лучезапястном и межфаланговыхсуставах рук.Об-но: при поступлении состояние довольно тяжелое. Выражены симптомы общей интоксикации - вялость, утомляемость, общая слабость. Кожные покровы бледные, слизистые чистые, язык влажный, Со стороны костно-суставной системы - артралгия, дефигурация, ограничение движений, припухлость, повышение местной температуры над коленными, лучезапястными и межфаланговыми суставами кисти.Данные в органах дыхания без особенностей. Границы сердца не увеличены. Тоны ритмичные, приглушены. Пульс 92 в мин. Живот мягкий, печень у края реберной дуги, селезенка не польпируется. Анализ крови от 17/Нг. - зр, 4,4 10 /л, НВ - 134 г/л, ц,п.-0,9, ретикулоциты - 11;,лейкоциты - 8,9 109/л, зозинофилы - 1%, сег, 630 лимфоциты - 290, моноциты - 60/О, СОЭ - 46 мм/ч, Протеинограмма - общий белок,5 г/л, А,0 , Г,00/а 1 -9,0%. а - 120/, Р - 15,- 19,0%, А:Г= 0,8, Са,14.ммоль/л, К - . 5,8 ммоль-л, аммоль/л, холестерин - 1,17 ммоль/л, фосфор - 1,77 ммоль/л, АЛТ - 0,07 ммоль/л, АСТ - 0,18 ммоль/л, билирубин - 12,0 ммоль-л. оста точный азот - 22,5 мг,мочевина - 4,1ммоль/л, тимоловая проба - 1,5, коагулограмма - АКТ(аутокоагулограмма) на 6 мин - 19 с на 8 мин - 15 с, на 10 мин - 19 с, АВР - 78, АЧТВ - 58, ПК - 71, ТВ - 20", фибри ноген - 2,20 г/л, ШХ ф-р - 250, АТ-Ш -и141,50, лизис эуглобулиновых фракций - 300 мин. Р. Ваалер-Роузе и латекс теста отрицательный.ЗКГ- вертикальное направление элект рической оси сердца. Синусовая аритмия.Признаки неполной блокады правой ножки пучка Гиса.Больная получила лечение: преднизолон по 50 мг с последующим снижением до 20 12,5 мг, купренил по 1 капсуле 2 раза, эритромицин, ампиокс, витамин В 15, нистатин, аскорбиновая кислота, оротат калия, аспаркам, индометацин, вит, А.При исследовании фибринолиза и а 1 25 антитрипсина отмечено: а 1 АТ - 3000/О, НФ -16 мм . а АТ здорового 87,9 Отношениеа 1 АТ больного 300 = 0,2- 1,53НФ больного 30 Отношение средней тяжести, Жалобы на боли и деформацию в мелких суставах рук и ног. Болеет в течение 5 лет. Дважды находился в КазНИИ педиатрии йа лечении по поводу данного заболевания. Наследственность - у родственников со стороны матери имеются заболевания суставов деформирующий остеоартроз). т,е. первое отношение меньше 0,40, второе35 отношение больше 0,93. В дальнейшем уэтой больной отмечалось неблагоприятноетечение болезни, что выражалось упорством признаков воспаления, прогрессированием суставных явлений, вовлечением в40 процесс и других суставов.П р и м е р 2. Больной А-ов, 14 лет.Находился в клинике КазНИИ педиатрии с04.10.88 по 13,12,88 г, с диагнозом: ревма- ,тоидный артрит, преимущественно сустав 45 ная форма, полиартритст. активности,медленно прогрессирующее течение, серо-негативный вариантй стадия А ст., Фснарушенаст, Сопутствующий диагноз:Хронический правосторонний мезотимпа- .нит,При поступлении состояние больного-аг АТЬ Йг АТ 6-0 руппа ислеуемых детейОб-но: при поступлении состояние средней тяжести, самочувствие заметно не страдает. Больной правильного телосложения. Кожные покровы сухие, чистые. Слизистые и зев умеренно гиперемированы. Со 5 стороны органов дыхания патологии не выявлены, Тоны сердца ясные, в У точке систолический шум средней интенсивности, пульс удовлетворительного наполнения - 76 уд: мин, АД - 100/70 мм рт. ст. Органы 10 . брюшной полости без особенностей.Костно-мышечная система: отмечается деформация межфаланговых суставов 0 ук.Анализ крови на 10,10,88 г,: эр, 4,5 10 /л, Нвг/л, ц,п. -0,9; Л -7,0107 л, эозино филы -4, с - 66, л - 22, м, СОЭмм/ч, АСЛ - 0 - 1:250; СРБ -(+1 о.б, - 59,6 г/л, А - 60,5%, Г,4%; аг -5,1%, ай -7,7 %. ф - 11,4%, у - 15,3%; А:Г=1,5. Коагулограмма от 15.10,88 г, - гиперфибиногенемия, наклон ность к гиперкоагуляции, фосфор - 1,13 ммоль/л, щелочная Фосфатаза - 427 м.е., холестерин - 1,67 ммоль/л, АЛТ. - 0 16, АСТ - 0,12 ммоль/л, билирубин - 15,4 ммоль/л, тимоловая проба - 1,5 ед, Р,Ваалер-Роузе и 25 латекс теста отрицателен. ЗКГ - вертикальное направление электрической оси сердца.Легкая синусовая тахикардия, Признаки левожелудочковой гипертрофии. ФКГ -тон больше И тона. На средней и высокой часто те не на всех циклах прослеживаются мелкие осцилляции в протосистоле, На рентгенографии костей лучезапястного сус- .тава - суставные поверхности сближены, отмечается небольшой правый склероз. 35 Больной получил лечение. индоматцин, вит,Вг, Вв в/м, вит Вг 5, аскорбиновая кислота, поливитамины, На ночь лангеты, массаж кистей рук, ДМСО с гепарином на больные суставы.Наступило значительное улучшение: исчезли боли в суставах, уменьшились симптомы артрита. При исследовании показателей фибринолиза было отмечено следующее: аг АТ здорового 87,5аг АТ больного 130,4 ЫУ ед Рзт 245 П Т 0НФ больного 36,0При дальнейшем наблюдении у больного отмечено благоприятное течение ревматоидного артрита, что выражалось достижением ремиссии, отсутствием вовлечения в процесс других суставов,Точность способа 88,8%, Процент ложноположительных и ложноотрицательных определяют 11,2%, Формула изобретения Способ определения эффективности лечения ревматоидного артрита у детей путем исследования биохимических показателей крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно в крови исследуют уровни аг-антитрипсина и неферментативного фибринолиза после курса лечения, рассчитывают отношения этих показателей к аналогичным показателям в корме и при значении первого отношения 0,65 и выше и второго 0,74 и ниже определяют эффективность лечения,ъ