Способ защиты биологических объектов от воздействия гамма излучения

(ч 6 (21 (22 й генетики Институт неФтеа нм. акад. М,Бахитоваотлярова,.То(56) Авторское свидВ 903563, кл. Е 2Авторское свидеВ 1182397, кл, С 0 етельство ССС В 43/00, 1982 ельство СССР М 33/48, 198 и ло си в низзма де эЬд. к тычислу у млекопитаючхиндуцированных матоФильных эрга мьппей, Метод оиенива мнкрояде троцитах ют порвпот повр гпхроог мо.,; ; я выя УДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(72) В.А Левченко,Л,А, Островская, Е,В.А.Александрова,и Н.А,Платэ Изобретение относится к радиобиогии, преимущественно к применению нтетических химических соединений качестве рапнопротекторов, и может ыть использовано как для защиты геома мпекопитающих и растений от муагенного воздействия, так и оргамлекопитающих от летального во йствия ионизирующих излучений.Целью изобретения является увели- ение антимутагенного и защитного эФФекта.Увеличение антимутагенного и защитного эФФекта обеспечивается эа счет применения полимера М,И-диметил,И- дивллиламмоний хлорила (ПДЬЩААХ) .Мпекопитающим (мышам) за 30 мин до воздействия-излучения (1,5 Гр) внутрибрюшинно ввцится водный раст 1632041 А 1(54) СПОСОБ ЗА 1 ЯТЫ БИЛОГИЧЕСКИХОБЪЕКТОВ ОТ ВОЗДЕЙСТВИЯ ГАММА-ИЗЛУЧЕНИЯ(57) Изобретение относится к радиобиологии, преимущественно к применению синтетических химических соединений в качестве радиопротекторов,и может быть использовано для защитыбиологических объектов от воздействияионизирующих излучений. Целью изобретения является увеличение антимутагенногд и защитного эФФекта. Полимер 11,И-днметил-И,11-диаллиламмонийхлорида в концентрации 20-40 мг/кгили 20 мг/л обладает антимутагенньмзащитным эФФектом при воздействиина биологические объекты гам.а-излучений. 3 табл,вор полимера ПДИДААХ в дозеОТ 20 до 60 мг на 1 кг веса животного.Облученным животным в дозе ганмаизлучения, соответствующей ДЛа за 30 мин до облучения или сразу после облучения вводят полимер ПДМДАЛХ в концентрации 25 мг/кг веса животного (максимально переносимая доза).Семена растительного объекта ячменя-обрабатывают полимером до облучения (1 вариант) или проращнвают на йильтровальной бумаге, смоченной полимером (11 вариант) (доэа полимера 20 мг/л),П р и м е р 1, Мутмгенныехромосом, инлуцированных гамма-излучением в эритробластах костного мозга мышей СВА х С 57 В 1/63 н Г. Используют дозу гамма-излучения, при которой уровень индуцироваттньтх микроядер5в 40 раз превышает их число у необлученных животных. За 30 мнн до облучения мьпттам однократно вт.-; рибртошинно вводят водный раствор полимераПДИДАЛХ. Использовали 20 мг/кг весатела животного, В укаэанных дозах му"тагенные эффекты препарата. не проявились.Мутагенный эффект облучения приприменении максимально переносимойдозы полимера снижался на 53-58%.Более высокие дозы полимера позволи".ли снизить число мнкроядер иа 80-Е 2%.Для получения сравнительных данныхпроврдят эксперименты по из чени:сантимутагенного действия изветногорадиопротектора - дибунола, к торыйпри использовании эквитоксической дозы 75 мг/кг веса животного снижал чис ло микроядер только на 25-26%,П р и м е р,2 Способ осуществляют аналогично примеру 1.Однако мьштам вводят внутрибрюшин"но 40 мг/кг ПДИДААХ.П р и м е р 3. Влияние полимераПРИДЫХ на диффереттцировку клетокэритрондного ряда оценивают по отношению молодых Форм - полихроматофильных эритроцитов (ПХ) к зрелым эритроцитам. У необлученных животных числоПХЭ составляет 70-807. от общего числа эритроцитов. После воздействияна животных гамма-излучения в дозе1,5 Гр число ПХЭ снизилось до 41-437,40Использование полимера в дозах 2040 мг/кг веса животного позволяетповысить число ПХЭ до 66-687. (табл. 1),Статистическую обработку данных проводят по методу 1-Стьтттдента.45Данные приведены в табл, 1,П р и м е р 4, Для повышения жизнеспособности облученных животныхиспользуют дозу гамма-излучений 6 Гр,прн которой выживает в течеттие.40 дней,50% (ЛДЕр) мьштей Р (СВА х С 57 В 1/бт), 5вводят полнмвр,Первой группе мышей вводят полимер в дозе 25 мг/кг эа 30 мнн ло одттократттого наружттот о облучения телас источником ттзлучетттттт т" См (мощность 55ттэлучеттия 470 рад/митт) тт обтгей дозой600 радЯттттестпп обттгтстт, у этой группы мьттттетт 100% Второй группе мышей полимер в дозе 25 мг/кг веса животного вводят через 2-3 мин после облучения, В этойгруппе мышей выживаемость также 1007.(табл, 2),П р и м е р 5. Влияние полимераПДИДАЛХ на индукцию гамма-излучением структурных повреждений хромосому растений оценивают по методу учета хромосомных аберраций в метафаземитоза в меристематических клеткахкорешков проростков ячменя сорта Мос.ковский. Используют дозу гаммаизлучения 4,88 Гр, при которой числоклеток с аберрациями хромосом и число аберраций хромосом на клетку увеличивалос в 10 раз по сравнению сконтролси (табл. 3),Пепосредственно после облучениясемена помещают в чашки Петри нафильтровальную бумагу, смоченную полимером ПДИДААХ в концентрации20 .тг/л на период 24 ч до проращивания и момента фиксации. В проростках, полученных на Фоне полимера,число метафаз с аберрациями хромосомна 2 порядка ниже, чем в вариантеодного облучения (положительный контроль) .П р и м е р б. Семена до облучения замачивают в течение 3 ч в растворе полимера при концентрации20 мг/л, затем облучают, непосредственно после облучения отмывают отполимера и проращивают до фиксациив течение 24 ч на фильтровальной бумаге, смоченной вбдой. При этом число метафаэных клеток с аберрациями ичисло аберраций на клетку снижается,в 40 раз по сравнению с проросткамисемян, не прошедших обработку полимеров перед облучением.Увеличение антимутагенного эффекта полимера достигается при среднихдозах полимера (20"40 мг/кг) по сравнению с дибунолом, используемым в более высоких дозах (75 мг/кг) .Применение максимально переносимых доз полимера (25 мг/кг) позволяетэффективно (1007) повышать выживаемость животных при высоких (6 Гр)дозах гамма-излучений, прн которыхдибунол менее эффективен,Формула изобретенияСпособ защиты биологических объектов от воздействия гамма-иэлу теттия, предусматривающий обработку биологи5 16320416 ческих объектов радиопротектором доипи после опл"чения о т л и ч аУиспользуют полимер И,Б-диметил-Ч,Я- ю щ н й с я тем что с целью увели- диаллиламмоний хлорила в концентраУ фчения антимутагенного и защитного эф- ции 20-40 мгукг илн .О мг/л5 Таблица 1 Антимутагенные эффекты полимера ПДИДААХ (х + 5-) Условия опыта Доза,мг./кгОтношениеПХЭ /зр елыеэритроциты Снижениепо отношению к Количест- Число ПХЭ с микроядрами, . во исследов. кле" ток тыс,гамма-излучению р% 1,8+,3 1,5+1, 1 0,70 0,57 50 41,414,68 1,5 Гр 8 2,О+1,55 20 мерГамма-излучение + поли 50 0,58 82 0,36 263 Таблица 2 Влияние полимера ППИДААХ на выживаемость мышей Р (СВА х С 57 В 1/6 Л)при облучении ДозаполиЧисло выживших мышей приприменении полимера ДозагаммаЧисло выживУсловия опыта излучения,рад мера, мг/кг ших мышей, Т(1 Фактор) до облуцения после облуче- ния 12,5 100 25,0 100 50 бб 500 100 600 500 25 100 600 25 100 КонтрольПолимерГамма-излучениеГамма-излуче"ние + полимерГамма-излучение + полимер Гамма-излучение + полимер Гамма-излучение + дибунол Полимер Полимер ПолимерГамма-излучение Гамма-излучениеГамма-излучение + полимер Гамма-излучение + полимер 24,0+1, 5519, 23:5, 365,5+0,331,6+1,216320 Л 1 Таблица 3 Влияние полимера (конц 20 мг/л) на частоту аберраций хромосом, индуцированных гамма-излучением (4,88 Гр) и семенах ячменя Аберрации Иетафазы Вариант обработки Число на 100 мета- фаз С аберрациями число+ % 643 Гамма-излучение +полимер 0,23+0,23 0,002 0,23 Н),23 . 1 426 1 Полимер + гаммаизлучение 345 2 О, 58+0, 21 2 0,58+0,41 0,006Заказ 1375 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж-З 5, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-нздательсий комбинат "Патент", г,ужгородул. Гагарина,01 КонтрольГамма-излучение Проанализировано 2)49+0,87 924, 14 1,69 194 2,80+0,9330,1 Ж 2,17 Числоаберраций на1 клетку 0,028 0,302