Способ диагностики респираторных аллергозов

(504 001 М 3 САНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ДЕТЕЛЬС А ВТОРСКОМ и институт Рушу пка ова А.Н И. Аплерго ка, 1986,ЕСПИРАТОРс Я ится к медлергологии е выше- Чхеми- мого ыдыха содержащиив течениет разливаоэдух в к амеру, ох 0 мин По льной диалерген реедователь контроль ю ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИНЫХ АЛЛЕРГОЗОВ(57) Изобретение относцине, в частности к ал Изобретение относится к меди и используется в частности, для агностики респираторных аллерго любой период заболевания. Целью изобретения является п ние точности и снижение травмат ности способа за счет измерЕния люминесценции конденсата выдыха воздуха. Способ осуществляется следую образом,Больному у тельного полотром натощак, после тща скания рта физиологичес м раствором, предлагают онденсоприемник,лажденную льдом,лученный конденс во флаконы по 0,5 мл. В2Цель - снижение травматичности и повышение точности. Для этого у боль ного натощак производят забор конденсата выдыхаемого воздуха, добавля ют исследуемый аллерген, раствор томинола, смесь термостатируют 30 мин, добавляют перекись водорода и измеряют светосумму хемилюминесценции и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы, не содержащей аллергена, диаг ностируют респираторный аллергоз, Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания, Точность диагностики составляет 98%.1 табл. ный Флакон добавляют 0,05 мл Физиологического раствора, в опытные - по 0,05 мл исследуемых аллергенов (растительного, бактериального, эпи-, дермального, грибкового и др. происхождения), Во все пробы вносят по 0,05 мл 2.8 мК ояствопа люминола и, после 30-минутной инкубации в термостате - 0,1 мп 3%-ного раствора перекиси водорода, Проводят измерение светосуммы хемилюминесцентного свече" ния контрольных и опытных проб за 10 с с помощью АЗУ, и при увеличении числа импульсов в опытной пробе в 2 и более раз по сравнению с контро гностируют специфический ал спираторного тракта, ано, респираторный аллергоз.П р и м е р 1Ребенок К., 4 лет,поступил с жалобами на приступыудушья, возникающие, в основном, внезапно, среди полного здоровья. В весенне-летний период приступы чащевозникают на улице, в осеине-зимний -чаще дома, Ребенок поступил в период обострения с выраженными признаками бронхиальной осбтрукции. Состояние средней тяжести, Одышка смешанного ( преимущественно зкспираторного)характера, частота дыхания - 38 в минуту. Кожные покровы бледные, периоральный цианоэ, синева под глазами.При физикальном исследовании: коробочный оттенок перкуторного тона надвсей поверхностью легких; дыханиежесткое, выдох удлинен, рассеянныесухие и разнокалиберные малозвучныевлажные хрипы с двух сторон, Границысердца в пределах возрастной нормы,тоны несколько приглушены, тахикардия (частота сердцебиения 120 в минуту).25Анализ крови: эритроциты 4,5 %О /л, гемоглобин 125 г/л; лейкоциты 6,4 в 1 Ч /л; формула крови: з;9п, с; л, м, СОЭмм/ч,Подбор испытуемых аллергенов произведен с учетом тщательного анализаанамнеза жизни ребенка. Было создано18 проб (17 опытных и одна контрольная), В первую (контрольную) пробудобавляли 0,05 мл физиологическогораствора, во 2-18-ю добавляют по350,05 мл следующих исследуемых аллергенов: 2-я проба - домашняя пыль,3-я - пыль подсолнуха, 4-я - пылькукурузы, 5-я - пыль ольхи, 6-япыль пырея, 7-я пыль костра, 8-япыль лещины, 9-я - пыль полыни,10-я - пыль ржи, 11-я - пыль одуванчика, 12-я - пыль клена, 13-я - пыльдуба 14-я - пыль лебеды 15-я - ко 145шачья шерсть, 16-я - коровья шерсть,17-я - кроличья шерсть, 18-я - собачья шерсть.Для проведения диагностики респираторного аллергоэа согласно пред 50лагаемому способу у больного утромнатощак после полоскания рта физиологическим раствором проведен заборконденсата респираторного тракта,который распределяли в контрольнуюпробу и в пробы, содержащие исследуемые аллергены по 0,5 мп Во всепробы вносили по 0,05 мл 2,8 мМ раствора люминола и, после инкубации втермостате в течение 30 мин вносили 0,1 мл 37,-ного раствора перекиси водорода, затем проводили измерение светосуммы хемилюминесценции за 1 О с с помощью йЭУ.В таблице приведены полученные результаты исследований. УровеньхемилюминесПроба,(в импульсахфототонов) 10 11 12 13 14 15 16 17 18 122300 124589 574677 123742 615761 494350 258539 169327 198863 178249 125068 121301 287789 686852 119400 128375 110311 122168 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Как свидетельствуют приведенные данные, повышение хемилюминесцентного свечения в 2 и более раз по сравнению с контрольной пробой отмечалось в пробе3 (пыльца кукурузы),6 (пыльца пырея),13 (пыль дуба) и7 (пыль костра). Наиболее высокие значения хемилюминесценции отмечены в пробе5 (пыль ольхи) и14 (пыль лебеды).Результаты полученных исследований позволили диагностировать респираторный аллергоэ - повышенную чувствительность к указанным растительным аллергенам и отсутствие сенсибилизации к другим испытуемым аллергенам (растительного и бактериального происхождения). Приступы удушья зимой были связаны с наличием печного отопления, в летнее время - с атопической сенсибилизацией к растительным (пыльцевым) аллергенам,Учитывая отсутствие обострения заболевания в настоящее время, для подтверждения диагностической значимости укаэанных аллергенов ребенку проведено кожное тестирование. При этом положительные реакции, проявляющиеся на коже в виде волдыря с ди 5 15291аметром 0,5 мм, окруженного гиперемией, получены с аллергенами, вызывающими усилие хемилюминесценции конденсата респираторного тракта в 2 иболее раз (пыль подсолнуха, пыль пы 5рея, пыль костра, пыль дуба), Кожнаяреакция на пыль ольхи и пыль лебедыбыла резко положительной 1,волдырьс гиперемией в диаметре более 10 мм),что подтверждает высокую точностьпредлагаемого способа. При использовании аллергенов, не вызывающих изменения вспышки хемилюминесценции,кожные реакции были отрицательнымиПровокационный ингаляционный тестбыл проведен с этиологически значимым аллергеном (пыльцой пырея) иэтиологически незначимым аллергеном(пыльцой одуванчика), однако в обоих случаях получен положительный результат, проявляющийся бронхоспазмом (коэффициент бронхоспазмы составлял соответственно 23 и 257,).П р и м е р 2, Ребенок Г., 4 лет, 25поступила с диагнозом: бронхиальнаяастма, смешанная форма, тяжелое течение, приступный период. Выраженабледность, синева под глазами, периоральный цианоз, экспираторная одышка. В легких тимпанический оттенокперкуторного тона, дыхание ослаблено,выдох удлинен, множество рассеянныхсухих и разнокалиберных незвучныхвлажных хрипов с двух сторон, Изанамнеза выяснено, что девочка болеет в течение 1,5 лет. Приступы удушьявозникают как в связи с острыми респираторными заболеваниями, так ивне вирусно-бактериального поражения 40респираторного тракта.Было создано 29 проб. Кроме перечисленных в примере 1 проб с аллергенами растительного и эпидермальногопроисхождения были созданы пробы сгрибковыми аллергенами: Альтернария,Кладоспориум, Пенициллинум, Ботрис,Аспергилюс; а также бактериальнымиаллергенами: нейссерия катарралис,гемофилюс инфлюенце, гемолитическогострептококка, гемолитического стафилококка, бациллюс субтиллис, кишечной палочки,17 6Всего было собрацо 30 мч коцдецсата, которые разделили на пробы по 0,5 мЛ и провели исследование согласно методике предлагаемого способа. В результате проведенных исследований получены следующие данные: хемилюминесцентное свечение в контроле 223510 имп,/10 с; в пробе, содержащей аллерген нейссерия катарралис 506171 имп./10 с 1 в пробе, содержащей аллерген рода Аспергилюс 455521 имп,/1 О с 1 в пробе, содержащей пыльцу полыни 532900 имп,/10 с. Хемилюмицесцентное свечение в пробах с другими аллергенами существенно не отличалось от такового в контроле. На основании усиления хемилюминесценции в пробах, содержащих аллергены нейссерия катарралис, грибы рода Аспергилюс и пыльцу полыни, в 2 и более раз по сравнению с контролем установлена диагностическая значимость указанных аллергенов,Для подтверждения точности способа проведена алпергодиагцостика известными методами. учитывая выраженное обострение, постановка ингачяционного провокационного теста и кожного тестирования была невозможной. Исследование проведено методами 1 п т 1 Сго. Получены следующие результаты, Положитечьные данные, свидетельствующие о сенсибилизации к нейссерия катарралис получены в реакции бластцой трансформации (РБТЛ с фГА 21,57.; РБТЛ с нейссерия катарралис 417), в то время как при исследовании другими методами ( ППН, реакция дегрануляции базофцлов, торможение миграции лейкоцитов) специфическая сенсибилизация к этому алл ргену не обнаруживалась, Положительная реакция на пыльцу полыни (25%) получена методом дегрануляции базофилов, в то время как проведение других проб дп ч 11 го (РБТЛ, реакции торможения лейкоцитов, ППН) це дали положительных результатов, Гпецифическую сенсибилизацию к грибкам рода Аспергилюс удалось выявить только методом ППН (0,24).Конденсат из респираторного тракта больного был собран за 2 дня (до проведения исследования конденсат, собранный в первый день хранили в морозильцом отделении холодильника),Выявленный спектр этиологически значимых бактериальцмх аллергенов у данного больного явился обоснованием для проведения ацтибактериально - го лечения, что позволило быстро ликвидировать явления обострения,Заказ 7634/39 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 Учитывая то, что грибки рода Аспергилюс преимущественно вегитируют в сырых помещениях, дано заключение о необходимости улучшения квартир 5 ных условий. таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно и объективно диагностировать респираторные аллергозы и специфичность аллергенов. Точность диагностики по предлагаемому способу составляет 98 , Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания,Формула изобретенияСпособ диагностики респираторных аллергозов путем оценки аллергической реакции, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и снижения травматичности, производят сбор конденсата из выдыхаемого -. воздуха, добавляют к нему исследуемый аллерген, раствор люминола и раствор перекиси водорода, затем измеряют интенсивность хемилюминесценции полученного образца и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы, диагностируют респираторный аллергоз, 1