Способ определения рубомицина

СОВЕТСМИХ ЛИСТИЧЕСН 51) С 01 0 21 ВЕННЫЙ НОМИТЕТЕТЕНИЯ 4 И ОТКРЫТИЯСССР ГОСУДИЗОИ ГКНТ ОП ЗОБРЕТЕНИ ДЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКОМ Бюл, Р прибавляют(71) Курский государственный медици ский институт(56).Временная фармакопейная статья 42-713-78. Рубомиции гидрохлорид 20 мг и 40 мг.БерапьаК М.Б., Темпа Е.Б. РегегпапаГоп ой айгавусп апй ЙаопогцЬ 1 сдп п огпе Ьу Ь 8 ЬрегГогвапсе 1 ЦпЫ сЬгошагодгарЬу мгЬ 1 азег Е 1 оогоаесгс йесессхоп. Б. СЬговаго 1980, 190, У 2, 377-383 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения лекарственного препаратарубомицина и может быть применено для анализа этого соединения в различном биологическом материале, необходимом для клинических исследований для соединения рациональной схемы лечения индивидуального больного.Цель изобретения - ловьппение чувствительности, избирательности и экспрессиости анализа биологических объектов с концентрацией рубомицина 0,01-30 мкг/мл.Способ осуществляют следующим образом.Анализируемую пробу растворяют в диметилформамиде, к 1 кп полученного раствора добавляют 8 мл диметилформамидв, 1 мл 1 Х-ного раствора ацетата магния в диметилформамиде, переме 80148764(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РУБОЮЩИНА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения рубомицина в лекарственных формах и биологических жидкостях. Цель - повьппение избирательности, чувстви- тельности и экспрессности. К анализируемому раствору в диметилформамиде прибавляют ацетат магния в диметипформамиде. Измеряют интенсивность флуоресценции раствора в ультрафиолетовой области. Спектр возбуждения Флуоресценции лежит от 460 до 580 нм с максимумом 562 нм, спектр измереню Флуоресценции лежит от 570 до 660 нмс максимумом 616 нм. 4 табл . шивают, а затем измеряют интенсивно флуоресценции полученного при этом раствора, спектр возбуждения Флуоре ценции которого лежит от 440 до 580 нм с максимумом 562 нм, а спектр излучения флуоресценции от 570 до 660 нм с максимумом 616 нм.Прямолинейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и конконцентрацией рубомицина лежит от 0,01 до 30 мкг/мл (табл; 1).Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации,вцетатв магния в диметилформамиде приведена в табл, 2. Чувствительность способа 0,05 мкг/мл,П р и м е р 1, Качественное олр деление рубомицина.К О, 1-1 мг препарата5 мл диметилформамида, 11 Х-ного раствора а таметилформамиде, встряхивают и в ультрафиолетовом свете со светофильтром УФСнаблюдают оранжевую Флуоресценцию. Подобную флуоресценцию не дают оливомицин, карминомицин, адриамицин, брунеомицин, дактиномицин, блеомицин (противоопухолевые анти" биотики).П р и м е р 2. Количественное оп- О ределение рубомицина в ампулах по 0,02 г, Точную навеску (0,02 г) пре" парата помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, прибавляют Имл днметилформамида, встряхивают до растворения и добавляют диметилформамид до метки. К 0,5 мл данного раствора, прибавляют 8,5 мп диметилформамида,кл %-ного раствора ацетата магния, перемешивают и Флуориметрируют отно сительно стандартного раствора рубомицина. Для чего к 1 мл стандартного раствора рубомицииа с содержанием 100 мкг/мл прибавляют 8 мл диметилФормамида, 1 мл 1%-ного раствора 25 ацетата магния в диметилформамиде, перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами,Результаты количественного определения рубомицина в лекарственной фор ме представлены в табл, 3. П р и м е р 3. Количественное определение рубомицина в крови.К 1-3 мп сыворотки крови прибав 35 ляют 2 мл дистиллированной воды, 2 мл буферного раствора с рН 8,4, О мл раствора хлороформа и метилового спирта (9:1), и встряхивают 2-3 мин. Затеи центрифугируют 2-3 мин при 40 3000 обмин. Хлороформный слой переносят в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане досуха. К сухому остатку прибавляют 9 мл диметилформамида,мл 1%-ного раствора ацетата 45 магния в диметилформамиде, переносятв кюветку и флуориметрируют относительно стандартного раствора рубомицина. Для чего в ряд пробирок вносят по 0,1, 0,5, 1 мл раствора рубомицина с содержанием 10 мкг/мл, прибавляют соответственно 8,9, 8,5, 8 мл диметилформамида, помл 1%- ного раствора ацетата магния в диме" тилформамиде, перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами. Результаты определе" ния рубомицина в крови приведены в табл, 4. Предлагаемый способ определениярубомицина в 5 раз чувствительнееизвестного, а высокая избирательнаяспособность этого способа позволяетиспользовать его в фармацевтическихи контрольно-аналитических лабораториях ЦЗЛ для качественного и количественного анализа в лекарственныхФормах, в воздухе рабочей эоны промышленных предприятий и при биофармацевтических и фарматокинетических исследованиях при раэработке оптимальных лекарственных форм, дозы иритма назначения для оптимизации иускорения лечения больных.Подобной реакции не дают и немешают определению близкие по структуре соединения (оливомицин, карминомицин, адриамицин, брунеомицин,дактиномицин, блеомицин), а такжеодновременно назначаемые (аскорбиновая, глютаминовая, никотиновая, фолиевая дегидрохолиевая кислоты; аминазин, анальгин, Фенобарбитал, кордиамин, димедрол, промедол, морфин,тиофосфамид, бензотеф, сарколизин,метотрексат, допан, новэмбихин, эмбихин, циклофосфан, фосфамид, цитембена, дибунол, меркаптопурин, фторурацил, фторафур),Предлагаемый способ более экспрес"сен по сравнению с известным способом, На его осуществление требуетсяв 4 раза меньше времени, чем известным способом,. так анализ предлагаемымспособом осуществляется за 20 мин,в та время как известным за 1,5 ч.При анализе используются широкораспространенные реактивы, такие какацетат магния, диметилформамид, хлороформ, что определяет экономическуюцелесообразность предложенного спо"соба в практике аналитических н биохимических лабораторий при оценкеэффективности и безопасности егоназн,ачения при лечении различныхопухолей.формула изобретенияСпособ определения рубомицина, включающий растворение анализируемой пробы, возбуждение и измерение интенсивности его флуоресценции, по величине которой проводится определение, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности, избирательности и экспрессности ана"5 1487642Влиза биологических объектов с концепт. вают 1-27-ным раствором ацетата маграцией рубомицина 0,01-30 мкг/мл в ния, облучают,при длине волны возбукприсутствии протнвоопухолевых анти- дающего света 562 нм и регистрируют биотиков, анализируемую пробу раст" интенсивность флуоресценции при дливоряют в диметилформамще, обрабаты- не волны 616 нм.1Таблица 1 Концентрация, мкг/мл Относительная-интенсивность флуоресценции1487642 ,Таблица 4 Взято крови Найдено, икг/млчерез после.- а/в введе-. 11.07.87ния, мин 18.08 10 б 20 2 300 Составител Редактор И.Васипьева Техред Л.О юю юеююееюааииО.Бадтиева .лидице Корректор И,Васильева одписное о изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР35, Рауаская наб д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.уагород, ул. Гагарина,1 Заказ 34 б 9 ТиракВЯИИПИ Государственного комитета113035, Москва,7,42,90