Способ получения основы питательных сред для культивирования микроорганизмов

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИН 616/20 1)4 С ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН 113 "%ЯРдр,У 22 едбвательская лабоски активных вещест ич, Н,В, Козлова, Т.Ф, Забара, О.Г.СаЛиходед, Г,М. Дробыв, Н.Ф. Бабич, М, Раскин и С.В.Де 8. 8)ания экспертов социадля стандартизации сред. М.: 1975,ХОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Тезисы совещлиетических странсухих питательныхс. 34-42.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОСНОВЫ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ(57) Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии иможет быть использовано для полученияосновных питательных сред для биотехнологии. Целью изобретения являетсяповьппение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа.Органы или мышечные ткани ластоногих,преимущественно тюленей, имеющих утробный и вторичный волосяной покров,измельчают, заливают водой, подогре"вают и устанавливают рН 8,0. Добавляют источник ферментов, используяферментосодержащие органы животноготого же вида, после чего проводят гидролиз. Гидролизат фиксируют и высушивают. Дпя упрощения способа мьппечныеткани ластоногик измельчают вместес костями. 2 з.п, ф-лы, 1 табл.Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии иможет быть использовано для получения основных питательных сред длябиотехнологии.Цель изобретения - повышение ростовых свойств, стандартизация среды иупрощение способа.В способе получения основы питательных сред гидролизу подвергают ор"ганы и мышечные ткани ластоногих,преимущественно молодняка тюленей,имеющих утробный или вторичный волосяной покров. Источниками ферментовпри гидролизе являются ферментосодержащие органы того же вида животных. В качестве сырья используют органы и мышечные ткани зеленца, белька,,хохлаченка, серки, сиваря или взрос,лых особей, например нерпы,Кроме того, при использовании длягидролиза мышечных тканей ластоногих их предварительно измельчаютВместе .с костями, что упрощает способ 25П р и м е р 1, Тушку беломорскоготюленя с утробным волосяным покровом,белька), освобожденную от шкуры,Очищают от жира, удаляют внутренниеОрганы, голову и заднюю ласту. Мышечную ткань измельчают в мясорубкевместе с костями. 1 кг полученного мясо-костного фарша заливают 2 л водоопроводной воды, подогретой до 50 С,9 станавливают рН 8,0, добавляют 100 гфарша поджелудочной железы белька ипроводят гидролиз в течение 24 ч. Гидролизат отделяют от осадка фильтрованйем, подкисляют уксусной кислотой дорН 5,4, кипятят и фильтруют. ФильтратвЫсушивают на распылительной сушилке,Содержание аминного азота в полученной основе составляет 7,77.В отличие от телят, ластоногие непОдвергаются ветеринарной обработке,поэтому предлагаемое сырье не содержит антибиотиков и других средств,пОдавляющих рост микробов, что положительно влияет на качество получаемыхиз этого сырья питательных сред длякультивирования микроорганизмов. Существенное улучшение качества среддостигается также за счет повышениястандартности сырья путем использования преимущественно молодых животных,имеющих утробный или вторичный волося ной покров, Это объясняется тем, чтов силу биологических особенностей организма смена меховых стадий развития модуляции молодых тюленей происходит синхронно .и в сжатые сроки.Например, возраст всей популяции новорожденных тюленей, находящихся в меховой стадии белька (утробный волосяной покров), не превышает 10-12 дней,после чего синхронно наступает стадиялиньки, заканчивающаяся к сороковомудню жизни меховой стадией серки вторичный волосяной покров), На этихранних стадиях развития тюлени питаются только материнским молоком,Таким образом, предлагаемое сырьестандартно по возрасту и факторампитания, что повышает стандартностьполучаемых из него питательных сред,Молодых животных легко отличить по качеству и цвету меха.Основные питательные среды, полученные по предлагаемому способу, содержат до 87. аминного азота, т,е.почти в 2 раза больше, чем в прототипе, что выражается в усилении ростамикроорганизмов и в снижении расходаосновы при приготовлении питательныхсред,Например, для приготовления 1 лпитательного бульона, содержащего100 мг 7. аминного азота, необходимоизрасходовать 12,5 г сухой основнойсреды, полученной по предлагаемомуспособу и содержащей 87, аминного азота. В то же время пептического гидролизата, полученного по способу-прототипу и содержащего 2,67, аминногоазота, для приготовления 1 л бульонапотребуется израсходовать 38 г, чтопримерно в 3 раза больше,Повышенное содержание аминногоазота (до 87.) в основных средах, получаемых по предлагаемому способу,достигается оптимизацией условий гидролиза за счет испольования ферментосодержащих органов ластоногих тогоже вида, например поджелудочной железы тюленя, что способствует более высокому сродству между ферментами исубстратом.Повышение качества основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, выражающееся в существенном улучшении их ростовых свойств, иллюстрируются данными, приведенными в табл. 1 и 2.Результаты оценки качества образцов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с производственной серией4026 среды на основе триптического пептона, полученного по способу-прототипу, приведены в таблице.Результаты оценки качества образ 5 цов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с основной питательной средой фирмы "П 1 Гсо" (США) следующие:Основа среды Рост культуры 1 ОКитта-Тароцци с 1 овСгЫ 1 цш почу Соейешайепзштамм 198Ферментатив- Рост типичныйный гидроли-Спорообразование 15зат мясоко- низкое ЗО робных клеток на среде из мяса теленка через 48 ч примерно в 10 тыс. раз меньше, чем на среде из сердца бель ка и почти в 10 раз меньше, чем на среде из мясокостного фарша серки.Результаты, приведенные вышее, свидетельствуют о более высоком качестве основных сред, полученных по предлагаемому способу, чем известный питательный бульон фирмы "П 1 йсо" (США), изготовленный из мяса крупного рогатого скота и являющегося одиним из лучших зарубежных образцов. Указан 50 ные основы были использованы в среде Китта-Тароцци для "требовательной" культуры анаэроба с 1 ов 1 гЫцш иочуз. (осйешаСзепз), на импортной среде рост культуры отсутствовал.Низкое спорообразование у бакте 55 риальных клеток на средах из сырья ластоногих свидетельствует об их высокой питательной ценности. Формула изобре тения1. Способ получения основы питательных сред для культивирования микроорганизмов путем ферментативного, гидролиза животного сырья, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью улучшения ростовых свойств среды, в качестве сырья используют органы и ткани ластоногих, а в качестве источника ферментов для гидролиза - ферментсодержащие органы животных того же вида ластоногих. стного фарша белька +печень белькаФерментативный Рост типичныйгидролизат Спорообразованиесердца сива- низкоеря + печеньсиваряПитательный Рост отсутствуетбульон "Пдйсоиз мяса крупного рогатогоскота (США) ++ печень КРСИз данных, приведенных в таблице, видно, что основные среды, приготовленные по предлагаемому способу, существенно превосходят по ростовым свойствам среду, приготовленную на основе триптического гидролизата мяса теленка. Например, количество микб4При использовании в качестве сырьямышечных тканей ластоногих их можно измельчать и гидролизовать вместе с костями, что обеспечивается особенностями костно-мышечной системы молодых ластоногих, Это также способствует поны - шению питательной ценности целевого продукта, Кости являются источником, необходимых для роста микроорганизмов2+ таких неорганических ионов, как Са РО., а также продуктов гидролиза кол 3лагена, составляющего 90-9 б% органического матрикса кости. Помимо повышения качества это исключает трудоемкую стадию отделения мяса от костей и повышает выход целевого продукта за счет безотходного использованиямяса.В отличие от используемых в прототипе телят, являющихся ценным пищевым продуктом, предлагаемые виды сырья ластоногих не являются пищевыми продуктами. Кроме того, используемые в предлагаемом способе такие ферментосодержащие органы ластоногих, как кишечник, желудок, поджелудочная железа, являются неутилизируемыми отходами зверобойного промысла.Поэтому предлагаемый способ высокоэкономичен, Он позволяет значительно расширить сырьевую базу для промышленного получения высококачествен-ных стандартных микробиологических сред за счет рационального и комплексного использования полноценного в питательном отношении, но непищевого сырья ластоногих, в том числе отходов регулярного зверобойного промысла,Наряду с повышением качества, уменьшением расхода готового продукта и расширением сырьевой базы, предлагаемое новое техническое решение позволяет также упростить способ получения сред и повысить выход целевого продукта.3. Способ по пп.и 2, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью стандартизации среды, в качестве сырья, используют органы и ткани тюленей, имеющих утробный или вторичный волосянои покров. Вид сырья Основа среды 24 48 Ферментативныйгидролизат Мясо костный фаршсерки 1,1 10 103 Ферментативныйгидролизат Сердце белька 1,01 О 1,103 Триптическийпептон (серия 76) Мясо теленка 1,5 10 1,8 10 Составитель Н,КузенковаРедактор Н. Киштулинец Техред А,Кравчук Корректор С. Шекмар Заказ 2826/18 Тираж 520 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 313035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 5 14026162. Способ по и. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью упрощения способа, мышечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями,5 рост культуры 1 ег зпда епйогосо 1 ч 1 са (кол"во микробн. кл./мл), через ч