Способ лабораторной диагностики стронгилоидоза

(51 РЕТЕ ЕТЕПЬСТВ СТИбораезней, итных при- идо- вля- споии миграции лиисследования бепомещают на меСеточку с фека- . лянную банку и банки .заливаоро хлористого 40-45 С, Через ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ ОПИСАНИЕ Н АВТОРСКОМУ СВ(56) Исупов 10,И. и др, Упрощенныйметод лабораторной диагностики строгилоидоза, Медицинская паразитология и паразитные болезни, 1978,В 2, с. 108-110.(54) СПОСОБ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГКИ СТРОНГИЛОИДОЗА ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к лторной диагностике заразных болв частности к диагностике параболезней человека, и может бытменено для диагностики стронгилза человека. Целью изобретенияется повьппение чувствительность соба за счет стимуля чинок гельминта. Для рут навеску фекалий, таллическую сеточку. лиями опускают в сте осторожно по стенкам ют 0,9-1,2%-ным раст натрия, подогретым д 20 мин сеточку с фекалиями удаляют.Раствор хлористого натрия, в которомвыдерживались фекалии, сливают вцентрифужные пробирки и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин.Исследуют осадок путем микроскопирования. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида. Использование 0,9-1,2%-ного растворахлористого натрия позволяет выявлятьбольных с низкой интенсивностью инвазии (от 1 до 9 личинок в 3,0) в85,5-96% случаев, в то время как прииспользовании водопроводной воды -в 54,4% случаев, При средней интенсивности инвазии (от 10 до 50 личинок в 3,0) выявляемость больных строягилоидозом обоими способами составляет 100%. Однако при использованиирастворов хлористого натрия среднееколичество личинок в анализе значительно превышает таковое при применении водопроводной воды (8,4-11,1и 5,4 личинки соответственно). Способпозволяет при однократном обследовании населения на стронгилоидоз выявлять больных не только с высокой, нои в 85,5-96,4% с низкой интенсивностью инвазии. 3 табл.13246Изобретение относится к лабораторной диагностике заразных болезней, в частности к диагностике паразитных болезней человека.Цель изобретения - повышение 5чувствительности способа за счетстимуляции миграции личинок гельминта.П р и м е р 1. Для исследованияберут 3,0 г фекалий человека, которые помещают на металлические сеточки, прикрепленные к латунному ободкудиаметром 25-27 мм с ручкой. Сеточкис фекалиями помещают в стеклянныебаночки объемом 30 мл и осторожно постенкам баночки заливают 0,9 или1,2 -ным раствором хлористого натрияв количестве 15 мл, подогретым до40-45 СРаствор хлористого натрияцелесообразно готовить заранее и хранить перед употреблением в холодильнике до 1 мес,Через 20 мин выдерживания фекалийна сеточках в растворе хлористогонатрия сеточку с Фекалиями удаляют.Фекалии сбрасываются в 0,5-литровыестеклянные банки и заливаются5%-ным лизолом, а сеточки впоследствии обрабатывают кипячением.Раствор хлористого натрия, в котором выдерживались фекалии, из баночексливают в две центрифужные пробиркии центрифугируют при 1500 об/мин втечение 2 мин. После центрифугирования верхнюю часть жидкости из центрифужных пробирок осторожно сливают,оставляя в осадке около 1 мл жидкости. Осадок распределяют на два-трипредметных стекла и микроскопируютпод увеличением Зх 7 во всех поляхзрения в пределах препарата. При обнаружении подвижных личинок их идентифицируют до вида.Проводят 327 параллельных анализов фекалий, из них с 0,6, 0,9 и1,2%-ми растворами хлористого натрия,а также с водой по 78 анализов, С0,3/-ным раствором хлористого натрияпроводят 15 анализов.В связи с обнаруженной недостаточной эффективностью этого раствораанализы с ним прекращаютПроводятединичные анализы фекалий с 1,5%-нымраствором хлористого натрия. Результаты представлены в табл. 1, иэ которой видно, что при использованииводы положительные результаты показывают 54,5+6,7% анализов, а при ис 45 2пользовании 0,6-1,27-ных растворов хлористого натрия доля положительных результатов воэростает до 80,0-96,47 (р с 0,01). Наиболее высокая выявляемость личинок наблюдалась при применении 0,9-1,27-ных растворов (85,5- 96,4%), При средней интенсивности инвазии результаты всех анализов Фекалий, как при использовании воды, так и солевых растворов, положительны.Наблюдается также разница в средних числах личинок в исследованных навесках фекалий при применении разных жидких сред , представленных в табл. 2. Это число при низкой интенсивности инвазии повышается с 0,75 при использовании воды до 2,2- 3, 1 личинок при использовании 0,9- 1,27.-ных солевых растворов. Такая же закономерность наблюдается и при средней интенсивности инваэии.Таким образом, солевые растворы при определенных концентрациях раздражающе действуют на рабдитовидных личинок и тем самым способствуют более интенсивной их миграции из фекалий, При применении 1,5 -го раствора хлористого натрия наблюдается также интенсивное выделение рабдитовидных личинок из фекалий, однако в этом растворе через 20 мин наблюдается утрата личинками двигательной способности (до 70% личинок), Указанная концентрация соли является чрезмерно высокой для сохранения жизнеспособности личинок данного гельминта. П р и м е р 2. В клинических условиях проводят 79 параллельных исследований фекалий. больных стронгилоидозом по модификации, метода Берманас использованием в качестве жидких сред подогретых до 40-45 С водопроводной воды и 0,97.-го раствора хлористого натрия. Результаты исследования представлены а табл. 3.Как видно иэ табл. 3, при использовании водопроводной воды общая выявляемость личинок достигает 89,9%, но при низкой их концентрации онасоставляет 46,7%. В то же время приприменении 0,9%-го солевого раствораобщая выявляемость личинок достигает97,9 , т,е. приближается к максимальному возможному уровню. При низкойконцентрации личинок их выявляемость также высока (87,5%), намного превы3 1324645 4шающая соответствующий показатель помещение исследуемого материала на при использовании воды (р( 0,01). металлическую сетку, выдерживание вТаким образом, способ позволяет горячей воде в течение 20-30 мин с при однократном обследовании населе- последующим исследованием осадка, ння на стронгилоидоз выявлять боль о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, ных не только с высокой, но и в 85,5- с целью повышения чувствительности 96,4 Е с низкой интенсивностью инвазии, способа за счет стимуляции миграции ф о р м у л а и з о б р е т е н и я личинок гельминта, в горячую воду доСпособ лабораторной диагностики полнительно вводят раствор хлористого стронгилоидоза человека, включающий 10 натрия до концентрации 0,9-1,23.Таблица Низкая концентрация личинок в фекалиях (до 9 в 3 г), Жидкая среда Средняя концентрацияличинок в фекалиях(10-50 в 3 г) коли- из по- Хчество ложи 7+м колииз почество ложианали- тельных акали- тельных зов зов Водопроводнаявода 23 100 23 54,5 + 6,6 30 Раствор хлористого натрия0,37-ный 60,0 + 12,680,0 + 5,485,5 + 4,796,4 +2,5 100 23 23 0,67-ный 100 23 23 0,9 Ж-ный 100 23 23 1,2 Х-ный Таблица 2 Низкая концентрация личинок в фекалиях (до 9 в 3 г) Средняя концентрация личинок в фекалиях (10-50 в 3 г) Жидкая среда всего хф 6 х+6 всего личиколичествоаналиколичестно личинок анализов нок зовВодопроводная вода 125 5,4 + 5,9 41 0,75+ 1,09 23 Раствор хлористого натрия 14 0,93 ф 1,0992 1,672,09 23 121 2,20 2,11 23 171 3, 1 О+ 2, 10 23 0,37-ный 0,6 Х-ный 55 171 7,4 +5,5 194 8,4+ 4,3 О, 97-ный 1 ЗЕ ный 256 11,18,91324645 Таблица 3 Концентрация личинок Водопроводная вода 0,9 й-ный раствор хлористого натриякОли из них Е + мчество полоана- жительЛИ 9 ОВ НОФеВ М Юееа ае еа ае 7 . 46 7112 9 24 21 87,5+6,8 100 124 121 64 100 71 89, 9+3, 4 145 142 97,9+1,2 Составитель В. Романова Редактор П. Гереши Техред И.Попович Корректор Е. РошкоЗаказ 298 ЦЗ Тираж 595 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-З 5, Раушская наб., д. 4/5еаае еееааеаеаеа Производственно"полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 НизкаяСредняя, высокаяВсего коли" из них чество положианали- тельных зов