Среда для разбавления криоконсервированной спермы хряков

( 9) ( 1) 1)4 А 61 Р;7/02 ЕТ СССР ОТНРЫТИ БРЕТЕН ТЕЛ ЬСТ рия Цитрат Пирува натрия Хлорисг кальци Сернок магний Унитио калия 2,00-3,000,10-0,20,12-0,3 ,20-0,3 идист анная стальн а ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИ ОПИСАН И К АВТОРСКОМУ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт разведения и генетики сельскохозяйственных животных(56) Ьагзаоп К., Епагззоп Б, "ТЬейече 1 оршеп 1 оГ а ргасСса 1 е ше 1 ЬойГог плеер Ггееъхпя оГ Ъоог", Богйчеег. шей 1977 г., 29,3; 313-318.Методические рекомендации по низкотемпературной консервации спермыхряков. Л 1980, с, 26, 48,(54)(57) СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯКРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ СПЕРМЫ ХРЯКОВ,содержащая цитрат натрия, цитрат ка"лия, пируват натрия унитиол и бидистиллированную воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью повышения подвижности продления времени переживания и повышения оплодотворяющей способности сперматозоидов, она дополнительно содержит фруктозу, инозитол, .сернокислый магний и хлористый кальций при следующем соотношении ингредиентов (в гна 1 л бидистиллированной воды);Фруктоза 15,00-25,00 Инозитол 15,00-25,00 Цитрат нат 2,65-2,80 0,60-0,85т1191073 2 концентрации этих компонентов снижат переживаемость сперматозоидов.Фруктоза и иноэитол - основныенеэлектролитные компоненты плазмыспермы хряка, служат энергетическимматериалом для гликолиза. Инозитол,кроме того, выполняет роль осмотического регулятора в сперме. Заменаглюкозы в среде на сочетание фрук 0 тозы и инозитола увеличивает пере, живаемость сперматозоидов на ЗЗХ7,7 ч против 5,8 ч в среде с глюкозой и на 717. по сравнению с временем переживания в известной среде.15 Допустимые пределы концентрации5, фруктозы и инозитола 15-25 г/л, Увеличение и уменьшение концентрацииинозитола и. фруктозы снижает переживаемость спермы,П р и м е р 3. Было проведеносравнительное испытание контрольнойсреды (прототип), среды. СЛЕП 1 аналог)и новой среды, содержащей оптимальные количества компонентов в г на 1 л:фруктоза 25, инозитол 15, цитрат натрия 2,76, цитрат калия 0,65, пируватнатрия 2,20 сернокислый магний 0,24,хлористый кальций 0,10, унитиол 0,21среда ФИП).Концентрированный эякулят послеотгаиваиия делили на части, разбав 20 25 30 35 Необходимость введения дополнительных ингредиентов в известную среду обоснована следующим. Пируват натрия " субстрат дыхания,. концентрация которого является лимитирукицим фактором, регулирующим энер гетический обмен. Пируват натрия в сочетании с ионами Саф и М 8 участФ Ь вует в регуляции проницаемости и транспортной функции мембран спермиев, АТФ-азной активности, акросом ной реакции, в процессе оплодотворения. Введение пирувата натрия в среду позволяет увеличить время переживания спермиев на 19 Е табл. 1 колонка 2), Увеличение концентрации 50 пирувата натрия в среде до 2,20- 3,30 г/л и одновременное введение в среду сернокислого магния 0,24 г/л и хлористого кальция 0,10 г/л позволяет увеличить переживаемость спер матозоидов на 2 ОЕ в сравнении с известной средой 5,8 ч против 4,5 прототип), Дальнейшее увеличение ОЛЕП. Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, преимущественно к средам для разбавления криоконсер" вированной,спермы хряков.Целью изобретения является повышение подвижности, времени переживания и оплодотворяющей способности сперматозоидов.П р и м е р 1. Предлагаемую среду готовят следующим образом. 1 литр биднстиллированной воды нагревают до кипения и в горячей воде раство" ряют, г; фруктоза 25, инозитол 15, цитрат натрия 2,76, цитрат калия 0,6 сернокислый магний 0,24, хлористый кальций 0,1, остужают до 40 и добавляют пируват натрия 2,20, унитиол 0,21. Депрессия точки за" мерзания среды 0,62-0,65, рН 7,4- 7,8.Приготовленной средой разбавляют оттаянную концентрированную сперму в отношении 1:3 или 1:4 при температуре среды 37 С.П р и м е р 2, В табл. 1 представлены результаты подбора оптимального соотношения компонентов новой среды, согласно которым наиболее высокая переживаемость сперматозоидов хряков (7,2-7,7 ч) наблюдается при соотношении компонентов, перечисленных в колонках 10 и 11. ляли исследуемыми средами в отношении 1:3 и оценивали по физиологическим и биохимическим показателям иоплодотворяющей способности. Результаты сравнительного испытания новой и известной сред, и = 20 представлены в табл. 2.Как видно из табл. 2, новая среда ФИП превосходит известную (прототип) и ОЛЕП по проценту подвижных сперматозоидов через 3 ч хранения в ней в 6 и 11 раз соответственно, по времени переживания на 71 и 1003 и сохранности акросом на 4 и 67 соответ" ственно. Величина стимуляции дыхания спермиев 2,4-динитрофенолом (ДНФ ),характеризующая функциональное состояние энергетической системы, в новой среде равна 2,5 против 1,8 и1,6 в контрольной среде и среде Оппсдотворяемость свинома 1 ок при использованли замороженно-оттаянной спермы, разбавленной предлагаемой средой, составляет 64,17 что на 29 выше, чем в контроле (Р : 0,05),Фло омло ОЪ сЧ л о,8 ОЛЕП ан алог 00,050,01 ф - различия достоверны приф - различия достоверны при - по литературным данным Составитель А.филипповаРедактор М,Митейко Техред З.Палий Коррект ирохман Подписное го комитета СССР ий и открытий Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Заказ 7048/4 Тираж 721 ВНИИПИ Государственн по делам изобрете 113035, Москва, Ж, Стимуляция дыхания2, 4-Д 1 фМ Поврежденныеахросомы,