Среда для разбавления и замораживания спермы быков

) С РЕДА РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯСПЕРМЫ БЫКОВ зволяющие храое в емя с со ные составы сред, понить сперму длительн р хрнением ее качества.Известна среда для разбавленияи замораживания спермы быков 13 бвключающая, вес,ь:ЦентриФугат воднойсуспензии куриногожелтка 15,0-16,0 10Цитрат натрия 1 78- 1,88Аминазин.Фосфат натрияГлицеринДистиллированная вода ОстальноеСреда для разбавлениязамораживания спермы быков представляет собой прозрачный коллоидный раствор и 0,02-0,08 4,5-4,6 1Изобретение относится к рецептуре сред для разбавления и замораживания спермы быков и может быть использовано в сельском хозяйстве на станциях искусственного осеменения животных.В связи с массовым искусственным осеменением животных существует необходимость в длительном хранении спермы. Для этого сперму разбавляют в специальных средах и заморажи" вают в виде гранул в облицованных гранулах или в соломинках. Форма замораживания определяется свойства" ми среды. Перед употреблением сперму размораживают, Качество размороженной спермы оценивают по ее оплодотворяющей способности, определяю" щейся активностью спермы (балл) и ее выживаемостью (ч) и зависит прежде всего от свойств среды, выбранной для разбавления и замораживания.В связи с этим необходимо разрабаты" вать новые и совершенствовать извест ьскии институт разведениупного рогатого скота(2,51-ный водный раствор)ГлюкозаТрилон БГликоколДвуэамещенныйфосфат натрияГлицеринЛимоннаякислотаДистиллированная вода 0,08-0)24 3)00-4,20 0,06-0,22 0,08-0,14 0,02-0,08 5,00-800 0,002"0,004 15,0"16,0 1,72- 1,85 Таблица 1 мпоненть СТ ТУ Центрифугат водносуспенэии куриногжелтка 15,0 э 16,0 1,80/ трат натрия Ами наэи н,14 0,14 0,10 ли коко фа узамещейньтрия О 4172 О,0,02,00 ф 7,00 6259-75 лицерин 3 91 с рН 6,9-7,2 и осмотрическим давлением, равным 7,0 атм. Среда позволяет определить качество спермы сразу после разбавления и пригодна для разбавления в соотношении от 1:1 до 1:3. Такое разбавление позволяет оплодотворить в год около 1000 коров спермой одного быка. Срок хранения среды около двух лет.Однако среда не пригодна для значительного разбавления, так как может нарушить протекающие в сперме ферментативные процессы. Вместе с тем разбавленная сперма, содержащая 30 млн ед, в спермодозе, характеризуется оплодотворяющей способностью около 613. Кроме того, сперма, разбавленная известной средой, пригодна для замораживания только в виде гранул.Целью изобретения является повышение оплодотворяющей способности спермы быков после размораживания.Поставленная цель достигается тем, что среда для разбавления и замораживания спермы быков дополнитель. но содержит лимонную кислоту при следующем соотношении компонентов, вес.3:Центрифугат воднойсуспензии куриногожелткаЦитрат натрия Остальноедо 1000 1 З Предлагаемая среда представляетсобой прозрачный коллоидный растворс рН 6,2-6,65 с осмотическим давлением, равным 1 О атм. Среда позволяет разбавить сперму быков в соотношении от 1:1 до 1:128 раз. Такоеразбавление позволяет оплодотворитьспермой одного быка около 5-6 тыс.коров в год, Кроме того, средапозволяет заморозить сперму быков и в виде гранул, в облицованных гранулах и соломинках.Срок хранения предлагаемой среды5 лет при 2-45 С.Приготовление среды для разбавлеЗ 11 ния и замораживания спермы проводятв соответствии с рабочими рецепту рами, примеры которых представленыв табл. 1.IОСТ ТУ Компоненты 1 2 3 4 5ж 0,002 0,002 0,003 0,0035 0,004 Вода дистиллированная до .100 до 100 до 100 до 100 до 100 П р и и е р. 1, Среду для разбавления и замораживания спермы готовят следующим образом.В колбу наливают 75 мл кипяченой дистиллированной воды при 40-50 С и прибавляют 20-25 мл свежеотделенных куриных желтков. Смесь взбалты. вают до гомогенного состояния, отстаивают 10 мин и центрифугируют 3 мин при 500 об/мин. Полученный центрифугат сливают, отбирают из него аликтовую часть и прибавляют к ней остальные компоненты. При необходимости в состав среды вводят антибиотики Объем смеси доводят до 100 мп дистиллированной водой,Полученную среду для разбавления и замораживания стерилиэуют по ме" тоду тиндализации при 60 фС в течение 1 ч. После этого среда пригодна дпя разбавления спермы и замораживания его в виде гранул в облицо ванных гранулах и соломинках.П р и м е р 2. Сперму быков разбавляют при 35-38 С в предлагаемой среде, приготовленной по рецепту 1 (табл. 1). Разбавление проводят в различных соотношениях.от 1:1 до 1:128 в зависимости от исходной ако Таблица 2-аАктивность спермы,балл 4,35 4 45 . 4 45 4,50 4,50 4,45 4,50 Выживаемостьспермы, чпри 38 фС 10,3 9,1 9,1 10,0 9,2 9,5 9,3 Лимонная кислота 6-09-584-75 Ции а иа па й тивности и концентрации спермы. Полученный раствор выдерживают в холо.,дильнике при 2 5 фС в течение 4-8 чдля эквилибрации. Затем разбавлен-.ную сперму замораживают жидким азотом по общепринятой методике в гранулах, облицованных гранулах и со"поминках.Замороженную сперму хранят30 дней в среде жидкого азота в сосу"де Дюара,По истечении этого времени сперму,.замороженную в виде гранул, раэмораживают в среде, содержащей, г:пятиводный цитрат натрия 1,75"1,85,глюкоза 4"6 и трилон Б 0,06-0,15на 100 мл дистиллированной воды,при 38 С. Сперму, замороженную в со 0ломинках или облицованных гранулах,размораживают без разбавителя. Затемпо стандартной методике определяютЭэактивность и выдерживаемость спермы. В табл. 2 представлены результаты определения этих величин для размороженной спермы, полученной от 10 быков, разбавленной в различном соотношении и замораживаемой в виде гранул.7 919675Из табл. 2 следует, что разбавление спермы даже в 128 раз не вызывает снижения ее активности и выживаемости. 15,0-16,0 1,72-1,85 0,08-0,24 3,00-4,20 0,06-0,22 0,08-0,14 Формула изобретения 0,02-,0,08 5,00-8,00 Оф 002-0100415Остальноедо 1004Источники информации,принятые во внимание при экспертизет 1. Авторское свидетельство СССРМ 536824 у кл, А 61 О 7/02 у Составитель Т. ТуляковаТехред И. Гайду Корректор Л. Бокшан Редактор Т. Веселова Тираж 717 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, И, Раушская наб., д. 4/5 Заказ 2205/4 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная,Среда для разбавления и замора живания спермы быков, включающаяцентрифугат водной суспензии куриного желтка, цитрат натрия, аминазин, глюкозу, трилон Б, гликокол, глицерин, двузамещенный фосфат натрия и дистиллированную воду, о т л иоч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения оплодотворяющей способности спермы, среда дополнительно содержит лимонную кислоту при следующем соотношении компонентов, вес.Ф: Центрифугат воднойсуспензии куриного, желт,каЦитрат натрияАминазина 2,5-ныйводный растворГлюкозаТрилон БГликоколДвузамещенныйфосфат натрияГлицеринЛимоннаякислота .Водадистиллированная