Способ консервации органов и тканей

978 А И 9) 01) ЕТ ВТОРС НСЕ РВАаюшийльфокситем, чтоности тза 1-24 БИИ ОРГАфих обработа,отс цельюрансплан татеч по упа- пиметил ролова, Я. Шпи пре лен сул титуторгановтельфф ввопят/кг. СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ ПИСАНИЕ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Научно-исследовательский инстрансплантологии и искусственныхи Всесоюзный заочный машиностроиный институт(54)(57) СПОСОБ КОНОВ И ТКАЙЕЙ, включку раствором пиметилсуличаюшийсяповышения жизнеспособпварительно поноруия органа или тканиьфоксип в позе 0,51056Изобретение относится к клинической и экспериментальной медицине, а именно трансплантологии.Известен способ консервации органов.и тканей, включающий их обработку расъ вором аиметилсульфоксиаа1 .Неаостатком известного способа является деструкция клеточных элементов ткани, лабилиэация диэосомального аппарата клетки, что ухудшает сохранность 10 отруктур транспдантата.Цель изобретения повышение жизнеспособности трансплантата. Поставленная цель достигается тем, 15 что согласно способу консервации органов и тканей, включающему введение в них аиметилсульфоксиаа, преаваритедьно ао нору за 1-24 ч ао уааления органа иди ткани вводят циметилсульфоксиа в ао зе 0,5 г/кг,П риме р 1. 5 крысамза 24 ч до опыта внутрибрюшинно вводят в аоТабл и па 1 35+2 18 0,34 Ф 0,06 63,8+12 69,8+1,8 57,6+2,0 ка 610,0 48+3 31+2 42+2 а Ф 0,04 0,74 ФО раце 0,59 Ю,04 0,08 77,0+1 рап и промывают 20 Ъным раствором ДМСО,как в примере 1. После промывки органы помещают в тот же раствор и хранятпри 4 С в течение 4 ч, По истечении5 указанного срока опреаеляют соаержаниемолочной кислоты в ткани и в окружающемрастворе, активность ЛОГ в ткани и вокружакщем растворе и активность ОНКазьей-П в ткани, Реэульгаты преаставлены0 в табл. 2,сам за 2 ч инно ввоаят пе 40 Ъ-ного крыс служаки уааляют. Из результатов видно достоверное 1 уменьшение степени повреждения почек н сераца после замораживания при использовании преалагаемого способа,П р и м е р 2 . 5 крь ао эксперимента внутрибрюш ДМСО в дозе 0,5 г/кг в в воаного раствора. 5 аругих лн контролем. Сердца и поч 978 3эе 0,5 г/кг аиметилсульфоксиа в виде 40%-ного воаного раствора. 5 других крыс, служили контролем. У всех животных поа гексеналовым наркозом удаляют сердце н почку и промывают 10%-ным раствором аиметилсульфоксиаа (ДМСО) на основе раствора адя консервации сераца, при 10 С в течение 10 мин и помешают в тот же раствор еше на 20 мин. После этого почки и сердце помешают в аппарат аля программного замораживания и охлаждают со скоростью 1 С/мин в интервалеотемпературот +10 ао - 10 фС исо скоростью 10 оС/мин ао -100 С.Замороженные органы извлекают и помешают в воаяную баню при +37 оС, После полного отогрева определяют слеауюшие параметрьп активность ЛДГ в гомогенате ткани, активность 3 НК-азы-П в гомогенате и окружающемрастворе и длительность изменения окислнтел ьно-восстановительного потенциала (ОВП) ткани. Полученные результаты представлены в табл. 1., Т а б л и и а4 онтроль ез за 0,014 00+ О, 105 37 СН 0,042 0,20 0 ц а 3 ДМ нотному с последующей обработкой 10%-ным раствором ,О МСО (предлагаемый способ) Контроль ( Обработка 10%раствором ДМС (известный снос без защиты) 3+3,11,8+2,0 Целостность клеточных мембран опрело времени стабилизации скольтразвука в почке, помещенной ор крионротектора, так квк при енин клеточных мембран ускоряетя проникновение криопротектора в клет и. Чем выражениее повреждение тем скорее происксаит выравнивание вне и внут риклеточных концентраций, а, следовательно, и быстрее наступает стабилиэация скорости ультразвука в органе (табл. 5). Введение,ОФПСО му с послецующе боткой 10%-ным ром ОФПСО (пред способ) ивотно обрацеляют рости у в раств поврежц,Оля почек в ка показателей посл тивность ДНК-аз ческую структуру : ных Мембран. с честве сопоставляемыхоттаивания берут ак(табл. 4), гистологюи целостность клеточИз результатов видно цостоверноеуменьшение токсичности действия крио-20протектора. на клетки органов.Предлагаемый способ позволяет умевьшить степень повреждений органов итканей при замораживании и ослабитьтоксическое. цействие криопротектора.Проверка эффективности предлагаемогоспособа осуществлялась путем его сравнения с известным способом при замора. живания органов (на почках) и прн замораживании тканей (на крови ), Для крови 30.в качестве сопоставляемого показателяберут процент гемолиза после оттаиванияпробы (табл. 3).Э. щиты)Обработка10%-нымрастворомМСО(изестныйспособ)Введение 0,258+0,259 0,169+0,0Таким образом, при применении преапа гаемого способа отмечается существенное уменьшение степени повреждений при замораживании органов и тканей по сравнению с известным способом, Степень повреждений зависит от времени введения цонору диметипсульфоксица и от его дозы. Минимальйое поврежцение соответствует введению донору за 1 24 ч до удаления органа циметилсульфоксица в дозе 0,5 г/кг.Заблаговременное вввецение криопротектора в организм стимулирует метаболическую и. структурную перестройку в органах и тканях, делая их более устойчивыми к действию поврежцающих факторов замораживания,Использование предлагаемого способа будет способствовать повышению жизне способности трансплантата, повышению результативности операций при пересадке криоконсервированных тканей. Контроль (бе ты) Обработка, 10%-нымраствором ДМСО (известный способ)Введение .ПМСО живоъ.ному с последующей обработкой 10 Ф-ным раствором ОМСО (предлагаемый способ) 21+3 О+3 По данным гистологического вания предлагаемый способ при меньшей декструкции клеточных тов ткани, к менее выраженной эации лизосомального аппарата исследооцит к элеменла билилетки; Составитель В. Брусиловскаяактор П. Макаревич Техрец В.,НалекорейКорректор В. ГиП аз 9404/3 ВНИИПИ Госуаарс по цепам иэоб 113035, Москва, ЖТираж 721 венного комитета СССРретений н открытий 5, Раушская наб., ц. 4 оцпи илиал ППП фПатент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 5,. 086978 б Т а б и и ц а 5., при этом уменьшается степень вне и внуъриклеточного отека,