Способ микробиологического окисления биорезистентных соединений

пп 998391 ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублнк(22) Заявлено 14.04,81 (21) 3294510/23-26с присоединением заявки Мо(23) ПриоритетОпубликовано 230283, Бюллетень Мо 7Дата опубликования описания 2502,83 фЩ М. Кд,з С 02 Р 3/34 Государственный комитет СССР по делам изобрсеиий и открытий.В,П, Тульчинская, Г.А. Кожанова, ТкА; ЗЕляева,Л.А. Калмазан, Г,К. Петрик, И.Н. фубай, ":: рТ.В. Васильева и Л.М. Литвиненкв4ауОдесский ордена Трудового Красново Знамениф." , У;.1;-;государственный университет им. Йъй"4 Ыч 4 аФхова "и Институт физико-органической химии и "утюйцйиАН Украинской ССР( 54) СПОСОБ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ОКИСЛЕНИЧ БИОРЕЗИСТЕНТНЫХ СОЕДИНЕНИИ Изобретение относится к ьалкробиологии и способам очистки сточных вод от биорезистентных красящих веществ.5Известны способы интенсивного окисления селективными культурами бактерий трудноокисляемых соединений, в том числе органических красителей, с использованием дополнительных биогенных субстратов. При введении в среду глюкозы, фенола или гексадекана происходит глубокое окисление азо. красителей; дисперсных., пржиых, кислотных. Указанные вещества .не подвергаются микробной деструкции, если они являются единственными субстратами для окисления 1.Наиболее. близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ интенсивного окисления бактериями. рода РвенЬощопав биорезистентних красяцих веществ, загрязняющих производственные сточные воды, с использованием дрожжевого экстракта в качестве до полнительного биогенного субстрата. При использовании дрожжевого экстракта в количестве 0,2-0,5 происходит 100-ное микробиологическое.разрушение различных аэокрасителей за 24- 30 48 ч. Без дрожжевого экстракта микро"биологического окисления красителейне происходит Г 2. Недостатком известного способа является использование такого дорогостоящего препарата как дрожжевой экстрракт в концентрациях, превышающихсодержание красителей-субстратов дляокисления,Цель изобретения - удешевление способа микробиологического окислениябиорезистентных соединений,Указанная цель достигается тем,что способ микробиологического окис"ления биорезистентных соединений бактериями деструкторами рода РвенЬощопав осуществляют, используя в качестве дополнительных биогенных соедине"ний водный раствор солей гуминовыхкислот бурого угля, предпочтительнодо концентрации 0;000004-0,000006.Деструкцию органических соединенийосуществляют бактериями-деструктора-.ми, например рода РвеоЬоеопав, способными утилизировать широкий спектрбиореэистентных соединений в соокисла.тельных условиях.Способ осуществляют следуюцим обраэом.998391 следовательные разведения. При этом используют исходный 6,2-ный водный раствор солей гуминовых кислот,1-й раствор: 2,5 мл исходного 6,2-ного раствора разбавляют дистиллированной водой до 100 мл ( разведе" ние в 40 раэ) . Получают 0,155-ный раствор.2-й раствор: 5 мл 1-ного раствора разводят водой до 1000 мл (разведение в 200 раэ), Получают концентрацию 0,0008.Для получения необходимой концентрации (0,000004) в реакционную среду (995 мл) вносят 5 мл 2-го раствора.Осуществляют стационарное культивирование при 30"С, Окисление красителя оценивают по деструкции красящего вещества через 24 ч.П р и м е р 2, Осуществляют мик,робиологическоеокисление галогенсодержащего красителя активного алого 10-52 (С Н 09 М 5 Вг Ма ) з концентрации 25 мг/л прй добавлении водного раствора солей гуминовых .ислот (препара т УРВК ) в количестве О, 000006 Для этого 7,5 мл 2-го раствора добавляют к 992,5 мл реакционной среды. Условия микробиологического окисления бактериями Рецдовопаь те же, что. в примере 1.П. р и м е р 3. Осуществляют микробиологическое окисление красителя активного алого 10-52 в количестве 25 мг/л при добавлении водного раствора оолей гуминовых кислот (препарат УРВК) в количестве 0,000005. Для этого 2,5 мл 2-го раствора добавляют к 997, мл реакционной среды. Условия осуществления микробиологического окисления бактериями Рьецдощопаь аегц 1 пова КМ те же, что в прюсере Результаты эксперимента представлены в таблице. Биогенный субстрат Загрязняющее веществои его концентрация вреакционной среде,мг/л ислотный черный С 25 100 Кислотный черный С 25 100 Дрожжевой экстракт,710 ктивный алый 10-52 25 100 1,7 1 ктивный алый 10-52 25 100 7 10 В минеральную среду вводят биорезистентное соединение, например краситель-субстрат для окисления, В качестве биогенного субстрата вносят водный раствор солей гуминовых кислот в количестве 0,000004-0,000006. Деструкцию загрязняющих веществ осуществляют отмытыми клетками бактерий- деструкторов после предварительного культивирования на мясо-пептонном агаре. Культуру бактерий вносят в реакци 40 онную среду в количестве 500 илн, клеток/мл, Микробиологическое окисление биорезистентных соединений осуществляют при 30 С в условиях стационарного культивирования в течение 35 24 ч.П р и м е р 1. Микробиологическое окисление азокрасителя кислотного чер ного С (СВНОВ, Ма М.) в минеральной среде в условиях соокисления гуматов ;щ осуществляют следующим образом.Бактерии Рьецдощопаь аегцдпова КМ - деструкторы красящих веществ, предварительно культивированные на мясо-пептоннсм агаре и отмытые дважды 25 физиологическим раствором путем центрифугирования при 2000 об/мин в течение 15 мин, вносят в минеральную среду следующего состава; калий фосфорно- кислый однозамещенный 3,0 г, натрий фосфорнокислый двузамещенный 6,0 г, натрий хлористый 5,0 г, аммоний хлористый 1,0 г, вода дистиллированная, 1000 мл (рН среды 7,0-7,2 устанавли-. вают добавлением 10-ного раствора кальция гидрата).Культуру вносят в количестве 500 мпн, клеток/мл. Краситель вводят в среду в количестве 25 мг/л, что соответствует содержанию красителей в стоках текстильных производств, а 40 водный раствор солей гуминовых кислот бурого угля - в количестве 0,000004Для получения рабочего раствора солей гуминовых кислот готовят по 1 Эффект де- Стоимостьструкции по;биогенного красящему субсрата ввеществу, пересчетена 1 г окисленного загрязняющего вещества,руб998391 5 Формула изобретения Составитель Г. ЛебедеваРедактор Н. Егорова ТехредМ,Тепер Корректор О ВилакЗаказ 1058/39 Тираж 939 ПодписйоеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035 Москва, 3-35 Раушская наб. д. 45 Филиал ППП "Патент", г. ужгород, ул. Проектная, 4 Преимуществом способа является использование гуминовых веществ в микро. дозах, которые в 400-600 раз ниже концентрации загрязняющих веществ, подлежащих микробиологическому окислению, 5К преимуществам предлагаемого способа следует отнести также доступеность и простоту получения гуминовых веществ, их низкую стоимость, а также возможность их длительного хранения в исходных 6,2-7,0-ных водных растворах. 1Способ микробиологического окисления биорезистентных соединений бактериями - деструкторами рода Рьецдовопаь в присутствии биогенного 3) субстрата, о т л и ч а ю щ н й с я тем, что, с целью удешевления спосо.ба, в качестве биогенного субстратаиспользуют водный раствор гуминовыхкислот бурого угля.2. Способ по п, 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что водный растворгуминовых кислот бурого угля вводятдо концентрации 0,000004-0,000006.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Панченко М.М.др, Змна бологчних властивостей бактерй,адап-,тованих до токсикантв локальнихстокв текстильних идприемств,Мкробологчний журнал, т, 39,вип. 4, 1977, с. 511-512.2, Тульчинская В,П. и др, Очисткасточных вод высокой цветности специ"ализированньми культурами бактерий.Микробиологические методы борьбы сзагрязнением окружающей среды. Тезисы докладов, Пущино, 1979, с. 74-75.