Способ изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта

ОП ИСАЙ ИЕИЗОБРЕТЕНИЯК . АВТОРСКОМУ СВИЯЕТЕЛЬСТВУ Соеэ СоввтсиикСоциалистическихРеспубликВ и 943816(22) Заявлено 21,1 1.77 (21) 2545332/28-13 с присоелиненнем заявки М 6 09 В 23/28 ВкударетеееыЯ квинтет СССР вв даден вэебретееЯ и еткрмтвй(088.8 ) Ойублнковано 150782, Бюллетень,% 26 Дата опубликования описания 150782(,54) СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ РЕКОНСТРУКЦИОННОЙ МОДЕЛИ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО ОБЪЕКТА риентиры опическо обходимо ов объек а Изобретение относится к биологии может быть использовано, напримев,эмбриологических. исследованиях,да возникает необходимость изучитьмикроскопические структуры отдельных органов в объеме и при большомувеличении,. Известен способ изготовления реконструкционной модели микроскопичекого объекта, включающий его фиксацию, изготовление направляацих ориетиров в виде двух окрашенных параллельных полос, изготовление сериигистологических срезов в плоскостиперпендикулярной направлению ориентиров, перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров наплоские элементы,изготовление моделей срезов и составление из них морели объекта О 3.Согласно этому способу, оизготавливаются вне микроскобъекта, модель которого неполучить ; иэображение срез переносится сначала на листы бумаги, а с них - на плоские элементы,из которых готовят модели срезов.Процесс изготовления реконструкционной модели по этому способу длителен,а используемый в нем прием изготовления ориентиров не обеспечивает высокую точность способа.Цель изобретения - ускорить способ и повысить его точность.Цель достигается тем, что согласно способу изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта, включающему его фиксацию, изготовление направляющих ориентиров в виде двух окрашенных параллельных полос, изготовление серии гистологических срезов в плоскости, перпендикулярной направлению ориентиров, перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров на плоские элементы, изготовление моделей срезов и составление из них модели объек та, при изготовлении ориентиров3 94381 объект, прониэывают нитями, которые затеи закрепляют в натянутом состоянии, изображение срезов объекта и срезов ориентиров переносят на плоские элементы, из которых изготавливают модели срезов объекта, по контурам срезов ориентиров в моделях сре" эов объекта прорезают отверстия и при составлении модели ооьекта последовательно нанизывают модели срезов 1 в через эти отверстия на вертикальные, жестко закрепленные стержни.П р и м е р , Изготовляют пластическую (объемную) реконструкционную модель формирующейся лоханки, больших 1 з И малых чашечек почки зародыша крысы, Размеры почки у такого объекта рав-, ны 2220 мкм (длина ), 1610 мкм (ширина ), 1190 мкм (толщина ). Изготовление серии срезов проводится во фронтальной плоскости ( в этой плоскости исследуемые структуры представлены наиболее демонстративно), При избранной толщине каждого среза в 15 мкм - общее число срезов равно 25 Около 100.Ориентиры(тончайшие капроновые нити ) пронизывают сквозь ту область эмбриона, в пределах которой находится исследуемая структура, стремясь при этом расположить их как . можно ближе к ней, чтобы при проекции гистологицеского среда даже под большим увеличением рядом. с исследуемой структурой можно было наблюЗ 5 дать срезы направляющих ориентиров.Нити вводят в эмбрион. перед его Фиксацией и закрепляют в натянутом состоянии.Серию гистологицеских срезов изготавливают классическим методом.После изъятия органа (почки) из эабрюшинного пространства новорожденного крысенка, дальнейшую его обработку проводят по следующей схеме: фиксация препарата (почки ) в 7 Фном45 растворе формалина до 10 дней,. промывка проточной водой 21 ч; обезвоживание препарата в спиртах возрастающей концентрации; заливка препарата параФином; изготовление серии срезов на санном микротоме; расположение срезов на предметных стеклах в определенной последовательности; депарафиниэация срезов путем помещения в ксилол; окраска срезов гематоксилинэоэином по общепринятой схеме; изучение срезов под микроскопом; изготовление реконструкционной модели,Затрата, времени на подготовку исследуемого препарата и изготовлениеиз него серии срезов для созданияреконструкционной модели по известному и предлагаемому способу одинаковая.Но предлагаемый способ, позволяет значительно быстрее изготовитьмодель микроскопического объектана стадиях изготовления моделейсрезов и самой реконструкционной модели объекта. Так, на изготовлениемодели почки зародыша крысы по известному способу после изготовлениясерии срезов требуется 1 ч ч, а попредлагаемому - около 5 ч,Способ согласно изобретению предусматривает использование трех .видов:ориентиров: введенных в исследуемыйобъект цветных нитей; отверстий,выполненных на моделях срезов поконтУРам изображения срезов этих нитей; стержней, на которые нанизываютмодели срезов через эти отверстия.Наличие трех типов ориентиров повышает точность изготовления модели,Таким образом, предлагаемый способпозволяет .быстрее и точнее, чем известный способ, изготавливать реконструкционную модель микроскопицескогообъекта.Формула изобретенияСпособ изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта, включающий его Фиксацию, изготовление направляющих ориентиров в виде, двух окрашенных параллельных полос, изготовление серии гистологических срезов в йлоскости перпендикулярной направле. нию ориентиров, перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров на плоские элементы, изготовление моделей срезов и составле. ние из них модели объекта, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения изготовления и повышения точности, модели при изготовлении ориентиров объект пронизывают нитями, которые затем закрепляют в натянутом состоянии, изображение срезов объекта и срезов ориентиров переносят на плоские элементы, из которых изготавливают модели срезов объекта, по контурам срезов ориентиров вмоделях срезов объекта прорезают отверстия и при составлении модели объекта последовательно нанизывают модели5 943816 срезов через эти отверстия на верти.кальные, жестко закрепленные стержни.Источники информации, принятые во внимание при акспертизе 61, Туркевич Н.Г. Реконструкциямикроскопических объектов по гистологическим срезам. И., "Кедицина",1967, с.137 е 143 (прототип ).Составитель Л.СероваРедактор М.Недолуженко Техред Е. Харитончик . Корректор, МШарошие е 4 е е е е ее е ееЗаказ 5119/61 Тираж 472 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035,Москва,Ж,Раушская наб., д.4/5ее еееее ее Е еее е е еФилиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул,Проекная,4