Способ выделения биомассы микроорганизмов

СОЮЗ СОВЕТСНИСОЦИАЛИСТИЧЕРЕСПУБЛИН 19) 110 2 т 1/02 ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ЕТЕЛЬСТВ К ТОРСКОМ 11376/28-656, 19 е отлто щелобрапензироокиие 1 иочнойоткимикрои нат 2. Спосоающийстракт поущенной дганизмовя при 80 пс о п, 1, я тем, чаютпуте 10-25% су битком ги С в тече ч э ВЫДЕЛЕНИЯ БИОМАССЫз культуральной(56) 1кл. 42 Бюл. Ф 29Г,И. Мещанкин,М. Перштейн,П.А,Смыин А,А. Скотниконаучно-исследоваут биосинтеза белСР) и Нефтехимичеедт (ГДР)8)США М 410580478. жидкости, предусматривающий добав ниЕ белкового щелочного экстракта о т л и ч а ю щ и й с я тем, что с целью увеличения степени выделе ния, используют щелочнойэкстрак микроорганизмов в концейтрации 0,005-0,5, а выделение ведут при температуре 40-900 С и рн смеси 5- или 2-4 для дрожжей или бактерий соответственно.30 Изобретение относится к микробиологической промышленностн, а именно к способам выделения биомассы микроорганизмов из культуральной жидкости, полученной при культивировании микроорганизмов. 5Известен способ выделения биомас-. сы микроорганизмов из культуральной жидкости, предусматривающий добавление белкового щелочного экстракта в качестве коагулята 1, Коагулян том служит щелочной экстракт сои.Недостатком способа является невысокая степень выделения биомассы.Цель изобретения - увеличение 15 степени выделения.Указанная цель достигается.тем, что при способе выделения биомассы микроорганизмов нз культуральной жидкости, предусматривающем добавление белкового щелочного экстракта, используют щелочной экстракт микроорганизмов в концентрации 0,005-0,5 выделение ведут при температуре 40-900 С и рН смеси 5-8 или 2-4 для дрожжей или бактерий соответственно, 25 при этом щелочной экстракт получают путеМ обработки сгущенной до 10-25 суспецзии микроорганизмов избытком гидроокиси натрия при 80-90 ОС в те" чение 1-2 ч.Способ осуществляют следующим образом. Концентрируют суспензию микроорганизмов, полученную при выра-; щивании клеток микроорганизмов в водной питательной среде, в присутст-Э 5 вии свободного кислорода, содержащую источники углерода, подходящие для ассимилирования клетками микроорганизмов, а также азота, фосфора и других необходимых для роста клеток микроорганизмов питательных веществ. 40 В качестве истояника углерода могут быть использованы различные виды углерод- и углеводородсодержащего сырья, например, Н -парафизы нефти, нефтяные дистилляты, спирты, природ ный газ, а также продукты гидролизного производства, например маласса.В разделяемую суспензию добавляют щелочной экстракт микроорганизмов в количестве 0,005-0,5 в зависи- р мости от вида микроорганизмов и их начальнойконцентрации в суспензии. В дрожжевую суспензию добавляют аммиачную воду или щелочь до рН 5-8, рН бактериальной суспензии доводят до значений 2-4 добавлением фосфорной кислоты.Полученную смесь нагревают до 40-90 С, причем для сохранения питательных свойств готового продукта время нагревания не должно превы шать 5-8 мин, и подают на сепарацию.Для получения щелочного экстракта суспензию микроорганизмов, например тех, которые содержатся в концентрируемой суспензии, либо другой 65 культуры с содержанием биомассы10-,5 АСВ нагревают до температуры80-90 С, добавляют щелочь, обычногидрат окиси натрия, до достижениярН 10-12 и выдерживают полученнуюсмесь при данной температуре в течение 1-2 ч,Выделение биомассы путем добавления щелочного экстракта микроорганизмов можно проводить как из куль-.туральной жидкости, полученной послевыращивания микроорганизмов с содержанием биомассы 0,5-3,0 АСВ, таки после предварительного сгущенияее до 3,0-8,0 АСВ. Наиболее целесообразно концентрировать суспензиюс начальным содержанием биомассы3,0-5,0 АСВ. В этом случае степеньконцентрирования достигает 5-7 раз.При .большей начальной концентрациибиомассы в культуральной жидкостистепень концентрирования снижается,а при меньшей не удается достигнутьтакой концентрации биомассы в сгущенной суспензии, при которой этусуспензию можно подавать на сушку,то есть до 20-25 АСВ.П р и м е р 1. К 500 мл суспензии микроорганизмов, полученнойв результате выращивания дрожжейСасййа йи 111 егшопйд 1 на питательной среде с нормальными парафинаминефти и содержащей биомассу в количестве 3 АСВ, добавляют аммиачнуюводу до установления рН культуральной жидкости 7,2, а также смесьпродуктов щелочной экстракции вколичестве 0,01 вес., полученнуюпутем обработки сгущенной до.15АСВ суспензии тех же дрожжей избытком гидроокиси натрия при температуре 85 ОС в течение 1,5 ч. Затем смесьнагревают до б 5 С и сепарируют.вотстойной центрифуге с Факторомразделения 10000. Содержание биомассы в сгущенной суспензии составляет 20,5 АСВ, т.е. степень концентрирования б,8.П р и м е р 2. К 500 мл суспензии микроорганизмов, полученной врезультате выращивания дрожжей сапй ис 1 з на питательной среде сэтиловым спиртом в качестве источника углерода и содержащей биомассув количеств 3,5 АСВ, добавляютаммиачную воду до установления рНкультуральной жидкости 7,1, а такжесмесь продуктов щелочной экстракциив количестве 0,2 вес полученнуютаким же образом, как в примере 1.Затем смесь нагревают до б 5 С иосепарируют в отстойной центрифугес фактором разделения 1000. Содержание биомассы в сгущенной суспен-,зии составляет 22 АСВ, т.е. степеньконцентрирования 6,3.П р и м е р 3. К 500 мп суспензиимикроорганизмов, полученной в резульо 35170 Составитель Т. МелентьеваРедактор П. Горькова Техред А.Вабинец Корректор А,тяско Заказ 8128/4 Тираж 523 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 тате выращивания дрожжей Саидйе 1 ро 1 у 1.си, на питательной среде с нефтяными дистиллятами в качестве источника углерода и содержащей биомассу в количестве 4 АСВ, добавляют аммиачную воду до установления рН 5 культуральной жидкости 7,4 и смесь продуктов щелочной экстракции вколичестве 0,5 вес. полученную путем обработки сгущенной до 12 АСВ суспенэии тех же дрожжой избытком гидро окиси при 800 С в течение 1,5 ч. Затем смесь нагревают до 65 ОС и сепарируют в отстойной центрифуге с фактором разделения 1000. Содержание биомассы в сгущенной суспензии составляет 24 АСВ, т.е. степень концентрирования 6,0.П р и м е р 4. К 500 мл суспензии микроорганизмов, полученной при выращивании бактерий Мусосос.сцв Бр.Дна питательной среде с нормаль- ф ными парафинами нефти и содержащую биомассу в количестве 2;8, добавляют фосфорную кислоту до установ" ления рН среды 3,0, а также смесь продуктов щелочной зкстракции в количестве 0,05 вес., полученную путем обработки сгущенной до 12 АСВ суспензии тех же бактерий из- бытков гидроокиси натрия при 85 фС в течение 1.,5 ч. 30 Затем смесь нагревают до 80 С в течение 5 мин и сепарируют в отстойной центрифуге с фактором разделения 1000. Содержание биомассы в сгущенной суспензии составляет 19,8 АСВ, т.е. степень концентрирования 7,1. Пример 5. К 500 мл суспензии микроорганизмов, полученной при выращивания смешанной бактериальной крьтуры 1-70 на природном газе и содержащей биомассу в количестве 2,5, добавляют фосфорную кислоту до установления рН культуральной среды 2,5, а также смесь продуктов щелочной зкстракции в количестве 0,25, полученную таким же образом, как и в примере 1Затем смесь нагревают до 80 ОС в течение 5 мин и сепарируют на отстойной ценрифуге с фактором разделения 8 = 1000. Содержание биомассы в сгущенной биомассе 18 АСВ, т.е. степень концентрирования 7,2. Таким образом, описанный способ выделения биомассы с использованием щелочного экстракта микроорганизмов в качестве коагулянта позволяет достичь высокой степени концентрирования микроорганизмов.