Способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных

Изобретение относится к областиветеринарной вирусологии, в частности к способам изготовления инактиви-,рованных вакцин против бешенстваживотных, используемых в целях лечебно-профилактической вакцинациипротив 5данного заболевания.Известен способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных с использованием инактиватора гидроксиламина ( 1. 10Данный способ уже не используется в практике изготовления даннойвакцины, ввиду того, что готовая вакцина содержит токсичный для животныхинактыватор или его химическое соединение,Известен также способ изготовления инактивированной вакцины противбешенства животных, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм "овечьий" ГНКИ, инактивирование вирусной суспенэии, еесоединение со средой высушивания споследующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией (2 1.Недостатком данного способа является то, что получаемая вакцина является менее иммуногенной, имеетостаточный вирус до 10 ЛД /0,03 мл2,5и вызывает поствакцинальные осложнения у крупного рогатого скота идекоративных пород собак. Фенол какинактиватор является токсичным веществом. Допускается выпуск нестерильного препарата. 35Целью изобретения является повышение иммуногенности вакцины и ее безвредности.Это достигается тем, что инакти вирование вирусной суспензии проводят 20-21-ным раствором этанола при 30-31. С в течение 12-14 сутП р и м е р. Для изготовления серии инактивированной сухой антнрабической этанол-вакцины заражают овец в мозг вирусом фикс бешенства в дозе ф,5 мл рабочим разведением 1:500 согласно инструкции.Предварительно готовит 20-ный раствор этанола из расчета: 1 ч.95 спирта на 4 ч. стерильного физиологического раствора. В одиолитровую стеклянную банку вносят 300- 350 мп 20-иого раствора этанола и взвешивают ее. 55Овец, у которых проявились типичные клинические признаки лабораторного бешенства в период с 4 по 5 день с момента заражения, обескровливают, после чего отделяют голову 60 и извлекают мозг, который помещают в подготовленную банку с.20-ным раствором этанола на физиологичес-,; ком растворе, рН 7,2-7,4, Предваря" тельно делают высевы на бактерио логические питательные среды (пробирки) и наблюдают за ними при выдерживании в термостате (37 ОС ) вистечение 10 сут.Мозговую ткань извлекают иэ банок и помещают в коллоидную мельницу и измельчают при 3000, об/минв течени 5 мин при зазоре 0,05 см,20-ный раствор этанола добавляютиэ расчета на 30 г мозговой ткани70 мл 20-ного раствора зтанола,т.е. получают суспенэию 30 тканимозга. Бутыль.с полуфабрикатом ставят в термостат при ЗООС на 12 сут,перемешивая суспенэию 3-4 раза всут,По истечении срока инактивациик суспензии добавляют среду высушивания из расчета на 2 ч,суспенэии 1 ч,среды высушивания (состав:100 мл бидистнллированной воды,22,5 г сахарозы и 3 г желатины).Конечная концентрация мозговой ткани в жидком полуфабрикате вакцинысоставляет 20. Вакцину расфасовывают в пенициллиновые флаконы по12 мл и подвергают сублимационномувусушиванию обычным способом. Готовую вакцину контролируют на стериль-ность, безвредность, отсутствиеостаточного вируса, иммуногенность,растворимость обычными способами.Вакцина, полученная предлагаемымспособом состоит из следующих компонентов,фФ: вмруссодержащая тканьмотыга овец с титром вируса не ниже10ЛД/0,03 мл в 15-17-ном растворе атанола 20-25, стабилизатор75-80.Полученные данные по проверкеполученных производственных серийвакцины против бешенства предлагаемым способом дают возможность судитьо том, что эти изготовленные серии,инактивированные этанолом были стерильны, авирулентными, безвреднымидля разных видов лабораторных исельскохозяйственных животных, атакже обладали выраженными иммуногенньвюи свойствами, сообщающие,привитым животным напряженный иммунитет к 14-ому дню, который сохраняется до 98-ого дня (срок наблюдения).Вакцина пригодна для массовойиммунизации животных всех видов какс профилактической, так ь с лечебнойцелями,Вакцину применяют методом подкожного и внутримышечного введения и скормом для диких животных. Дозы длявнутримьааечного введения, мл: собакам 2-3, круйному рогатому скоту 5-6,лошадям 9-10, кошкам 1-1,5, овцам3-3,5 свиньям 9-10, пушным животным15"2 ослам 4,5"5.,Экономический эффект при вакци,нации животных складывается из предЗаказ 6595/3 Тираж 521 Подписное ВНИИПИ Государственного комитега СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, -35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная. 4 .Ф отврашения распространения болезни,оздоровления неблагополучных пунктов,создания иммунного поголовья среди животных и снижения случаев возможного контакта человека с животными ф. носите" лями возбудителями уличного бешенства,