Способ получения пуринсодержащих соединений

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПУРИНСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ ный спос о высоку2Изобретение относится к медицинс- . . П р и м е р 1. К 50 л культуралькой промышленности, а именно проиэвод- ной жидкости, содержащей следующие ству медицинских препаратов. компоненты, г/л: рибоксин 8, гипоксанИзвестен способ получения пуринсо- тин 0,2, гуанозин 2,2, с рН 6,0 доба- держащих соединений путем ферментации . вляют М по весу от обьема культуральштаммоа-продуцентов, отделения био- з ной жидкости алюминия сернокислого массы, извлечения сорбцией с последу- для установления значения рН, равноющей промывкой и десорбцией, упарива- го 4,0. Затем значение рН культуральнием, пропусканием раствора через , ной жидкости доводят до 5,2 с помощью ионообменный адсорбент, с последую- . 25-ного раствора натра едкого, кульщей очисткой 1.11 В туральную жидкость нагревают до 50 оСи отфильтровывают, на фильтр -прессе.Однако иэвест об обеспечи- Биомассу промывают 10 л смягченной вает недостаточн ю степень чис" воды, которую присоединяют к нативнототы - 903, му раствору. Нативный раствор пропуЦелью изобретения является повыше скают через батарею колонн с волокнисние чистоты целевого продукта. тым углеродным материалом, скоростьЭта цель достигается тем, что пе" пропускания 400 мл/ч см. Фильтрат ред сорбцией культуральную жидкость нативного раствора, не содержащий пуобрабатывают сульфатом алюминия, до" ;ринов, сливают в .трап. Колонны промыводят ее до рН 5,2-5,5, отделяют над. варт 5 л смягченной воды для вытесне,юосадочную жидкость, раствор пропуска" ния нативного раствора. Десорбцию пуют через ионообменник, содержащий ринов проводят спиртовоаммиачной смесульфогруппы, и кристаллизуют. сью (253-ный водный раствор аммиака,,96.:-ный, взятые вобъемном соотноше- рибоксина, полученного по способу,нии 2:3:5 со ско остью2:3:р ю 75 мл/ч смописанному в примере 1, содержащегопри 40 ОС), Элюат со средней концент рибоксина, 5 Ф гипоксантина и 7рацией пуринов 15 г/л упарйвают под 5"гуайозина. сырец растворяют в 5 мл"вакуумом при температуре греющей во- - "смягченной воды при 100 С, получаютды не выше 801 до"концентраций Т 20 г/л, концентрацию пуринов 96 г/л. РастворПолученный концентрат постепенно ох- профильтровывают через угольную полаждают до температуры 5 ОС и выдержи- душку, разбавляют 60 л воды до конвают при этой температуре 4-6 ч, что 1 о центрации 7,4 г/л и пропускают черезприводит к к исталлизр таллизации пуринов.колонну с сульфокатионитом КУвд ф льтровывают, про- водороднои форме (0,5 кг сульфокатиоВыпавший оса ок отфилмывают от маточника ацетоном. Получен- нита). Профильтрованный через смолуный сырец содержит рибоксин и гуано- раствор,- подвергшийся двйигментациизин, Вес сырца в пересчете на сухой 15 и содержащий только рибоксин, собирасоставляет 400 г. Осг. Осадок сырца-раст- ют и после неитрализации концентрироворяют при нагревании в смягченной ванным раствором аммиака упариваютводе с концентрацией 80 г/л, отфйльт- до Концентрации 120 г/л, Проводятровывают через гольн ю поР у ую подушку, раз- ".крйсталлизацию, как описано выше, ибавляют водой до концентрации 1 О г/л 2 о получают 362 г чистого рибоксинаи полученный расТвор пропускают через 99-ной "степени чистоты, что составколонну диаметром 40 мм и "высотой ляет 903 от содержания .его в сырце.800 мм с волокнистым "адсорбейтом не"=сущим сульфогруппы, ПредварительноП р и м е р 3. Берут 10 л культ- ультуадсорбент переводят в Н-форму и отмы Ральной жидкости, содержащей 6 г/лвают водой до значения РН 5,0. Раст-гипоксайтина и 8 г/л рибоксина (иновор после колонны контролируют хрома- зина), добавляют 24 сульфата алюминиятографически на содержание гуанозина идоводят РН 253-ным раствором едкогои рибоксина. По насыщении сорбента . " натра до значения 5,5. КультуральнуюколоннУотмывают" водой, проводят де жидкость нагревают до 50 С и биомассусорбцию сорбированного на адсорбенте отфильтровйвают на Фильтр-прессе. Врибоксина. Растворы рибоксийа" не со-полученйый нативный раствор вносятдержащие гуанозин, после нейтрализа г активированного угля, и при пе-". ции концентрированным раствором амми" ремешиваййи в течение 30 мин проводятака упаривают до концентрации 120 г/л. адсорбцию.35Полученный концентрат нагревают до95 С, пропускают через угольную подуш- Уголь отфильтровйваЬт, промываютку и пРоводят кристаллизацию, как опи л смягченной водой для вытеснениясано выше, Выпавший рибоксин отфильт нативного Раствора, после чего приВРовывают, промывают этиловым спиртом перемешивании пРоводят десорбцию спир 40 ои высушивают. Получают 240 г рибокси-тово-аммиачнои смесью при 40 С. Элюй:.-;":;.;на, что составляет 60 содержания его ат Упаривают в три раза до полученияв культуральйой жидкости. Степень чи . концентрацйи 80 г/л и проводят крис"стоты "препарата 98 ф.таллизацию, аналогично описанной впредыдущих примерах. Осадок, содержаВолокнистый адсорбент отмывают, 45 щий гипоксантин и рибоксин, отделяют,спиртово-аммиачной элюирующей смесью прбмывают ацетоном и растворяют прии водой ииспбльзуют в "йоследующих . нагревании до температуры 40 С в смягоперациях выделения рибоксина Адсор-ценной воде с концентрацией 6 г/лбент, несущий сульфогруппы, после тща- Раствор пропускают через колонку сотельной отмывки рибоксина водой обра О смолой КУ-8 в водородной формебатывают раствором 0,1 н соляной кис- (120 г), колонку промывают водой длялоты, проводят таким образом десорб- десорбции рибоксина (инозина), послецию"гуанозина. Полученный элеат неит- чего гипоксантин десорбируют 0,1 н.рализуют концентрйрованным"раствором раствором соляной кислоты, Элюат нейаммиака -до значения рн 7,0, Выпавшии 55 трализуют концентрированным растворомгуанбзин отфильтровывают и перекрис- аммиака и проводят кристаллизацию гиталлизовывают из воды. Получают 40 гпоксантина. Осадок отделяют, промыва"гуанозина 96-ной степени чистоты. ют этиловым"спиртом и высушивают, ПоТираж 714 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Ю ифилиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, ц Заказ 10473/3 56756лучавт 40 г гипоксантина 964-ной сте".пени чистоты,Растворы, содержащие только рибоксин (инозин), упаривают, пропускаютгорячий раствор через угольную подуш- Вку и проводят кристаллизацию рибоксина. Осадок рибоксина отделяют, промывают зтиловым спиртом и высушивают.Получают 30 г рибоксина (инозина)97-ной степени чистоты.1 ОАктивированный уголь после десорбции промывают водой до нейтральногозначения,рН и используют в последующих операциях,П р и м е р 4. В 100 л культуральной жидкости, содержащей 10 г/л рибоксина (инозина) и 2,7 г/л гуанозина, добавляют 63 сульфата алюминия. После доведения рН 253-ным раствором ед В кого натра до значения 5,3 культуральную жидкость нагревают до 50 фС и биомассу отфильтровывают. Биомассу промывают 10 л смягченной воды для выл теснения нативного раствора, и промыв: ную воду присоединяют к нативному раствору. Далее проводят выделение способом, опйсанным в примере 1, В ре. зультате получают 420 г рибоксина и СоставительРедактор П. Горькова Техред О. Неце. б70 г гуаноэина. Степень чистоты рибоксина 98, гуаноэина 95.Предлагаемый способ обеспечивает выход и качество готового продукта, Чистота целевого продукта повышается на 8-151 Способ получения пуринсодержащихсоединений путем ферментации штаммовпродуцентов, отделения биомассы, из"влечения сорбцией с последующей Fро"мывкой и десорбцией упариванием, пропусканием раствора через ионообменныйадсорбент с последующей очисткой, о тл. и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения чистоты целевого продукта,перед сорбцией культуральную жидкостьобрабатывают сульфатом алюминия, до"водят ее.до рН 5,2-5,5, отделяют надосадочную жидкость, раствор пропускают через ионообменник, содержащийсульфогруппы и кристаллиэуют.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССР11 382676, кл. А 61 К 31/ЗЗ 1973