Штамм возбудителя фитофтороза картофеля

О П И С А Н И Е 0154665 ОИЗОБРЕТЕНИЯ Сонэз Советских Социалистических РеспубликАВТОРСКОМУ СВМДЕ ТЕЛ ЬСТВ(51) М. Кл 2 С 12 К 1/О сударственный комитевета Министров ССС 53) УДК 631.937:615,7(71) Заявите 4) ШТАММ ВОЗБУДИТЕЛЯ ФИТОФТОРОЗА КАРТОФЕЛЯ РН тТОРНТНОКА 1 ХГЕ 8 ТАМЯ (МО 1 чТ) РЕ В 1при 0,5 ат ил тече тапазоном вименно 8 генов Ке КЗ К 4 Кб Изобретение относится к области защиты растений от болезней, в частности к селекции фитофтороустойчивых сортов картофеля.Известно использование для оценки устойчивости сортов и гибридов картофеля штамма (расы) 1.2.3.4, способного преодолевать соответственно четыре гена устойчивости картофеля Кь Кь Кз, К 4, как в отдельности, так и в различном сочетании 1, 2.Однако этот штамм недостаточно вирулентен и агрессивен.Целью изобретения является получение более вирулентного и агрессивного штамма. Поставленная цель достигается тем, что в качестве штамма Р 1 ту 1 ор 1 тйога 1 п 1 езтапз (Моп 1) с 1 е Ву берутштамм (раса 1.2.3.4.6.6.+0.10 хук).Полученный штамм отобран на агаризованной питательной среде фриза с пептоном из культуры гриба Р 1 ту 1 орЬйога 1 п 1 езеапз, выделенной с пораженных фитофторозом листьев сеянца картофеля12180.1 в условиях Южного Сахалина.Морфолого-культуральные признаки.На среде Фриза состава,г/л: глюкоза - 20,0; КН,РО 4 - 1,0; Мф 04 7 Н,О - 0,5; ИаС 1 - 0,1; СаСе - 0,1; С 4 Н 406 КИа 4 НеО - 5,0; пептон - 2,62; РеС 1 э (1%-ный раствор) - 10 капель; анейрин (В,) - 5,0 мкг; агар - 8,0; дистиллированная вода - до 1 л; рН среды - 5,5 - 5,6; среду стер изуют м в ние40 мин.Пептон РеС 12, анейрин вносят непосредственно перед стерилизацией среды.5 На двадцатый день роста штамм развиваетколонии диаметром 9 см. Края колонии четкоочерчены; поверхность колонии ровная, воздушная грибница однородная, порошисто-белого цвета. Конидии крупные длиной 36,4 мкм, 10 шириной - 21,2 мкм, овально-удлиненной формы. Штамм обладает высокой энергией прорастания конидий в зооспоры и высокой жизнеспособностью зооспор. Оптимальная температура для обильного образования конидий и 15 прорастания зооспор 20 - 21 С, для выходазооспор из конидии 10 - 12 С.Физиологические признаки.Отношение к источникам углерода: усваивает сахарозу, декстрозу, глюкозу, мальтозу, 20 лактозу.Отношение к азоту: усваивает 1-аспарагин, 1. - аспарагин, аргинин соляно-кислый;/ - глютамин, лейцин, клюкоголь.Отнопение к витаминам: усваивает витами ны В, и В,.На растении - хозяине.Штамм обладает широким д 1рулентности; подавляет одновреустойчивости картофеля К546650 3Йю+ю, Кю, Кх, Ку, Яг, как в отдельности, так и в различном пх сочетании,Характеризуется также высокими показателями агрессивности: энергичным и обильным прорастанием конидий в зооспоры, повышенной жизнеспособностью зооспор и при заражении растений небольшим инкубационным периодом и большой степенью поражения листьев картофеля.При проверке вирулентных и агрессивных свойств полученного штамма в сравнении со штаммом 1.2.3.4, путем инокуляцип отделенных листьев растений днфференциаторов тест- набора Шика и набора культурных сортов картофеля с различными генами устойчивости и разной степенью полевой устойчивости, окаВирулеитность штаммовГены устойчивости растений диффереициаторов тест-наоораШика+"41 Штамм 1.2.3.4.6.6+0,10 хуг поражает все культурные сорта картофеля с генами устойчивости К,; К,; Кз; К Я 1 Ка Я 1 Яз, Я 1 К 4 Я 1 ЯаЯз КЯаЯ 41 Я,ЯзК 4 и обильно иа иих спороиосит (культурные сорта картофеля с более сложными генами устойчивости в литературе ие описаны),т. Т т.+ + - ,-+.1+ есть спороиошение; - нет спороношенияа" -1- слабое спороиошение; +-1- срелвее спо 1 зопэшение; -, - -,; - обильное спороношение КЯгКзЯЯ 4 К 2К 1 КзК 1 К 4Я 2 КЗКзЯ 4КЯаК 4К 1 КзК 4К 1 К 2 КЗК 4ЯзЯаюЯоЯ 1 К,Кг Предлагаемый штамм может быть использован в селекции картофеля на фитофтороустойчивость,В лабораторных условиях из культуры гриба 4 - 5-дневного возраста, выращенной па ломтиках клубней картофеля восприимчиього сорта, в дистиллированной воде готовят суспензию из расчета 25 - 30 конпдпй в поле зрения микроскопа прп увеличении 100. Суспензию конидий гриба помеща 1 от в холодильник при 10 - 12 С на 1 - 2 ч для выхода зооспор. Отделенные доли листа (дв - т 1 н залось, что новый штамм обладает высокими пок.:зателями вирулентности и агрессивности.По сравнению со штаммом 1.2.3.4, который подавляет четыре гена устойчивости картофе ля, новый штамм преодолевает устойчивостьвосьми генов картофеля. Кроме того, при заракении листьев картофеля предлагаемым штаммом инкубационный период на два - три дня короче, степень поражения листьев на 1 - 10 2 балла выше при обильном спороношении посравнению со штаммом 1,2.3.4.Физиологическая характеристика штаммоввозбудителя фитофтороза картофеля на тест- наборе растений - дифференциаторов Шика 15 приведены в таблице. листа) изучаемых сортов картофеля, помещенные во влажную камеру, инокулируют суспензией зооспор. На обратную сторону доли ли ста при помощи Пастеровской пипетки наносят две капли суспензии зооспор, Через 24 ч капли суспензии стряхивают и доли листа переворачивают. Заражение проводят при 20 - 21 С. Учет развити болезни на листьях про водят на третий - четвертый и шестой дни.Определяют инкубационный период. Период развития гриба, степень спороношения грибастос , 1,1)заке 1 я листа по обп 1 епринятымс".,к. м,546650 Формула и:обретения Составитель С, Кудрявцева Редактор Т. Девятко Корректор Т. Добровольская Техред Е. Хмелева Заказ 369/15 Изд21 о Тираж 589 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, 7 К, Раушскаи иаб., д. 4/5Типограии, пр. Сапунова, 2 Штамм возбудителя фитофтороза картофеля РЬу 1 ор 11 йога 1 п 1 езгапз (Моп 1) де Ву (раса 1.2.3.4.6,6+0.10 худ). Хранится в коллекции ВНИИФ под17.Морфолого-культуральные признаки.На среде состава, г/л: глюкоза - 20,0; КН 2 РО., - 1,0; МдБО 4 7 Н,О - 0,5; КаС 1 - 0,1; СаС 12 - 0,1; С 4 НаОвКМа 4 Н 20 - 5,0; пептон - 2,62 (вносят непосредственно перед стерилизацией), ГеС 1, (1%-ный раствор) - 10 капель (вносят перед стерилизацией, анейрин (В) - 5 мкг (вносят перед стерилизацией, агар - 8,0 г, дистиллированная вода - до 1 л. На двадцатый день роста развиваются колонии диаметром 9 см, края колоний четко очерчены, поверхность колоний ровная, воздушная грибница однородная, порошисто-белого цвета, конидии крупные длиной 36,4 мкм, шириной 21,2 мкм, овал ьно-удлиненной формы, спороношение обильное.На органической среде морфологические признаки рас этого гриба неразличимы.Физиологические признаки. Отношение к азоту: усваивает 1 - аспараг 1 ш, 1. - аспарагин, аргинин соляно-кислый;1 - клютамин, лейцин, глюкоголь,Отношение к источникам углерода: усваива 5 ет сахарозу, лактозу, декстрозу, глюкозу,м альтозу.Отношение к витаминам; усваивает витамины В и Ва.Штамм обладает широким спектром виру 10 лентности, высокоагрессивен, конидип обнльн; .: .-нергично прорастают взооспоры, обладающие повышенной жизнеспособностью, имеет инкубационный период два - три дня, период развития - три - пять дней, сильно по 15 ражает листья картофеля (4 - 5 баллов),обнль; с спороношенпе,Штамм поддерживается на агарпзованнойсредс Фриза с пептоном при рН 5,5 - 5,6, стерилизованной при 0,5 атм в течение 40 мин.20 Источники информации, принятые Во Внимание при экспертизе:1. Журнал Микология и фнтопатология,т. 7, 19/3 (1).2, Журнал ЕНРЬ 11 са, 2. 1953, р. р. 173 -25 178,