Способ определения форм растений

ОПИСАНИЕ ИЗОБВЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ1 п 1 528066 Союз Советских Социалистических Республик(51) М. Кл.- А 01 Н 1/04 с присое ением заявкиГосударственный комите(23) ПриоритетОпубликовано 15.09,76. Бюллетень34 вета Министров СССо делам изобретении и открытийата опублик ания описания 20.10.76 72) Авторы изобретен. Г. Холодо А. Василевская Белорусский научно-исследовательский институт земледел аявите ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОРМ РА И(54) СПО сятся к лег - 80 оо 0 обамыми мнотся тем, что т суспензию е, Способ ос(и активные ЗО Изобретение относится к биохимическому анализу белков для определения форм растений путем диск-электрофореза в гелевом носителе и может быть использовано в сельскохозяйственной и лесной селекции. 5Известны способы биохимического определения сортовой принадлежности по электрофоретическим спектрам белков в гелевом носителе с последующим сравненнем электрофореграмм испытуемых и эталонных образ О цов. Такие способы основаны на анализе отдельных фракций белков, преимущественно спирторастворимых, с использованием крахмального геля.Анализ спирторастворимых фракций бел ков (глиадинов) имеет существенное значение в основном только для пшениц, Продолжительность анализа указанного метода составляет 6 - 8 час и требуется приготовление вытяжек спирторастворимых белков, Кроме 2 О того, крахмальный гель обладает плохой воспроизводимостью и малой разрешающей способностью,Цель изобретения - повышение разреша. ющей способности, сокращение продолжи тельности и упрощение процесса.Поставленная цель достигаедиск-электрофорезу подвергаюмуки в трис-глищиновом буфернован на том, что каталитичес 1 белки в большинстве своем отнокорастворимым кислым белкам (щей суммы белков) и являются сгокомпонентными.Электрофорез суспензии муки проводят в полиакриламидном геле в виде стержня предпочтительно длиной 100 и диаметром б мм при градиенте напряжения 60 В/см, плотности тока 18 мА/см- в течение 1 час.На фиг. 1 приведены схемы электрофореграмм различных видов растений.Из приведенного видно, что каждый вид имеет определенный электрофоретический спектр белков наряду с видовыми признаками имеются признаки, общие для семейства. Так, семейство зерновых (рожь, пшеница, ячмень) имеет общие диски с Р 0,06+0,02;0,12; 0,25+0,02; 0,37; 0,43+0,02. Семейство бобовых (бобы, вика, горок) имеет общие диски с Кт 0,31; 0,35+0,02; семейство сосновых (сосна, кедр) - 0,07, 0,27+0,02, 0,33, Для сравнения приведена схема электрофоретического спектра яблони.Проведенные исследования показали, что способ диск-электрофореза суспензии муки позволяет решать ряд практических задач селекции и семеноводства сельскохозяйственных растений, в том числе проводить идентификацию сортов; устанавливать практическое наличие гибридного материала в 1, (по зер528066 О,РВ Р, 12 Р,гб Р,иб Р,иб и 12 Р 7 в ои О,О 7 о,в О,7 В ог 7 озо О 5 З О,77 Р, 7 г О 1 ВР,25РзКОЗ 7 Р,7 В 0,25 огв О,57 ОЮ 5 Р. В 7 Р,27 о,г 5 рг 7 РЗб О 57 О С 7 О Оиб Рсг 7 Р,г О 57 ОЧ 1 Р,43 овв 057 о,и ою О 5 О РР.О О 51 О 53 О 57 о,бо О 55 о 5 О 5 о 5 О,5 Р Р,55 бо бг о,бб огг О,75 ОВ 1 и В 5 Гори Сосни клоня IГ%не ни 17 с ну); устанавливать доминантность сорта при скрещивании, характер наследования свойств родительских форм гибридами; устанавливать наличие мутантных форм.В связи с тем, что диск-электрофорезу подвергают суспензию муки, практически исключены потери материала при переносе, благодаря чему способ позволяет использовать малые количества испытуемого материала при хорошей воспроизводимости, быстроте и простоте выполнения анализа.П р и м е р. Определение формы растения, На фиг. 2 приведены электрофорепические спектры известных сортов ржи и неизвестного (Х),Для идентификации неизвестного образования озимой ржи составляют атлас электрофоретичесиих спектров известных сортов ржи.Затем готовят суспензию муки из зерна неизвестного сорта и подвергают ее электрофорезу в цилиндрах полиакриламидного геля, имеющих длину 100 и диаметр 6 мм, при градиенте напряжения 60 В/см и плотности тока 18 мА/см в течение 1 час. Полученные электрофоретические спектры суммарного белка сопоставляют с электрофоретическими 5 спектрами белков известных сортов.Неизвестный сорт является гибридом Вятки 2 и Харьковской б 0. Формула изобретения101. Способ определения форм растений,включающий диск-электрофорез белков в гелевом носителе и сравнение электрофоретических спектров испытуемых и эталонных об 15 разцов, отличающийся тем, что, с цельюповышения разрешающей способности, сокращения продолжительности и упрощения процесса, диск-электрофорезу подвергают суспензию муки в трис-глициновом буфере,20 2, Способ по и. 1, отличающийся тем,что гелевый носитель - полиакриламидныйгель используют в виде стержня,,ба бб Обо б 9 7 г б 9 73 вг РО кциоононяи прискульскоя Вятнаг ЯтАРа Мрете Гц 3 ридию ам фгга Составитель М. федоров едактор Е. Хорина Техред 3. Тараненко Корректор Л. БрахнинПодписиСР Изд.1660 И Государственного комитета по делам изобретений и 113035, Москва, Ж, Рауш