Способ идентификации моносомных растений

О П И С-А,Н.:И Е ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик) Заявлено 07.01,75(21) 2094350/15присоединением заявкиГасударственный каСовета Министровпо делам изооретен открытий итетСРй 3) Приорнте(4 б) Дата опубликования опнсанн н С 1.0 Авторыизобретения А, Попереля и А, И, Рыбалка А, Созинов А, ф, Стельм 1) Заявите Всесоюзный ордена Ленина и ордена Труд селекционно-генетический инст ового Красного Знаме(54) СПОСОБ 1 ТИФИКАЦИИ МОНОСОМН АСТЕНИИмоносом1тения со ного по хромосоме 1 Д или 1 В рарта Чайниз Спринг с сортом Одская 26 (белки, контролируемые хромосомой 1 Д или 1 В у этих сортов, резко отличаются между собой по количеству и характеру распределения электрофоретическиразличных компонентов в спектре) зерновку гибрида делят на две части, зародышевую часть проращивают, а спиртовый экстракт белка оставшейся части эндоспермаисследуют электрофоретически, По присущствию в спектре характерных полос-маркеров хромосомы 1 Д или 1 В отцовского сорта и отсутствию соответствующих компо- .нентов материнского сорта определяют,что данное растение моносомное, Электрофоретические спектры с присутствием маркерных белков обеих гомологичных хромосом родителей принадлежат эндоспермамс полным набором хромосом,и н оносомным моносомикаными, Таким Изобретение относится к генетическимисследованиям в селекции растений,Известны цитологические способы идентификации моносомных растении, напримерпутем подсчета хромосом в соматическихклетках корешков, изучения конъюгациихромосом в мейозе и определения микроядер на стадии тетрад микроспорогенеза,Недостатками известных способов является их трудоемкость, трудность выявления факта "смены унивалента" и установления принадлежности гибридного материала к данной моносомной линии,Предлагается способ идентификации моносомных растений, например пшеницы,при котором моносомное состояние отдельных хромосом определяют при сопоставлении электрофоретических спектров спиртовых экстрактов белков части эндоспермапервых поколений материнских линий моносомных серий, отцовских форм и их гибридов,Для идентификации моносомных растений по Р -зернам, полученным от скрещ вания цитологически идентифицированного е 25 (53) УДК 631,523Проанализировано 60 зерен Г спредварительной цитологическойидентификацией.Из них цитологически и элекгрофоретически найдено 9 из 40 моносомиков соответственно. Проанализировано 20 зерен Г спредварительной цитологической иденгификацией.Из них цигологически и электрофореги-чески найдено 5 и 15 моносомиковсоо тве гс твенно. П р и м е ч а н и е: в среднем процент идентификации моносомиков Р цитологическим путем-70%, предлагаемым способом%.2. Способ поп. 1, отли ч ающ и й с я тем, что сопоставляют электрсьфоретические спектры спиртовых экстрытов белков эндосперма первых поколений гибридов заранее известных линий и исходных материнских линий моносомной серии, например 1 Д, 1 В, 6 А. ное состояние является одновременно итестом на "смену унивалента,Для цитологической идентификации мсмносомных материнских растений используют микроскоп МБИ, а для электрофореза спиртовых экстрактов белков - крахмальный гель в алюминийлактатном буфе-оре.Для электрофореза непосредственно брали второй экстракт белка, поскольку пер- фвый содержит вещества .липосахаридной.природы, загрязняющие гель,оПервую экстоакцию проводят при 1-2 С"в холодильнике, чтобы свести потери белкак минимуму и достичь необходимой степениочистки белков от липидов,Электрофорез проводят на колонках с14%-ным крахмальным гелем при рН,1в алюминийлактатном буфере, сила токана колонку,25 ма, продолжительность фэлектрофореза, - 4 час,На фиг, 1 и фиг, 2 приведены электрофорегрлммы спиртоизвлекаемой фракции белкоь эндосперма сортов Одесская 26 и Одесская 16; моносомных по хромосоме 1 Д и формула изобретения451, Способ идентификации моносомных рас-. тений, например пшеницы, по их спектрам, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и удешевления процесса и одновременного выявления, факта смены унивалента", моносомное состояние отдельных хромосом определяют при сопоставлении электрэфоретических спектров спиртовых экстрактов белков части эндосперма материнских линий 1 И линий сорта Чайниз Спринг и их мона..сомных и дисомных гибридов РМоносомный гибрид Г, (см. фиг. 1)отличается от дисомного присутствием лкшьверхних четырех полос спектра, характерных для отцовского сорта Одесская 26,1 Дхромосома которого находится в Р в моносомном состояний, У дисомика присутствуют компоненты обоих родителей,Моносомик Р (см. фиг, 2) по 1 В хромосоме отличается от дисомика присутствиеммаркерных полос Я и 9 1 В хромосомы,характерных для сорта Одесская 16, и отсутствием полос 8, 9 и 10 сорта ЧайнизСпринг, Дисомик имеет все компоненты ро-.дителей.Для идентификации 100 моносомныхрастений Р практически со 100%-иой точностью необходимо 2 дня, Идентификациятакого же количества растения цитологическим путем выполняется в течение не менееза 8-10 дней при значительно меньшей точности и полноте выделения моносомиков,Технически выполнение цитологического анамоносомных серий, отцовских форм и их гибридов,