Способ определения сорбционной способности ионнообменных смол в отношении ротавирусов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 0353 А й) 1 Й 1 02 5)5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Ростовский наинститут эпидемипаразитологии и ги(56) Методическиетарно-вирусологичтов окружающей с М 39 учно-и ологии гиены А,А,Цац ре коме ес кому реды, М ледовательскиимикробиологии а и С,А.Кондации поконтролюбд (Я Изобретение относится к области санитарной вирусологии и может быть использовано в вирусологических лабораториях санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений. Ра, нее не известны способы определения сорбционной способности ионообменных смол в отношении ротавирусов, Ионообменные смолы подбирались эмпирически.Целью изобретения является повышение точности и достоверности исследования сорбционной способности вновь разрабатываемых ионообменных смол для их дальнейшего использования в санитарно-вирусологической практике.Цель изобретения достигается тем, что через изучаемую ионообменную смолу пропускают автоклавированную воду, контаминированную обезъянним ротавирусом ЗАсо скоростью 1-2 капли в секунду.Далее ротавирус элюируют со смолы фосфатным буферным раствором и определяют зараженность элюата внесенным в воду ротавирусом, По формуле расчитывают коэф(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОРБЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ ИОНООБМЕННЫХ СМОЛ В ОТНОШЕНИИ РОТАВИРУСОВ (57) Использование:. санитарная вирусология. Сущность изобретения: через изучаемую ионообменную смолу пропускают автоклавированную воду, контаминированную ротавирусом, и полученный элюат исследуют в РНГА с зритроцитарным ротавирусным диагностикумом. По формуле рассчитывают коэффициент сорбционной способности исследуемой ионообмен ной смолы. 1 табл. фициент сорбционной способности исследуемой ионообменной смолы.Определение зараженности элюата ротавирусом проводят с помощю реакции непрямой гемаглютинации с эритроцитарным ротавирусным диагностикумом, разработанным в Ростовском-на-Дону НИИ эпидемиологии, микробиологии, паразитологии и гигиены. Указанная реакция позволяет получить необходимые результаты в течение 3- 5 часов, что значительно меньше, чем при использовании традиционных методов культуры клеток.Ниже приводятся примеры осуществления способа.П риме р 1.Определение сорбционной способности вновь разрабатываемых ионообменных смол АН-Э, АН-Э, АН-7 и АН-Мв отношении ротавирусов.Четыре десятилитровых баллона заполняют стерильной автоклавированной водой. В каждый добавляют по 5 мл взвеси обезьянного ротавируса ЯАс титром вируса1:4096. К каждому баллону подсоединяют резиновую трубку с колонкой, заполненной ионообменной смолой, В первой колонке - АН-3; во второй - АН-3; в третьей - АН-7; в четвертой - АН-М-З, Из каждого баллона вода самотеком стекает со скоростью 1 - 2 капли в секунду по резиновой трубке и проходит через ионообменную смолу, После прохождения всего объема воды производят элюцию с каждыми пятью миллилитрами фосфатного буферного раствора с рН - 8,2-8,4. Далее элюаты исследуют в реакции непрямой гемаглютинации с эритроцитарным ротавирусным диагностикумом, разработанным в Ростовском-на-Дону НИИ эпидемиологии, микробиологии, паразитологии и гигиены,В элюате со смолы АН-3 ротавирусы обнаружены в титре 1;512, В элюате со смолы АН-3 ротавирусы обнаружены в титре 1:2048, В элюате со смолы АН-7 ротавирусы обнаружены в титре 1:2048, В элюате со смолы АН-Мротавирусы обнаружены в титре 1;256,Коэффициент сорбционной способности ионообменных смол расчитывают по формуле: К = Р/С, где Р - индекс ротавируса после концентрирования. С - индекс внесенного ротавируса.Таким образом, для ионообменной смолы АН-3 коэффициент сорбционной способности будет равен - О,125; для АН-3 - 0,500; для 0 ЛН-7 - 0,500, для АН-М- 0,075.Следовательно наиболее целесообразным представляется использование в санитаэно-вирусологической практике ионообменных смол АН-3 и АН-7.Пример 2.Подбор оптимальной скорости п ропу 5 скания воды через ионообменную смолу иразмеров рН,Проведена серия экспериментов, результаты которой сведены в таблицу,Аналогичные исследования были прове 10 дены и с остальными ионообменными смолами. Результаты не отличались отвышеприведенных и говорят о том, что наиболее приемлемыми условиями пропускания воды через ионообменную смолу15 является скорость 1 - 2 капли в секунду и рНэлюата 8,2 - 8,4.Таким образом, в результате использования данного способа мы можем определить ионообменную смолу, использование20 которой наиболее целесообразно в санитарно-вирусологической практике.Формула изобретенияСпособ определения сорбционной способности ионообменных смол в отношении25 ротавирусов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повыШения точности и достоверности, через смолу пропускают стерильную воду, контаминированную ротавирусом, соскоростью 1 - 2 капли в 1 с, после чего вирусы30 смывают со смолы фосфатным буфернымраствором с рН 8,2 - 8,4, определяют количество ротавируса в элюате с последующимрасчетом коэффициента сорбционной способности по формуле: К = Р/С, где Р - . ин 35 декс ротавируса после концентрирования;С - индекс внесенного вируса,1770353 Продолжение таблицы Составитель М.МировичТехред М.Моргентал Корректор З,Салко Редактор Т.Иванова Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 3712 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5