Штамм вируса каскелен для приготовления диагностических препаратов

. Фильтрую- . Обработка спензии деСУДАРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССРОПИСАНИЕ И(54) ШТАММ ВИРУСА КАСКЕЛЕН ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ(57) Использование; вирусология. диагностика, иммунология. Сущность изобрете-ния; штамм нового вируса Каскелен. М Каэкл изолирован из клещей 1 хобез регзоЬсасцз. Штамм прошел 7 пассажей, инкубационный период на новорожденных белых мышах составляет 3-4 дня. ИнИзобретение относится к вирусологии, Штамм вируса Каскелен М Каз - 4751. кл хранится в лаборатории трансмиссивных вирусных инфекций НИИэпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Минздрава Казахской ССР и в государст- . венной коллекции вирусов Института вйрусологии им.Д.И,Ивановского АМН СССР под номером 902. 2фекционный титр равен 7,01 19 ЛД 50/0,02 мл. Взаимодействие штамма вируса Каскелен с культурой клеток Чего сопровождается дегенерацией клеток,.титр вируса равен 6,0 19 ТЦД 50/мл. Культуры клеток СПЭВ, ВНК, ФЭК к вирусу не чувствительны. Вирус высокочувствителен к эфиру и дезоксихолату натрия, титр при обработке снижается на 3-4 19 ЛД 50/0,02 мл. При обработке БУДРом титр вируса не снижается, При серологической идентификации с использованием иммунных сывороток к представителям 25 антигенных групп арбовирусов антиген иэ штамма вируса Каскелен М Каз - 4751 кл ни с одним из нихне реагировал. Электронной- микроскопические данные. позволили установить размеры вируса, равные 50 - 55 нм, и отнести его к семейству Йеоч 1 г 1 ба 1, роду ОгЫчгаз, Штамм используется для приготовления диагностических препаратов (антигена, иммунной асцитной жидкости), которые употребляются при идентификации вновь выделенных штаммов арбовирусов из семейства реовиридае, лабораторной диагностике арбовирусных болезней. изучении иммунитета населения и животных и выявлении антигена в биологических объектах окружающей среды, 2 табл,Цель изобретения - штам о ранее арбовируса, обладаю вской иммуногенной а позволяющей использовать е овления специфических диа репаратов,Морфологические признак щийся вирус в размере 50 н ирусосодержащей мозовой сзоксихолатам натрия, эфиром приводит к снижению титра вируса на 3-4 д ОЭ 50/О;02 мл, что свидетельствует о наличии липосодержащей оболочки.При обработке БУДРом титр вируса не снижался, что является косвенным доказательством его принадлежности к РНК-содержащим вирусам,При электронно-микроскопическом исследовании мозга мышей-сосунков, зараженных. вирусом Каскелен, в цитоплазме клеток наблюдались структуры, типичные для размножения Орбивирусов; мелкогранулярные матриксы с формирующимися кольцевидными частицами диаметром 50 нм и отдельные трубчатые структуры диаметром 40 нм. Формирующиеся вирусные частицы имеют электронно-плотную сердцевину и образуют в матриксах кристаллоподобные скопления,На основании электронномикроскопических и антигенных признаков изолированный вирус отнесен к семейству Реовириде, роду Орбивирус.Культуральные свойства. Взаимодействие штамма В Каз - 4751 кл с культурой клеток Чего сопровождается дегенерацией клеток. Титр вируса равен 6,0 1 д ТЦД 50/мл. Культуры клеток СПЭВ, ВНК, ФЭК к вирусу не чувствительны.Адаптационные свойства. Исходный вирус выделен из клещей хобез регзо 1 сатцз и адаптирован к организму 1-2 дневных белых мышей. Прошел 7 пассажей. Инкубационный период составил 9 дн при первичном выделении и сократился до 3 - 4 дн в последующих пассажах, Инфекционный титр вируса для новорожденных белых мышей при мозговом заражении достигает 7,0 1 дО 50/0,02 мл,Антигенные свойства. Серологическая идентификация штамма М Каз - 4751 кл вируса Каскелен с использованием иммунных асцитных жидкостей к 80 арбовирусам 25 антигенных групп не выявила антигенной связи его с известными арбовирусами.Штамм при иммунизации лабораторных животных вызывает образование комплементсвязывающих, нейтрализующих и . преципитирующих антител.Патогенные свойства вируса Каскелен для животных, Вызывает смертельную инфекцию у новорожденных белых мышей при внутримозговом заражении, Инфекционный титр в мозгу достигает 7,0 1 д .0 50/0,02 мл. Для взрослых белых мышей и морских свинок при внутримозговом заражении вирус Каскелен .слабопатогенен.Патогенные свойства вируса Каскелен для людей. В сыворотках крови здорового15 40 готовленными на основе иммунной асцит 45 50 55 20 25 30 35 населения, собранных.в предгорных и полупустынных рафонах Казахстана, антитела к вирусу.Каскелен в РСК выявлены в 1,75- 3,2% случаев,Диагностический препарат, антиген из штамма М Каз - 4751 кл вируса Каскелен; получают путем внутримозгового заражения новорожденных белых мышей. Из мозга животных, взятых на высоте клинических проявлений заболевания, готовят антиген путем сахарозо-ацетоновой экстракции.Диагностическую иммунную асцитнуюжидкость готовят по известному методуС.Я, Гайдамович с соавторами. Изобретение аллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1, Материал для исследования - сыворотки крови населения из эндемичных по арбовирусным инфекциям районов Казахстана. Проводят постановку серологических реакций - РСК с использованием сахарозо-ацетонового антигена, приготовленного из штамма вируса Каскелен М Каз - 4751 кл, Реакцию ставят по общепринятому способу - микрометодом на аппарате Такачи,Результаты исследования сывороток людей приведены в табл, 1.Таким образом, использование предлагаемого штамма вируса Каскелен для приготовления диагностического антигена способствовало расширению набора диагностических препаратов с целью изучения иммуноструктуры населения,П р и м е р 2, Материал для исследования - 10% суспензии из клещей и комаров, собранных в природных очагах арбовирусных инфекций, Проводят постановку РНГА с эритроцитарными диагностикумами, приной жидкости их предлагаемого штаммаМ Казвируса Каскелен, РНГА ставятпо общепринятой методике,Результаты исследования суспензий из членистоногих приведены в таблице 2 Следовательно, с помощью эритроцитарных диагностикумов, приготовленных на основе иммунной асцитной жидкости к штамму М Казвируса Каскелен, устанавливается наличие антигена.вируса в биологических обьектах.Предлагаемый штамм нового арбовируса и приготовленные на его основе диагностические препараты найдут применение в диагностических лабораториях вирусологического профиля,Ф ор мул а изобретен и я Штамм вируса Каскелен ГКВ 902 для приготовления диагностических препаратов.1744108 Таблица 1 Табли 169 Тираж ПодписноеИПИ Государственного комитета по изобретениям иоткрытиям113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 За КНТ СССР зводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужго ул, Гагарина, 1 Составитель Д.ЛьвовРедактор М.Недолуженко Техред М,Моргентал Корректор М,По