Способ выделения иерсиний

(19) (11) СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК г 51)5 С 12 ГОСУДАРСТВЕ ННЪ И КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ МУ СВИДЕ ТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКО икова,И ение относится к медицине, а кте иологической диагностике(56 Этиология, эпидемиология, клиника илабораторная диагностика иерсиниоза человека, Методические рекомендации дляэпидемиологов, микробиологов и инфекционистов. - М., 1982,(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИЕРСЕНИЙ(57) Использование: медицинская микробиология, способы бактериологической диагименно к ба рартритов.Известен способ выделения иерсиний с использованием "холодового обогащения", состоящий из взятия материала, накопле-. ния материала в буферном 0,85-ном растворе хлорида натрия, помещении в холодильный шкаф при 6-12 С на 15 - 21-й день и высеве каждые 3-5 дней на плотные питательные среды с общепринятой идентификацией,По известному способу выделить иерсинии при посеве синовиальной жидкости не; удается,Цель изобретения - . повышение высеваемости иерсиний.П р и м е р 1, Синовиальную жидкость забирают в стерильный шприц путем прокола кожи и фасций суставной сумки, Если в шприц попал воздух, его обязательно удаляностики артриров, в частности иерсиниозной этиологии. Сущность изобретения; материал из сустава забирают герметически закрытым шприцам, Разводят его дистиллированной водой (рН 6,8-7,0) в соотношении 1;5. Инкубируют в атмосфере 2,5-4,0 углекислого газа, 15-17;:кйслорода, относительной влажности 94 - 1000 при 38 - 40 С в течение 24 - 48 ч, Выросшие колонии пересевают на плотную йитательную среду. Выращивают в этих же:условиях и ндентифицируют по биохимическим тестам, Способ позволяет. выделить иерсинии из синовиальной жидкости. Положительный ответ получают на 5 - 6-й отрицательный - на 2-й день обследования. 3 табл. ют, Со шприца, не вынимая поршня, снима- Б ют иглу и носик его опускают в расплавленный парафин для полной герметизации. При поступлении шприца в лабораторию его содержимое после снятия парафина выдавливают поршнем в пробирку с 4 дистиллированной водой (рН 6,8), предвари- О тельной прокипяченной и охлажденной. Со- Ж отношение матери.ала и среды 1:5. (Я Пробирку с посевом закрывают рыхлой ватной пробкой и помещают в эксикатор, на дно которого кладут ватный тампон, обильно смоченный водой, и зажигают белую (парафиновую или стеариновую) свечу. Закрывают крышку эксикатора, Для большей герметизации край крышки смазывают вазелиновым маслом. До угасания свечи следят за сосудом, так как разогретый воздух может приподнять и сдвинуть крышку. После угасания свечи эксикатоо с газовой смесью 2,5(С 02, 150 г и относительнойвлажностью 94% помещают в термастат при 38 С. После 24 ч инкубации извлекают пробирку с посевом, не встряхивая ее, берут пипеткой 0,2 мл содержимого из верхней трети и переносят на чашки Петри со слабо- щелочным агаром. Обе чашки помещают в эксикатор и в том же режиме культивируют 18 ч; затем их извлекают иэ эксикатора и просматривают.Изолированные колонии (6-8 шт,) пересевают на слабощелочной агар и инкубируют при обычных условиях 20-24 ч (как в известном способе). Выросшую культуру идентифицируют с сыворотками против иерсиний разных видов и по биохимическим местам.При исследовании синовиальной жидкости 34 больных иерсиниозом, что подтверждается или выделением культур ( группа) или положительными серологическими тестами (П группа), выделены культуры иерсиний и других микроорганизмов (табл. 1).П р и м е р 2. Синовиальную жидкость берут, как в примере 1, Содержимое шприца засевают в пробирку с дистиллированной водой (рН 6,9) в соотношении 1:5, помещают в анаэростат, наполненный 3,5% С 02, 16,0% 02 при относительной влажности 96%, и ставят в термастат при температуре 39 С на 36 ч (далее по примеру 1).П р и м е р 3. Синовиальную жидкость из сустава получают, как в примере 1, Содержимое шприца засевают в пробирку с дистиллированной водой (рН 7,0) в соотношении 1.5 и помещают в анаэростат с газовой смесью, состоящей из 4,0%; из С 02, 17,0% 02 с относительной. влажностью 100%. Посев инкубируют 48 ч при 40 С (далее по примеру 1).При обследовании 83 больных артритами предлагаемым способом было выявлено 44 культуры разных видов микроорганизмов, 17 из которых идентифицированы после первого высева, остальные - после второго (табл. 2). Десять культур нвидентифицированывообще, Выделенные иерсинии были определены как энтероколитика и псевдотуберкулезис (табл. 3).5 Таким образом, от 34 больных артритами, у которых в разные сроки бактериологи- чески из испражнений, мочи или крови были выделены иерсинии и (или) серологически выявлены специфические антитела, из сино виальной жидкости было выделено 20 культур иерсиний (58,8%). В том числе, в 5 случаях они были выделены в сочетании с ацинетобактером(табл. 1), У больных артри тами с отрицательными результатами бактериологических и серологических исследований на иерсиниоз иэ синовиальной жидкости иерсинии не были выделены ни у одного больного.20 Таким образом, способ, позволяет в короткие сроки (положительный ответ на 4 - 5- й день, отрицательный - на 2-й день) выделить иерсинии из синовиальной жидкости больных артритами с положительной ге мо-,копро- или уринокультурной илисерологическим подтверждением иерсиниоза в 58,8% случаев.Кроме того, способ прост в исполнениии доступен для бактериологических лабора торий СЭС и больниц. Формула изобретения Способ выделения иерсиний путем забора синовиальной жидкости, разведения.35 ее, инкубирования с последующими пересевами и культивированием на плотной питательной . среде и идентификацией выделенной культуры, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения высеваемости 40 иерсиний, синовиальную жидкость разводят дистиллированной водой при рН 6,8-7,0 в соотношении 1:5, инкубацию осуществляют в атмосфере 2,5 - 4,0% углекислого газа, 15-17% кислорода, относительной влажно сти 94-100% при температуре 38-40 ОС втечение 24-48 ч и культивирование проводят в тех же условиях.Таблица 11738857 Таблица 2 Иерсинии Всего ных абс ч 21 25,2 11 13,2 2 2,4 10 12,0 44 53,2 83 Таблица 3 У. ептегосо 11 г 1 са 05 09 03 06 08 10 Редактор В. Петраш Заказ 1978 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат."Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Число больВо 1 и серовар иерснийЧисло выделенных штам моеАцинетобакте- Псевдомонады Неидентифициы ованные абс,ч.. абс.ч,абс.ч.абс,ч. У. зецботоЬегсиоз 1 з