Способ определения тяжелых металлов в биологических жидкостях

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 2322 А 1 я)5 001 й Я САНИЕ ИЗОБРЕТ ВИДЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКО ательскии институ . Пономарева Х медицине, а ть использоОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЯЖЕЛЫМЕТАЛЛОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ(57) Изобретение относится кименно к биохимии, и может бы Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, в частности к клинической и экспериментальной биохимии, и может быть применено для определения концентрации тяжелых металлов в крови, моче и других биологических жидкостях.Цель изобретения - повышение точности способа и увеличение числа определяемых металлов.Способ осуществляется следующим обПолучают пробу биологической жидкости (например, от больного берут 5,0 мл крови из локтевой вены в гепаринизированную пробирку), пробу переносят в фарфоровый тигель, добавляют концентрированную азотную кислоту в количестве 0,35 мл и такое же количество концентрированной сер- . ной кислоты, тщательно перемешивают, ставят на огонь и выпаривают досуха. Мочу и дуоденальное содержимое берут по 20 мл,вано для определения тяжелых металлов в биологических жидкостях. Цель изобретения - повышение точности способа и увеличение числа определяемых металлов. Пробу биологической жидкости минералиэуют последовательно концентрированными серной и соляной кислотами, проводят полярографическое определение металлов в растворе 48 мМ солянокислого гидразина, содержащем хлористый натрий и соляную кислоту, а в качестве стандарта используют чистые тяжелые металлы. Способ позволяет определять в одной пробе свинец, медь и цинк с высокой точностью, 2 табл,Тигель помещают в муфельную печь на 2 ч, после минерализации тигель охлаждают, полученный осадок заливают 10,0 мл фонового раствора А, Фоновый раствор готовят путем растворения иэ 150,0 г хлорисгого натрия, 5,0 г соляно-кислого гидразина в 10,0 мл, 18,3 г концентрированной соляной кислоты, после чего доводят объем раствора до 1000 мл дистиллированной водой. Перемешивают до полного растворения, отфильтровывают и с фильтратом проводят полярографические исследования. Основные стандартные растворы готовят путем взвешивания по 0,5 г меди и кадмия и по 1,0 г свинца и цинка с точностью до 0,001 мг, Навески металла подвергают действию азотной кислоты (1:1) до полного разложения. Полученный раствор выпаривают, приливают концентрированную серную кислоту, выпаривают, осадок растворяют в 300 - 400 мл фонового раствора В, приготов 1702322ленного разведением 150,0 г хлористого на- Результаты анализа представлены вгрия в 10,0 мл концентрированной соляной табл.1,кислоты, доведенной дистиллированной во- П р и м в р 2, Рабочий Рвозраст 49 лет,дой до объема 1000 мл. Так готовят основ- стаж работы 22 года, агломератчик. Диагные стандартные растворы для металлов, 5 ноз: отдельные симптомы воздействиякоторые затем исследуют в опытных про- свинца, Диагноз поставлен при профилакбах. В 1 мл основного стандартного раство- тическом клиническом осмотре в Усть-Камера содержится по 0,5 мг меди и кадмия и по ногорском отделе гигиены и профпатологии1 мг свинца и цинка. НИИ краевой патологии МЗ КаэССР. К 5,0Рабочие стандартные растворы готовят 10 мл крови больного добавляют 0,35 мл азотследующим образом. ной кислоты, перемешивают, добавляютБерут 1,0; 2,0; 3,0; 5,0, 10,0; 20,0; 50,0; 0,35 мл серной кислоты, проводят озоление100,0;200,0 мл основного раствора, налива- пробы в муфельной печи растворением вютвраэныесосудыемкостью 1 лидоливают фоновом растворе А, состоящем из хлоридо объема 1000 мл фоновым раствором А, 15 стого натрия, соляно-кислого гидразина вПолучены концентрации стандартных рас- соотношении 30:1, который затем растворятворов: медь и кадмий - 0,5; 1,0, 1,5; 2,5; 5,0; ют в 10,0 мл концентрированного раствора10; 12,5; 25; 50; 100 мг/л; цинк и свинец - азотной кислоты с последующим доведени 1,0; 2,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0, 25,0; 50,0; 100,0; ем объема раствора до 1000 мл. Полярогра 200,0 мг/л, 20 фируют пробу и стандарты, В качествеПроводят полярографию пробы и стан- стандартов используют чистые металлы:дартов. Полярография проб проводится при свинец, цинк, медь, Вычисляют количествопотенциалах: для свинца 0,47 - 0,5; для меди свинца, меди, цинка в пробе по формуле.0,6; для цинка 1,02 - 1,08, Стандарт для поля- Реэультаты анализа представлены врографии подбирается в зависимости от 25 табл,2,концентрации элементов в биосредах, Да- Проведены исследования проб крови по,лее рассчитывают содержание свинца в изу- предлагаемому способу и по способу-проточаемой пробе по следующей формуле:, типу, Исследованы пробы крови 15 чел наЧ Н Е 1000л К содержание свинца (другие элементы не быХ - К 1 или К 230 ли исследованы, так как отсутствует поля: ,где Х - содержание определяемого элемен- рографическая методика для определения,та в пробе,мг; содержания в биосредах цинка и меди, кадЧ - объем пробы, мл (разведение); мия и др. по методу прототипа). ПредлагаеН - высота полуволны пробы, мм; мый способ позволяет повысить точность иЕ - концентрация элемента в стандарт предел определения веществ (на примереном растворе, мг/мл; свинца) - 0,002 мкмоль в пробе (по прототиУ - высота полуволны стандартного пу 0,004 мкмоль в пробе). Систематическаяраствора, мм; ошибка по методу прототипа 1,4 , по предК 1 - коэффициент пересчета для крови лагаемому способу при расчете критерияиз мкг/% в мкм/л равен 0,4826 х 20; 40 Стьюдента 2,086; случайная ошибка по проК - коэффициент пересчета для мочи из тотипу+4,6 , а по предлагаемому способумкг/л в мкм/л равен 0,04826 х 2, 1,8-3,2%,Расчет содержания других тяжелых ме- Способ позволяет наряду со свинцомталлов в биосредах (цинка. меди, кадмия) определять в одной пробе цинк и медь.проводят аналогично по системе СИ для 45этих металлов, Формула изобретенияСпособ поясняется следующими при- Способ определения тяжелых металловв биологических жидкостях. включающийП р и м е р 1. Рабочий машинострои- минерализацию проб, полярографическийтельного завода, 27 лет. Диагноз: практиче анализ и расчет с использованием стандарски здоров, К 5,0 мл крови последовательно та, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюдобавляют по 0,35 мл азотной и серной кис- повышения точности способа и увеличениялот, перемешивают, затем проводят мине- числа определяемых металлов. минерализарализацию пробы в муфельной печи, в цию проводят последовательно концентрипоследующем растворяют пробу вфоновом 55 рованной серной и соляной кислотами,растворе А с добавлением аскорбиновой определение ведут в растворе 48 мМ солякислоты, полярографируют пробу и стан- нокислого гидразина, содержащем хлоридарты чистых металлов (свинца, цинка, ме- стый натрий и соляную кислоту. а в качестведи), вычисляют по формуле количество стандартов используют чистые тяжелые метяжелых металлов, талл ы.1702322 Таблица 1 абл Реда А,Маковская рректор О,Кундрик Го иям при ГКНТ СС ул. Гагарина, 101 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Уж аз 454 ВНИИ оставитель Н.Гуляевехред М.Моргентал Тираж Подписдарственного комитета по изобретениям и отк 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5