Штамм хламидий снlамydiа рsiттасi, используемый для изготовления биопрепаратов для диагностики и профилактики хламидиоза серебристо-черных лисиц

изготовления биологи для диагностики и проф ных инфекций серебрисШтамм выделен о мода серебристо-черно ве, где наблюдаются сл ворождения и слабор зобретение относиобиологии, в частноорной диагностикилактики, Цель из)а рз 1 пас) БЛ нтигенной и иммчто позволяет ег ческих препаратов илактики хламидийто-черных лисиц, т абортированного й лисицы в хозяйстучаи абортов, мертождения у пушных тся к ветеринарнои сти к средствам лаи и специфической бретения - штамм обладающий высоногенной активноо использовать для микр бора проф сЫаптуб кой а стью ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(53) 616,981.71:615.371/372.373 (088,8) (56) Червонский В,Н. Выявлен.1 е комплементсвязывающих антител у некоторых видов птиц и млекопитающих в РСК с антигенам вируса орнитоза, - Воп,)осы вирусологии, 1960, М 1, с.80Червонский В.Н., Попов О.М.Антиген для РСК при орнитозе-пситтакозе. - Вопросы вирусологии, 1959, )Ф 1, с,68,(54) ШТАММ ХЛАМИДИЙ СНММУО 1 А РЗПАС, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И ПРОФИЛАКТИКИ ХЛАМИДИОЗА СЕРЕБРИСТО-ЧЕРНЫХ ЛИСИЦ.(57) Изобретение относится к. ветеринарной микробиологии, в частности к средствам лабораторной диагностики и специфической профилактики, Целью изобретения является штамм СЫатуг)а рзттас БЛ, обладающий высокой антигенной и имунногенной активностью, что позволяет его использовать для изготовления биологических пре(5)5 А 61 К 39/118 С 12 й 1/20 паратов для диагностики и профилактики хламидийных инфекций серебристо-черных лисиц. Штамм БЛ, впервые выделенный от абортированного плода серебристо-черной лисицы, адаптирован к размножению в желточном мешке куриных эмбрионов (КЭ), вызывает их гибель на 4-10-й день заражения, Для КЭ инфекционный титр составляет 10 -10 ЭЛД 5 о/0,3 мл, Штамм нетоксичен, патогенен для серебристо-черных лисиц, норок и лаборатооных животных (белых мышей и морских свинок), Антиген из штамма БЛобладает выраженной активностью при излучении в реакциях связывания комплекта и энзиммеченных антител в сравнении с эталонным биофабричным хламидийным антигеном, изготовленным из штамма орнитоза "Лори". Штамм обладает высокой иммуногенной активностью и вызывает невосприимчивость к заражению у 90-100% белых мышей через 14-20 дн после их иммунизации. Размеры возбудителя, его морфологические, тинкториальные, физиологические, иммунохимические и антигенные свойства подтверждают, что штамм БЛотносится к бактериям рода сйатб)а, виду СЫагпОа рзттас 1. Штамм депонирован в банке штаммов Всесоюзного научно-контрольного института ветеринарных препаратов и имеет регистрационный йт 8, 2 табл.ции связывания комплемента путем сравнения титров антител в гипериммунн ых сыворотках морских свинок, полученных к штаммам хламидий: ВГНКИ М 8 и "Лори", а также антигенов из этих штаммов Характеристика антигенности штамма в сравнении со штаммом "Лори" представлена в табл, 2,Приведенные данные показывают, чтопо антигенной активности при исследоеании с гомологичной сывороткой штамм ВГНКИ М 8 в 16 раз превосходит штамм орнитоэа "Лори", а с иммунной орнитозной 50 зверей; адаптирован к размножению в куриных эмбрионах (КЭ), прошел 42 пассажапри последовательном культивировании нажелточных оболочках КЭ.5Штамм депонирован в банке штаммовВсесоюзного научно-контрольного института ветеринарных препаратов и хранитсяпод М 8 в коллекции специальной лаборатории штаммов Всесоюзного научно-исследовательского института (г. Казань).Штамм С.рзттас ВГНКИ М 8 имеет следующие морфологические и физиологические характеристики.Элементарные тельца штамма имеютокруглую форму размером 200-300 нм, пометоду Стэмпа окрашиваются в красныйцвет. Возбудитель находится внутри и внеклеток, располагаясь одиночно или группами. В мазках-отпечатках из паренхиматозных органов (печень, селезенка, легкие)20лабораторных животных (морских свинок,белых мышей) и норок, инфицированныхэтим штаммом, в реакции непрямой иммунофлуоресенции обнаружены цитоплазматические включения в виде полиморфных25одиночных и множественных желто-зеленых образований.Штамм хорошо культивируется е эпителиальных клетках желточных оболочек КЭ,вызывая их гибель на 4-10 день после зара- ЗОжения в зависимости от дозы вводимогоинфекционного материала, Для КЭ инфек-бционный титр составляет 10 - 10ЭЛДБо/0,3 мл,Штамм устойчив к действию стрептомицина; чувствителен к действию антибиотиков тетрациклинового ряда, е меньшейстепени - пенициллина.Штамм СЫаву 3(а рзботас ВГНКИ ч. 8(БЛ) не токсичен, патогенен для серебристо-черных лисиц и норок. Характеристикапатогенности штамма для лабораторныхживотных представлена в табл,1,Штамм обладает выраженной антигенной активностью, которую изучают в реак сывороткой е 5 раз уступает эталойному штамму.Антиген из штамма ВГНКИ М 8 выявляет специфические хламидийные антитела в реакции энзиммеченых антител в сыворотках кроеи больных, переболевших и экспериментально зараженных лабораторных животных и пушных зверей в титрах 1:10 - 1:10240.Штамм обладает высокой иммуногенной активностью и вызывает невосприимчивость к заражению у 90-1007 ь белых мышей через 14-20 дн после их иммунизации.П р и м е р 1, Исходным материалом для получения специфического хламидиозного антигена служит 20 О/,-ная взвесь, приготовленная на 0,2 М фосфатно-буферном растворе (рН 7.2) из 300 желточн ых оболочек КЭ, инфицированных штэммов ВГНКИ М 8. Очистку и концентрацию возбудителя хламидиоза лисиц производят путем центрифугирования дифференциального и в ступенчатом градиенте сахарозы. Затем элементарные тельца обрабатывают смесью, содержащей додецилсульфат натрия (ДСН) и зтилмеркаптан (ЭМ) в конечной концентрации 0,1 и 1 оь соответственно, Непрореагироваешие ДСН и ЭМ удаляют, диализируя суспензию против 0,15 М хлористого калия в течение 48 ч Получено 30 мл антигена, который е РСК имеет титр 1:128.П р и м е р 2, Для изучения иммуногеннысвойств выделенного штамма очищенный и сконцентрированный, как указано в примере 1, инфекционный материал штамма, содержащий 30 мг/мл белка, инактивированный 0,4-ным (в конечной концентрации) формалином е течение 5 сут при ЗООС, вводят белым мышам внутрибрюшинно е дозе 0,5 мл, В качестве контроля используют неиммунизированных белых мышей. По истечении 20 дн опытных и контрольных белых мышей заражают интраназально 10-ной взеесыю желточных оболочек КЭ, инфицированных штаммом БЛс инфекционным титром 10 ЭЛДо/0,3 мл в дозе 0,05 мл. В результате опыта выявлено, что однократное внутрибрюшинное введение инактивироеанных хламидий штамма ЬГНКИ ч. 8 защищает 90 белых мышей от интраназального заражения этим же штаммом. Формула изобретенияШтамм хламидий СЬавуба рзиас ВГНКИ, используемый для изготовления биопрепаратов для диагностики и грофилактики хламидиозФ серебристо черных лисиц.667870 Таблица 1 Таблица 2 П р и м е ч а н и е,- обратная ьеличина титров антител. Составитель В. РомановаТехред М.Моргентал Корректор М, Кучерявая Редактор А, Козориэ Заказ 2600 Тираж Ч 5 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 П р и м е ч а н и я. в/в - внутривенно,и/н - интраназвлыо; и/ц - интрацеребрально; в/б - внутрибрюшно; п/к - пэдкожно: н.и, - не исследовано.