Способ получения гиалуроновой кислоты

СООЗ СОВЕТСКИХС 0 ЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК Щ)5 С 08 В 3 с ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ВТОРСНОМ 13-05,89 ,90. Бюл, У 48юзный научно-иссл дов скии йной нститут текстильноромышленнос титекольников, В, В. Рк, Н . Ю. Пл еха нова,Б. Тулупова58.5 (088. 8)(57) Изобприродныхлучению именяе при колич ментов ги лидазы Цель иэобрчества целево Изобретение откосродных соединений, а тся к химии при ния - повышение капродукта и упрощеименно к спасосвой кислотыбыть применена бу получения гиалурон(ГУК), которая можетв качестве субстратавенном определении феронидазного действиянидаэы, в также в мецве ранозаживляющего слонгатора действия раственных средств. ние способа 1. Петухов в возрасг. с крупными греб Примерте от б мес до при к рмент ичес в гиалуэы и ров качеста и проми полностью овливают путем ии, гребни сре мывают водой, анные кровью,к- л вскрытия соннои арте зают у основания, пр концы гребнеи,срезают и отбра и личных лекарваю ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОБ ПОЛУЧКНИЯ ГИАЛУРОНОВОЦретение относится к химии соединений, а именно к погиалуроновой кислоты, которая ся в качестве субстрата ественном определении фер" алуронидазного действия - ронидаэы, а также в медицине в качестве ранозаяивляющего сред,ства и пролонгатора действия различных лекарственных срецств, Изобретение позволяет повысить качество целевого продукта (снизить содержаниебалластных белков и повысить срокхранения), увеличить его выход и исключить использование органическогорастворителя эа счет того, что петушиные гребни обескровливают, измель"чают, экстрагируют водой, экстракттермообрабатывают 1-2 мин при 90"100 С, охлаждают до 4-6 С в течениео 02-4 ч. Отделяют липиды, фильтруют,отделяют осадок сырья, в фильтратвводят активированный уголь в количестве 1-2% от массы исходного сырьяи перемешивают 1-2 ч, Смесь фильтруютПолученный фильтрат смешивают с осадком сырья и проводят двухстадийнуюэкстракцию водой в течение 18-24 чпри 20-22 С в присутствии пенициллина в количестве 0,05-0,07% от массы исходного сырья с последующей сушкой экстракта1 табл, 16169262 О 5 О 1 кг отпрепарированных гребней измельчают дважды на мясорубке, разбав ляют 2 кг воды (соотношение 1:2) и нагревают при 90 С в течение 1 минйзатем охлаждают при 4 С в течение -2 ч, всплывший на поверхность слой липидов тщательно снимают и отбрасывают, остаток фильтруют через марлю, к Фильтрату добавляют 10 г (1 Х к массе исходного сырья) активированного угля и перемешивают в течение 1 ч, Смесь Фильтруют, осадок белков отбрасывают, а Фильтрат присоединяют к осадку сырья, который предварительно разбавляют 2 кг воды (соотношение 1:2), содержащей 0.,5 г пенициллина (0,053 к массе исходнсгс сырья), и проводят зкстракцию при 20 С в течение 18 ч, Эк:тракт фильторуют через марлю, осадок сырья снова заливают 2 кг воды (соотношение 1:2), содержащей 0,5 г пенициллина, и экстрагируют при 20 С в течение 18 ч, Экстракт фильтруют Филътраты с.г первой и второй экстракции соединяют и сушат сублимацией. Получают 38 г (выход 3,87. к массе исходного ырья) ГУК с содержанием белка 05 Я, растворы которой не теряют свсей вязкости при хранении порошка в течение 1 г.П р и м е р 2. 1 кг отпрепарированных, как указано в примере 1, петушиных гребней измельчают дважды на мясорубке, разбавляют 2,5 кг воды (соотношение 1:2,5),и нагревают при 95 С в течение 1,5 мин, затем охпажодают при 5 С в течение 3 ч, всплывший на поверхность слой липидсв тщательно снимают и отбрасывают, остаток фильтруют через марлю, к Фильтрату добавляют 15 г (1,57 к массе исходного сырья) активированнсго угля и перемешивают в течение 15 ч, Смесь Фильтруют осадок белков отбрасывают, а фильтрат присоединяют к осадку, который предварительно разбавляют 2.,5 кг воды (соотношение 1;2,5), содержащей 0,6 г пенициллина (0,062 к массе исходного сырья), и проводят экстракцию при 21 оС в течение 21 ч, Экстракт Фильт" руют через марлю, осадок сырья снова заливают 2,5 кг воды (соотношение 1:2,5), содержащей 0,6 г пенициллина, и экстрагируют при 21 С в течение 21 ч. Экстракт Фильтруют, Фильтраты от первой и второй экстракцин соединяют и сушат сублимацией. Получают 39 г (выход 3,97 к массе исходного сырья, ,УК с содержанием белка О,А.57 раствс,ы которой не теряют своей вязкости при хранении порошка в течение 1 г,П р и м е р 3. 1 кг отпрепарированных, как указано в примере 1, петушиных гребней измельчают дважды на мясорубке, разбавляют 3 кг воды (соотношение 1."3) и нагревают при 100 С в течение 2 мин, затек охлаждают при 6 С в течение ч ч, всплывший на поверхнсс:ь слой липидсв тщательно снимают и отбрасывают, остаток фильтруют через марлю,. к Фндьтрату добавляютпу20 г :., Е к массе исхсдногс сырья)акгивирсванногс угля и пеоемешивают втечение 2 ч, Смесь Фильтруют осадок белков отбрасывают а фильтра,г присоединяют к осадку, ксторый предварительно разбавляют 3 кг воды (состношение 1:3), содержащей 0,7 г пенициллина (0,077 к массе исходногосырья), и проводят экстракцию при22 С в течение 24 ч, Экстракт фильтруют,через марлю осадок сырья сновазаливают 3 кг воды (соотношение :3)содержащей 0,7 г пя-.идиллина, и экстрагируют при 22 С в течение 24Экстракт Фильтруют, Фильтраты от первой и Второй экстракдии соединяют и суша.т сублимацией Получают 40 г (выход 47, к массе исходного сырья) ГУК с содержанием белка О,Я, растворы которой не теряют своей вязкости при хранении порошка в течение 1 г.Сопоставительный анализ предлагаемого и известнсгс способов привсден в таблипе,Формула изобретения Способ получения гиалуронсвсй кислоты, включающий обескровливание сырьяизмельчение, экстракцию водой, термообоаботку экстракта при 90 - 100 С в течение 1-2 мин и его.фильтрацию, с т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения качествацелевсго продукта и упрощения спсс.оба, в качестве сырья используютпетушиные гребни, после термосбработкч экстракциснную массу схлаждают до чС в течение 2-4 ч, отделяют липиды, массу Фильтоуюг, отделлют осадок сь 1 оья, а в ФильтратСрок хра- Содержаниекения белка, Й Способ Выход ГУК, Ек исходноймассе сырья 1,5-1,7 3,8-4,0 2-3 сут 2,5-2,7 0,4-0,5 Не менеег, Составитель О.Рокачевская Редактор Н.Киштулинец Техред М,Моргентал Корректор М.СамборскаяЗаказ 4094 Тираж 437 ПодписноеВНИИПИ .Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,301 5 16 ,вводят активированный уголь в количестве 1-27. от массы исходного сырья, перемешивают 1-2 ч, смесь фильтруют, полученный фильтрат смешивают с осад-, ком сырья и проводят двухстадийную ИзвестныйПредлагаемый 1 б 926 6экстракцню водой в течение 18-24 чпри 20-22 фС в присутствии пенициллина в количестве 0,05-0,073 от массыисходного сырья с последующей сушкойэкстракта.