Устройство для концентрирования биологических частиц
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
положительно, то буфер переносится от катода к аноду.Рассмотрим первый случай. Перенос буФера от анода , к катоду создает .в объеме 1 некоторое разряжение, которое приводит к переносу жидкости из емкости 7 в емкость 1 через труб ку 8 При этом отрицательно заряженные частицы (макромолекулы ДНК) дви жутся к аноду 5 и осаждаются на полупроницаемой (диализной) мембране 2 а жидкость проходит через пористую перегородку 3, электроосмотическую мембрану 4 и попадает в катодную емкость 6, После ,того, как весь концентрируемый раствор проходит через емкость 1, осуществляют кратковремен". ную (10-30 с) переполяризацию источника напряжения для переноса сконцент 0 рированного материала в раствор буфера, открывают зажим 9 и с помощью пипетки извлекают сконцентрированный образец. Затем. объем 1 промывают чистым буфером и концентрируют следующий 25образец.Очевидно, что для концентрирования положительно заряженных частиц необходимо поменять местами анод и катод (см, чертеж), а также использовать положительную заряженную электроосмотическую мембрану.Для того, цтобы исключить влияние. гидростатического давления жидкости, . электроосмотическая мембрана и электродные емкости располагаются горизон" тально и граница электродного буфера со стороны катода и анода в процессе концентрирования находится на одинаковом уровне, ПОристая .перегородка 3 40 предотвращает сдвиг электроосмотицес" кой мембраны 4 в сторону концентрирующей емкости 1. В качестве электроосмотической мембраны можно использовать различные гранулированные 4 гели, агар или агарозу с высоким эндоосмосбм, а также различные ионообменники, например ДЕАЕ-целлюлозу.П р и м е р. Концентрирование гена устойчивости к канамицину, Плазмиду рИСЙК гидролизуют рестриктазойВАв Н 1. При этом образуют два Фрагмента с молекулярным весом 1500 дальтон (ген устойчивости к канамицину) и 3000. дальтон, которые подвергают электрофоретическому разделению в 13-ном агарозном гелеПервый Фрагмент в количестве 3 г оказывается в объеме 3 мл. Концентри" рование этого Фрагмента осуществляют в ячейке прямоугольной формы (90 х 60 х х 9 мм), с концентрирующим Объемом порядка 300 мкл.В качестве электроосмотической мембраны используют гель 13-ной агарозы. При 30 В на электродах электро. осмотическая скорость 1 мл/ч, что позволяет за 3 ч пропустить через камеру исходный образец. После переполяризации источника йитания в течение 15 с сконцентрированный Фрагмент отбирают с помощью пипетки. Концентрация фрагмента в отобранном объеме (300 мкл) превышает исходную в 10 раз,Предлагаемое устройство имеет следующие преимущества по сравнению с прототипом: сокращается, не менее чем в 10 раз время, необходимое для концентрирования образца, снимается воп" рос об ограничении объема концентрируемой пробы, не менее цем в 5 раз возрастает степень концентрирования пробы, процесс поддается автоматизации и масштабированию (можно использовать несколько отдельных ячеек, соединенных с общей электроосмотической мембраной). Формула изобретенияУстройство для концентрирования биологических частиц, содержащее го-, ризонтально расположенную и заполненную буфером емкость, в которой размещены электродные камеры с электро;дами и камера-накопитель, отделенная от анодной электродной камеры вертикально расположенной диализной мембраной, о т л и ц а ю щ.е е с я тем, что, с целью повышения производительности, степени концентрирования и надежности, оно дополнительно содержит электроосмотическую мембрану, отделенную от камеры-накопителя пористой перегородкой, расположенной параллель- но Диализной мембране со стороны катодной камеры, причем уровень элект. родного буфера в анодной и катодной электродных камерах расположен на одном уровне.актор И,Касард Зака ВНИИП о роизводственно-иэдателвский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 10 1 Тираж 511сударственного комитета по изоб 113035, Москва, Ж, Ра Подписноетениям и открытиям при ГКНТ СССР ская наб., д. 4/5
СмотретьЗаявка
4380687, 18.02.1988
ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ПРИКЛАДНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ
ГАВРЮШКИН АЛЕКСАНДР ВЛАДИМИРОВИЧ, КРАМАРОВ ВЛАДИМИР МАТВЕЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 27/26
Метки: биологических, концентрирования, частиц
Опубликовано: 30.10.1990
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1603281-ustrojjstvo-dlya-koncentrirovaniya-biologicheskikh-chastic.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Устройство для концентрирования биологических частиц</a>
Предыдущий патент: Способ исследования апо-в-липопротеинов в сыворотке крови
Следующий патент: Способ определения палладия в технологических электролитах совмещенного активирования
Случайный патент: Шприц для выдавливания герметизирующих мастик