Способ гистохимического определения йода

) (11) 114 С 01 Ы 1 ТЕ СТВУ Гистохи ественОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОПИСАНИЕ ИЗ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТ(71) Иркутский государственный медицинский институт(54) СПОСОБ ГИСТОХИМИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЙОДА(57) Изобретение относится кмин. Цель изобретения - колич ное и локальноеОпределение связанного йода в тканях щитовидной железы, После депарафинирования срезы обрабатывают 0,4-0,5 М раствором гидросульфида натрия в диметилсульфоксиде приотемпературе 20-24 С. Проводят реакцию на сульфгидрильные группы, фотометрируют и по разности оптической плотности между исследуемым и контрольным препаратами определяют содержание связанного йода. Способ можно использо" вать при изучении изменений функции щитовидной железы при различных состояниях организма,1 табл.Изобретение относится к медицине,а именно к гистологии, и касается количественного определения содержанияйода в гистологических препаратах.Цель изобретения - количественноеопределение связанного йода в тканяхщитовидной железы.Способ осуществляют следующим образом. 10Для исследования в . та щитовиднаяжелезановорожденного ъ бенка, Еефиксируют в нейтральном ормалине.Время Фиксации 24 ч. Посл фиксациипрепарат промывают в проной воде в 15течение времени, равного в.мени Фиксации. Обезвоживают в спир.ах восходящей концентрации. Пропитывакт смесьюСпирт-хлороформ, Помещают в расплавенный,парафин на 30-45 мин, перено" 20сят во второй расплавленный парафинна 4-6 ч и заливают в формочки. Депарафинируют срезы. Инкубируют 30 минпри 20-24 С в 0,5 М растворе сульфитанатрия. Промывают в трех сменах дистиллированной воды по 3-5 мин в каядой. Промокают срезы фильтровальнойбумаги. Наносят на срезы 2-3 капли0,4-0,5 М раствора гидросульфида натрия в диметилсульфоксиде. Инкубируют 303-7 мин при 20-24 С под тягой, Остатки реактива стряхивают со стекла внасыщенный водный раствор сульфата ме-.ди, 11 ромывают срезы в семи сменах дистиллированной воды по 2-3 мин в каж"дой.Затем проводят выявление сульфгидрильных групп по известному ме 1 оду,Помещают стекла со срезами в бюксои заливают нагретым до 70 С раство"ром 2, 2-диокси, 6-динафтилдисульфида (ДДД) в ацетат-вероналовом буфере (рН 8,5), переносят бюкс со срезами в термостат 50"С и инкубируют60 мин,Охлаждают до комнатной температурыбыстро промывают в дистиллированноиводе и инкубируют в двух сменах дистиллированной воды, подкисленной ук"сусной кислотой до рН 4,0-4,5, по5 мин в каждойЭкстрагируют свободные нафтолы вспиртах восходящей концентрации и за"тем промывают в течение 1 О мин втрех порциях эфира,Помещают срезы в 70-градусныйспирт (2 мин), затем промывают в дистиллированной воде. Окрашивают в течение 2 мин прикомнатной температуре свежим раствором прочного синего,Промывают в проточной воде, Обезвоживают срезы в спиртах восходящейконцентрации, просветляют в двух сменах ксилола и заключают в канадскийбальзам. Фотометрируют контрольныйпрепарат (содержание сульфгидрильныхгрупп) и препарат, исследуемый на содержание йода (сульфгидрильные группы исходные с сульфгидрильными группами, эаместившими йод). По разностиоптических плотностей контрольного иисследуемого препаратов на содержание йода определяют содержание йодав условных единицах,В таблице приведены данные о содержании йода в структурах щитовиднойжелезы ребенка.Из таблицы видно, что предлагаемый способ позволяет количественноопределить содержание йода в различных структурах щитовидной железы.Предлагаемый способ в отличие от известных позволяет провести количественное определение йода в гистологическом препарате щитовидной железы и тем самым может быть использован при диагностике заболеваний щитовидной железы, при изучении ста.- новления ее Функции в онтогенезе, синтеза гормонов, патогенеза различ" ных заболеваний щитовидной железы, изменений ее Функций при различных состояниях организма, механизма влияния различных лекарственных веществ с целью коррекции ее Функций при раз личной патологии самого органа и организма в целомФормула и э о б р е т е н и яСпособ гистохимического определения йода, включающий приготовление парафинового среза, его депарафинирова ние, окрашивание, обезвоживание и заключение в канадский бальзам, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с це" лью количественного и локального определения связанного йода в тканях щитовидной железы, после депарафинирования срезы обрабатывают 0,4-0,5 М раствором гидросульфида натрия в диметилсульфоксиде в течение 3-7 минопри 20-24 С, проводят реакцко на сульфгидрильные группы, фотометрир1435993ют и по раэности оптической плотнос- препаратами определяют содержаниети между исследуемым и контрольным свяэанного йода. Еондентраднл тн 1одерна не Яод клетн траднн коллондаен Йод од гое о,) О 1564 006 2213 ззз ,ге) О,)ЕО 34 1913, 66 4679 В 2 3,21 О)1 О091 0,04 1595, 555 ,503,гао 0,605 121 0,20 0,23 12,5,0,364 0,264 О,0 130 0,256 1 34 5164+ 0 агоф 0,162+ 0,257+ Э 91, 17+ 0309+ 092+ О 3 е 1)07 е005,91 О,ОЭ 6 0,04 0,24 365,0 В 0,010 0,007 0,012 129 Составитель М.Поэн Техред И.Иоргентал Н. Тупица Корректор щек еда акаэ 5639 Тираж 847 По ВНИИПИ Государственного комитета СС по делам иэобретений и открытий 035, Москва, Ж, Раущская наб., д,29 Э ,267 ,323 о, гоо 0,)66 О, 16) 0,16 В О, 3190,012 Покере траенн соеднннтелв оЯ манн1 ЗНЯодз+