Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК А 504 С 01 М 33/ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТИЙ ОБРЕТЕНИЯ ЬСТВУ,2 мл, И,К,ендиамин 4 ударственный нто М рунь Н о моле сыворо меруло 5, т,е В 4, с. 70 73.(57) Изобретение относится к медиие,.касается лабораторной диагноски болезней почек. Цель изобретеПовшшение точности способа. Дляпорцию ацетонового .порошка тестроба растирают в ступке с водой,суспензии добавляют 1 мпреактиваприготовления полиакриламидного г(71) Калининский госмедицинский институт(56) Заварзина Т.М., ПетСодержание лизоцима и еглярных.разновидностей вкрови и моче больных глоритом. - Тер. архив, 197 дяная 17 М, И"тетраметилэтилэтил мл, вода до 100 мл), 1,5 мл реактива, содержащего акриламид 60 г, Я,И-метиленбис" акриламид 0,4 г, вода до 100 мл, и добавляют 4 мл реактива, содержащего персульфат аммония 0,28 г, вода до 100 мл. Смесь перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в ПАГ. После полимериэации на поверхность гелей наслаивают О, 15 мл свеже- взятой отцентрифугированной мочи, на нее наслаивают электродный буфер (рН 4,0, глицин 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл, вода), верхним электродом служит анод (+), а нижним катод (-) . Разделение проводят 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на трубку. Затем проводят инкубацив в термостате.1 ч при 37 С. Результат оценивают по расположению зоны лизиса-.ътест-микробов, соответствующей положе нию лизоцима в геле, При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит а при расположении полосы лизоцима в облас ти анода - пиелонефрит. 2 ил.Изобретение относится к медицине, в частности, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики болезней почек.Целью изобретения является повышение точности способа.На фиг. 1 и 2 схематически показано расположение мочи больных соответственно гломерулонефритом и пиелонефри О том после электрофореза в полиакоиламидном геле.Способ осуществляют следующим образом.10 мг ацетонового порошка тест-мик 15 роба растирают в ступке с 1 мл воды, к суспензии добавляют 1 мп реактива ф, 1,5 мл реактиваи 4 мл реактива6. Смесь. перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в 20 полиакриламидном геле (ПАГ).После полимеризации иа поверхность гелей наслаивают О, 15 мл свежевыпущеннай отцентрифугированной моче, на нее до края трубок наслаивают электродный буфер и 25 трубки помещают в аппарат, В сосуды аппарата заливают электродный буфер, верхним электродом служит анод (1.), а нижним катод (-). Разделение проводят в течение 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на трубку. После окончания электрофореза гели, не вынимая из трубок, помещают в сухие пробирки и инкубируют в термостате 1 ч при 37 С, после чего оценивают результат по расположению зоны лизиса тест-мик. робов, соответствующей положению лизоцима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при располо" 0 жении пооосы лизоцима в области ано.- да - пиелонефрит.Используют следующие реактивы.1. Реактивы для прйготовления ПАГ, рн 4,3:45а. Раствор 1 н. гидроксида калия 48 мл; уксусная кислота ледяная 17,2 мл; Я,В,Н ,В -тетраметилэтилендиамин 4 мп; вода до 100 мл. б.Акрнламил 60 г; В,Б -метнлен. бисакрнламнд 0,4 г; вода до 100 мл.6, Персульфат аммония 0,28 г; вода до 100 мл.2. Электродный буфер, рН 4,0: глицнн 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл; вода до 1000 ьш.3. Ацетоновый порошок тест-микроба.Перед использованием все реактивы разводят в 10 раз.П р и м е р 1Расположение лизоцима мочи больных гломерулонефритом после 2,5 ч электрофореза в 12 Х-ном полиакриламидном геле при рН геля 4,3 и рН электродного буфера 4,0.Зона лизиса тест-микробов, соответствующая положению лнзацима в геле, указана стрелкой (фиг. 1).П р и м е р 2. Расположение лизоцима мочи больных пиелонефритом после 2,5 ч электрофореза в 127,-ном полиакриламидном геле при рН геля 4,3 и рН электродного буфера 4,0.Зона лнзиса тест-микробов, соответствующая положению лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг, 2).Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность диагностики с 60-70 (известный способ) до 973.Формула изобретенияСпособ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита путем злектрофоретического исследования лизоцима мочи, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа, электрофорез проводят в полиакриламидном геле при значениях рН геля и электродного буфера менее 7,0 и прн расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит.1429031 Составитель Г. ЧуичТехред М,Дидык С. Пекарь Корректор В. Бутя ак аж 847рственного комитета зобретений и открыт Ж, Раушская наб. Заказ 5118/41 Тир ВНИИПИ Госуда по делам и 13035, Москва, дписноеСР д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4