Способ определения интенсивности дыхания дрожжей

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Ленинградский технологический институт им, Ленсовета(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНТЕНСИВНОСТИ ДЫХАНИЯ ДРОЖЖЕЙ 801401379 А 1(57) Изобретение относится к микробиологии и микробиологической промышленности, а именно к способам определения интенсивности дыхания микроорганизмов. Цель изобретения - повышение точности и расширение диапазона измерения. Способ заключается в том, что культуральная жидкость, попадая в открытую ячейку, оснащенную датчиком рОг, насыщается воздухом до постоянного уровня рОг (30 - 40% насыщения), после чего ее подают посредством перистальтического насоса по герметичному трубопроводу к измерительной ячейке. Интенсивность дыхания определяют по разности измеренных значений рОг в насыщающей и измерительной ячейках. 1 табл., 2 ил.ИзвестныйПредлагаемый 30 40 0)43+-ОфО 0 43+0 01 Изобретение относится к микробиологии и микробиологической промышленности, а именно к способам определения интенсивности дыхания микроорганизмов.Цель изобретения - повышение точ 5 ности и расширение диапазона измерения.Способ заключается в том, что культуральная жидкость пекарских дрожжей, попадая в открытую ячейку, оснащенную датчиком р 02, насыщается воздухом до постоянного уровня р 02 (30 - 40 насыщения), 10 после чего подаются посредством перистальтического насоса по герметичному трубопроводу к измерительной ячейке, а интенсивность дыхания определяют по разности измеренных значений рО в насыщающей и измерительной ячейках.На фиг. 1 изображена схема устройства для измерения интенсивности дыхания микроорганизмов; на фиг, 2 - диаграмма, поясняющая предлагаемый способ.20Жидкость из ферментатора 1 отбирают в насыщающую ячейку 2, где происходит обогащение отобранной жидкости кислородом до определенного уровня р 02, Уровень рО. устанавливают на уровне 30 - 40 о, когда дрожжи обладают максимальной физиологической активностью. Значение р 02 поддерживают постоянным изменением числа оборотов 3 по обратной связи Кь. = 1(п), и - число оборотов; Я = Кьа(С - С ), где Я - интенсивность дыхания, С - концентрация кислорода в газовои фазе, С - задаваеО 30 мый начальный уровень, 30 - 40 о" насыщения. После установления рОз пробу перистальтическим насосом 4, обеспечивающим пос-тоянную объемную скорость, подают в герметичный трубопровод и она проходит через измерительную ячейку 5, которая представ, ляет собой проточный датчик р 02. Длину 1 изолирующего трубопровода выбирают в со ответствии с расчетным временем изоляции: аСб=с"-с =Згде Я - объемный расход,Я - площадь сечения.Пробу после измерения возвращают вферментатор, что позволяет использоватьданную систему для аппаратов любого объема как в стерильных, так и в нестерильных условиях.Интенсивность дыхания определяют поразности уровня кислорода в проточном датчике и в насыщающей ячейке, отнесеннойк количеству биомассы:1 = =а,С - Сфт Сбгде С - концентрация 02 в насыщающейячейке;С - концентрация О в измерительнойячейке;т - время изоляции;Св - концентрация биомассы.Пример, Измерение интенсивности дыхания микроорганизмов.В ферментаторе объемом 15 л выращивают культуру Сапйда дц 11 егп 1 опс на водной питательной среде с н-парафинами вкачестве источника углерода. Аппарат снабжают турбоэжекционным перемешивающимустройством. Выращивание дрожжей проводят в периодических условиях культивирования в течение 48 ч при рН 4,2 и при 30 -32 С, а в качестве посевного материала используют взвесь дрожжей, полученную смывом твердой агаризованной среды, В процессе выращивания проводят определениеинтенсивности дыхания. Для этого культуральную жидкость перекачивают в открытую насыщающую ячейку, где уровень растворенного кислорода доводят до 40 - 30 о; насыщения (фиг. 2), определение проводятописанным образом.Результаты проведенных измерений приведены в таблице.1401379 Формула изобретения риг О О Составитель Л. БорисоваТехред И. Верее Корректор МТираж 847 Подписноего комитета СССР по делам изобретений и открытийква, Ж - 35, Раугнская наб., д. 4 5фическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная. 4 Редактор А. ВоровичЗаказ 2535/43ВНИИПИ Государственно3035, МосПроизводственно-полигра Максимишинец Сравнение двух способов показывает, что использовать известный способ для измерения интенсивности дыхания можно только в начале роста, когда уровень р 02 выше 20, так как при прохождении по ветвям малого и большого кругов уровень рОг снижается до 0 и зафиксировать ЛрОз не удается, кроме того, воспроизводимость показаний ЛрОз вблизи 0 очень низкая, о чем свидетельствует значительная ошибка измерений. 10Использование предлагаемого метода позволяет проводить определение, начиная с одной и той же исходной концентрации, при которой отмечается максимальная интенсивность дыхания и, кроме того, 15 Лр 02 в основном бывает выше 10%, что значительно снижает ошибку анализа и повышает воспроизводимость получаемых результатов. Способ определения интенсивности дыхания дрожжей Ьасс 1 агогпусев сегеЬ 181 а 1 в процессе культивирования, предусматривающий прокачивание культуральной жидкости с клетками через измерительную ячейку, снабженную датчиком уровня рОг и оценку результатов измерения, отличающийся тем, что с целью повышения точности и расширения диапазона измерения, культуральную жидкость предварительно подвергают насыгцению в открытой ячейке насыщения, снабженной датчиком уровня р 02, растворенным кислородом до концентрации, обеспечивающей содержание уровня рО. .в измерительной ячейке на уровне не ниже 3 - 5% от насыщения, а результат оценивают по разности измеренных значений рО. в насыщающей и измерительной ячейках.