Способ выявления аутоаллергического компонента при увеитах

ИСАНИЕ ИЗОБРЕТ но исследовательскии эней им. Гельмгольца й физики АН СССР . С. Зайцева, Ф, Шевченко, Ф. Краюшкина пато- лече 5,цине, иммуитах. СУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕПЬСТ(71) Московский научинститут глазных болеи Институт химическо(56) Экстракты сетчатки и гинериммуннык ним сыворотки.Ромашенков Ф. А., Семенов А. Д.и Тереньтьев А. А. Некоторые вопросыгенеза серозных хориоретинитов и ихние аргоновым лазером. - О. Ж., 1978,с. 333 - 336.(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АУТОАЛЛЕРГИЧЕСКОГО КОМПОНЕНТА ПРИУВЕИТАХ(57) Изобретение относится к медипредназначено в офтальмологии длянодиагностики аутоаллергии при уве,ЯО 13344 Цель изобретения - повышение точности диа гностики. Для этого перел постановкой реакции пассивной гемагглютинацни (РПГА) эритроцитов слезную жидкость инактивируют в водяной бане 30 мин при 56 С, затем абсорбируют бараньими эритроцитами 18 ч. РПГА эритроцнтов проводят в микротитраторе Таккачи. В качестве диагно.стикума используют 1 О-ную взвесь сенсибилизированных эритроцитов в обьеме 0,025 мл каждого разведения исследуемой слезной жидкости, начиная с 1:16. Определяют ткзне- специфические антитела к 5-антигену сетчат.ки в слезной жидкости. Анализ соотношения содержания Я-антител и клинических особенностей цвета показывает, что Я-антитела обнаруживаются в слезной жидкости больного глаза чаще, чем в сыворотке кро- Я ви больных увеитами. Это связано с активностью увеита н тяжестью поражения сет.чатки. При титре антител (1:64) - (1:128) делают вывод об активности аутоаллерги- ( ческого процесса при увеитах, 13344061 зобретецие относится к медицине, к офтальмологии, и црелнязначецо лля иммуцолиагпостики аутоаллергии при увеитах.1.елью изобретения является повьццецие точности диагностики.Способ осуществляется следующим образом.Забор слезной жидкости проволят с помощью мелацжера, перед постановкой реакции пассивной гемягглютинации эритроцитов (РПГЛ) слезную жидкость инактивируют в водяной бане в течение 30 мин при 56 С ц зятем абсорбируют бараньимц эритроцитами в течение 18 ч.еякпию пассивной гемагглютийации эритроцитов проводят в микротитраторе Таккячи по обпеприцятой методике; лиагцостикум используют в виле 1 %-цой взвеси сенсибилизировацгях эритропитов в объеме 0,025 мл ца 0,5 мл каждого разведеггйя исслелуемой слезной жилкости, начиная с 1:16.Приготовление стойкого эритроцитарного дцягцостцкума: 1/ в качестве сенситина используют 5.ацтцгец - очищенную от примесей волорастворимую фракцию белков наружных сегментов палочек (НСП) сетчатки, полученную из глаз крупного рогатого скота. НСП вылеля 1 от изсетчаток и очищают от примесей путем цескольких последовательных цецтрифугироваций в растворах сахарозы, солеркаших 0,1 М КС и буфер (0,05 М трис-НС 1, рН 7,4), Затем НСП полвергают осмотичсскому шоку в О-кратном объеме дистиллированной волы и центрцфугцругот при 100 000 л; цалосадочнуго жил,кость концентрируют диализом протигз 50% раствора полиэтиленгликоля (м, в.15 000). Полученный раствор, содержащиц волорастворцмую фракцию белков (1 мг/мл) НСП - 5 яцтцгец используют для сенсибилизапии эритроцитов; 2/ бараньи эритроциты, стабилизированные ацетатальлегидом по Чиец (в течение 20-сут) и тацизированцые в течение 15 миц при 37 С, сенсибилцзиругот 5-антигецом в дозе 68 мкг/мл в те.ение 60 мцц/рН среды 6,4; температура 45 - 48 С/; 3) сецсибилизироваццые эритроциты консервируют 0,3%-ным раствором, формалина.Вьсокая специфичность и чувствительность лцагностикума подтверждена в опытах исследования гиперцммуцных кроличьих сывороток (нарастание титров в процессе иммунизации от 0 до (1:512) - (1:16384), контрольных гетерологичцых сывороток (от кроликов, иммунизированных экстрактами увеальцой ткани и роговицы, титры - 0 -- 1:8) и сывороток от контрольных ицтактцыхживотных) полокцтельнь 1 х РПГА це наблюдалось).Анализ соотношения содержания 5.антител и клинических особенностей увеита показал, что 5-антителя обнаруживаются в слез.цой жидкости больного глаза чаще (р(0,01) и в значительно более высоких титрах.реакции кяк в перигл инлукпии увеита, таки в период нарастания дистрофизических 20 изменений в сетчатке. Наиболее вероятным 25 30 35 40 45 50 55(1=5,6), чем в сыворотке кропи больных увеитами. У здоровых лоцоров и больных каратитами и кяцъюктивитами 5-антитела в сыворотке и слезе практически цс выяв. ляются.Таким образом, наиболее информативными в плане вьявления аутоаллергических реакций при увеитах является исследования слезной жидкости,Частота обнаружения и уровень 5-антител в слезной жилкости достоверно связаны с активностью увеита и тяжестью поражения сетчатки. Повышение содержания 5-антител в слезной жидкости больного глаза выше (1:64) - (1:128) свидетельствует об активцости аутоаллергического процесса при Опрелеление антител предлагаемым методом позволяет выявить аутоаллергические периодом для выявления 5-антител в слезной жидкости являются первые 5 - 7 лией от начала обострения хронического увеита. У больных с подострым течением увеита, при нарастающем снижении остроты зрения и помутнении преломляюгцих сред, определение 5-антител може служить признаком аутоаллергического поражения сетчатки. Пример 1, Больная В, 3 лет. Диагноз: хронический репидивиру опий периферический увеит ОИ, предположительно гсрцетцческой (инфекпиоццо-яллерги кг кой) этиологии. Давцость заболевания 5 лст.Первое обслеловацие проведено в начале обостроеция хронического увеита, через 5 дней после выраженного усиления воспалительцых симптомов на ОИ. Объективно: ОД - прецишгтаты, мелкоточечцая запотелость эндотелия, взвесь в стекловилцом те. ле, глазное дцо за густым флером; ч)вцв=- =-.0,2 с корр. 0,50 - прс:пцпитятов больше, взвесь в стекловидном теле более грубая; глазное дцо за флером, авив= - 0,1 с корр. 0,3 - 0,4.Титры 5-антител в слезной жидкости ОД=1:512; 05=1:128. В сыворотке крови 5-антитела не обцаружецььВ соответствии с клицико.иммуцологическими показателями больной назначена гатогенетически направленная терапия, включающая гипосенсибилизирующие прецарать 1, преднизолои, ацгиопротекторы.При обследовании спустя 4 лня ца фоне лечения отмечено снижение титров 5-антител в слезной жидкости ОД ло 1:32 и 05 ло 1:8,Следующее обследование проведено через 6 месяцев в период стойкой ремиссии увеита на ОИ (на фоне поллеркивяюцгей кортикостероидцой терапии) . Объективно: ОИ; единичные старые отложения ця эцлотелии роговицы, несвежие (тцжистые) помутнения в стекловидном теле; глпзцг лцо,1 о.ступцо осмотру, видцы сер(гвдгые о(джк(1 с довольно четкими грацицами. В слезной жид. кости ОД 5-дцт ител д це пыя вл я(о 1 ся; в ОЯтитр 1:64. В сыворотке крови дцтитела це обцаружецы.Коцтрольиое иммуцологическое обследоваиие проведено через месяц при стойкой клинической ремиссии увеита ца ОИ. Титр 5-аитител в слезцой жидкости Г)Д=1:32, В слезной жцдк(исти Г(5 и в сыворотке крови 5-а цтител д це обц а руже(1 ы.Способ позволяет дидгцостцровдть рдзвитие аутоаллсргиФскогг 1 компоцецтд при увеитах. Точность диагцостцки новьп(дется в 2 раза, что позволяет спосвремеццо цд;(цд 1 ить пдт 11 ецет 1(чсски об(осп(1 вдццо( л( и и и и ул уч п 1 и ть с г(1 р;у,(ь( д(ыФ/Ь(1 г/Ла и;1(т/(/1( Г(гин. ( Спо об вь(явлецця дутодллергцческого компоцецтд цри увеитах путем определс. цця ткдцеспепцфцческих антител к дцтигецам сетчатки. отлича(о 4 цйси тем, что, с целью повышения точности способз, определецие дцтитсл осуаествля(от к 5 дцтигецу сетчатки в слезной жидкости и при титре антител вып(с (1:64) - (1:128) выявляют цд. лици", аутоаллергического кол(повея гд нри увеитах.Составитель Т. Крюкова Релактоп Т Г 1 илипеико Техред И. Верес Корректор Л. Ильин Заказ /(05/( Подписное 13 НИ П 14 осуларстпеиного коитета СССР по делах( изобретений н открытн(13035, Москва, Ж - 35, Раушска(1 иаб., д 4/5 11 роизпол твенно. поли графицеское предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4