Способ определения жизнеспособности мирацидиев трематод

(51) 4 А 61 В 10/00, А 01 К 67/00 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(71) Институт медицинской паразитологии и тропической медициныим. Е.И.Марциновского(56) Авторское свидетельство СССР У 550156, кл. А 61 В 10/00, 1975,Авторское свидетельство СССР В 1082402, кл. А 61 В 10/00, 1984. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБ-: НОСТИ МИРАЦИДИЕВ ТРЕМАТОД(57) Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии). Цель изобретения - повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев трематод, Вначале проводят обработку яиц 01 сгосое 11 цв 1 апсеайцв стимулирующим раствором, состоящим из смеси бутанола и 0,1-0,5 Е-ного водного раствора хлорида натрия (или 0,05- 0,4 Е-ного водного раствора хлорида калия) в соотношении (5-7):(93-95). После этого яйца инкубируют при 27- 38 С в течение 1-5 мин. Перед микроскопированием полученный субстрат выдерживают 1,5-2 ч на предметном стекле, периодически добавляя в него 0,5-1,57-ный водный раствор бутанола. Сочетание указанных приемов приводит к открыванию крышечки у яиц и выходу мирацидиев именно у данного вида трематод, Эффективность способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 857 1 з.п.ф-лы.1327882 2 5 10 15 20 25 3035 45 50 55 Изобретение относится к областимедицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии), а именно кспособам определения жизнеспособности мирацидиев трематод патогенныхдля человека и хозяйственно полезных животныхЦель изобретения - повышение точности определения жизнеспособностимирацидиев,П р и м е р 1. Предварительноосуществляют приготовление среды иводного раствора бутанола.Среду готовят иэ 5 ч, бутанола и95 ч, 0,5%-ного раствора НаС 1, приготовленного на дистиллированнойводе. Приготавливают 1,5%-ный раствор бутанола на дистиллированной воде, Среда и раствор могут храниться3 сут,Определение жизнеспособности мира-;цидиев.Одну каплю взвеси яиц гельминтав воде вносят пипеткой в центрифужную пробирку, Пробирка со взвесьюдолжна содержать 100-500 яиц (меньшее их число может повлиять на репрезентативность результатов, а большеезатрудняет подсчет). Пробирка становится в штатив на 1-2 мин для того,чтобы яйца опустились на дно, Полоской фильтровальной бумаги осторожноотсасывают воду и пастеровской пипеткой в пробирку с подсушенными такимобразом яйцами добавляют 0,1 млсреды и инкубируют на водяной банеопри 27 С 5 мин, Затем пробирку встряхивают и содержимое пипеткой переносят на предметное стекло и оставляют на 1,5-2 ч при комнатной температуре (18-22 С), через каждые 25-35мин (по мере подсыхания капли) добавляя 0,05 мп 1,5%-ного растворабутанола,Препарат просматривают под обычным световым микроскопом при 100- 200-кратном увеличении. Перечисленные операции занимают 2-2,5 ч.П р и м е р 2. Приготовление среды и раствора,Среду готовят из 7 ч, бутанола и 93 ч. 0,1%-ного раствора МаС 1, приготовленного на дистиллированной воде, Раствор готовят из 0,5 ч. бутанола и 99,5 ч, дистиллированной воды, Определение жизнеспособности мирацидиев проводят как в примере 1, но пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 35 С 2 мин,П р и м е р 3. Приготовление среды и раствораСреду готовят из б ч, бутанола и94 ч. 0,3%-ного раствора йаС 1, приготовленного на дистиллированной воде, Раствор готовят из 1 ч, бутанолаи 99 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мирацидиевпроводят как в примерах 1 и 2, нопробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 38 С 1 мин,1П р и м е р 4, Приготовление среды и раствора.Среду готовят из б ч. бутанола и94 ч, 0,4%-ного раствора КС 1, приготовленного на дистиллированной воде, Раствор готовят из 0,8 ч. бутанола и 99,2 ч, дистиллированной воды.Определение жизнеспособности мирацидиев проводят как в примерах 1,2 и 3,но пробирку со взвесью яиц в средеинкубируют при 30 С 3 мин,Испытание метода проводили на яйцах дикроцелиумов (О 1 сгосое 1 цщ 1 апсеайцв), полученных из гельминтов Ъ желчи спонтанно инвазированных овец из очагов дикроцелиоза в Курской .области и Молдавской ССР. Полученные таким образом яйца гельминтов различное время (от нескольких недель до 6 мес) содержались в воде при 5-10 С,Эффективность предлагаемого способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 85%. Ф о р м у л а и з обретения 1 Способ определения жизнеспособности мирацидиев трематод, включающий обработку яиц стимулирующим раствором с последующим микроскопированием и подсчетом мирацидиев, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, после обработки яиц стимулирующим раствором проводят инкубирование яиц при 27-38 С в течение 1-5 мин, а перед микроскопированием полученный субстрат выдерживают при комнатной температуре на предметном стекле в течение 1,5-2 ч, при этом периодически через 25-35 мин добавляют в него 0,5-1,5%- ный раствор бутанола в дистиллирован-.з 13278824 ной воде, при этом в качестве стимули. Способ по п,1, о т л и ч а юрующего раствора используют смесь, щ и й с я тем, что концентрация содержащую бутанол и водный раствор водных растворов хлоридов натрия и хлоридов натрия или калия в соотно- калия составляет соответственно О,1- шенин (5-7):(93-95), 0,5 Ж и 0,05-0,4 Е.Составитель Е.ДмитриченкоРедактор Е,Папп Техред М,Ходанич Корректор С.ЧерниЗаказ 3417/4 Тираж 595 Подписное. ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4