Способ диагностики сердечной недостаточности

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 69 Н 33 ЕНИЯ ук ТарГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ПИСАНИЕ ИЗ ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СЕРДЕЧНОЙНЕДОСТАТОЧНОСТИ(57) Изобретение относится к медицине, точнее к кардиологии. Цель изобретения - определение сердечной недостаточности на доклинической стадии. Для этого пробирку с хлорнойкислотой и пробой крови (в соотношении 3:1) центрифугируют при 5-7 С 2025 мин при 5000 об/мин. Надосадоксливают в другую емкость и нейтрализуют 467-ным раствором едкого калиядо рН 6,5. Затем центрифугируют20 мин при 3000 об/мин. В полученномнадосадке (экстракт) определяют пируват и оксалоацетат. Затем определяютотношение пируват - оксалоацетат.Благодаря дополнительному определению уровня оксалоацетата в крови иотношения пируват - оксалоацетат,указывающего на начальные измененияэнергетического обмена в тканях припоказателях 2,1-2,6, предлагаемыйспособ позволяет диагностировать сердечную недостаточность на доклинических стадиях его развития.табл.1 3Изобретение относится к медицине,а именно к кардиологии.Целью изобретения является определение сердечной недостаточности надоклинической стадии.Способ осуществляют следующим образом.В центрифужную пробирку к 9,0 мл6%-ного раствора охлажденной хлорнойкислоты добавляют 3,0 мл крови (соотношение хлорной кислоты и крови 3:1).Центрифужную пробирку с пробкой центрифугируют .при 5-7 С в течение 2025 мин при 5000 об/мин. Надосадочнуюжидкость сливают в другую емкость инейтрализуют 4 б -ным раствором едкого калия до рН 6,5 и оставляют дополного выпадания осадка (КС 10) прио2-4 С. Затем центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость (экстракт)отбирают в пробирку для определенияв ней пирувата и оксалоацетата.Для определения количества пирува 1та в кювету 1,0 см спектрофотометра(СФ) наливают 1,0 мл полученногоэкстракта,1,0 мл трис-буфера (рН 7,6),1,0 мл дистиллированной воды иОэ 015 мл восстановитель никотинамидадениндинуклеотида (НАДН) (3,3 10 Мраствор). В такую же кювету с контрольным раствором, содержащим 1,0 млуказанного буфера, приливают дистиллированной воды до объема 3,015 мл,После измерения оптической плотностиобоих растворов (Е ) при 340 нм добавляют в обе кюветы 0,01 мл лактатдегидрогеназы (ЛДГ). Через 5 минвновь измеряют оптическую плотностьрастворов в обеих кюветах (Е, ),По этой же схеме определяют в экстракте количество оксалоацетата, длячего используют 1,5 мл экстракта,1,47 мл трис-буфера (рН 7,6) и 0,02 мл .НАДН (2,210 М раствор). В контрольную кювету наливают 1,47 мл трис-буфера и.1,52 мл дистиллированной воды.Для осуществления ферментативной реакции после измерения Е добавляютв обе кюветы по 0,01 мл малатдегидрогеназы (МДГ), измеряют Е,Расчет концентрации пирувата и оксалоацетата проводят по Формуле ЬЕ В Чобт 22 экстрактагде А - концентрация определяемого субстрата;40 Изменения фазовой структуры левогожелудочка характеризуют умеренновыраженный синдром гиподинамии, что является показателем нарушения сократи тельной функции сердца и подтверждаетналичие скрытой стадии сердечной недостаточности. П р и м е р 2. Больной, 40 лет,50 находился на стационарном лечении впульмонологическом отделении по поводу хронического диффузного бронхита,ДН 0-.1, без клинически выраженныхпризнаков сердечной недостаточности.55 Исследования КонтрольПируват,мкмоль/л 53,Оксалоацетат,мкмоль/л 72,9 123, 1+3,5 86,03,9 14269 2ЛЕ - абсолютная величина разностипоказаний спектрофотометрадо начала реакции (Ео) и через 15 мин после начала реак 5 ции (Е,) .В - разведение, численно равноеколичеству миллилитров нейтрализованного экстракта;об - общий объг инкубированной10 среды в кюьете;т/- объем перхлорного экстрактамстртав кювете;6,22 - коэффициент малярной экстинкции НАДН при 340 нм.П р и м е р 1. Больной Г., 37 лет,находился в стационарном лечении впульмонологическом,отделении по пово- .ду хронического бронхита, в фазе ремиссии, ДН 0-1 ст,Клинических при иаков сердечнойнедостаточности не выявлено.Исследование КонтрольПируват,мкмоль/л 155,9 123,1125Оксалоацетат,мкмоль/л 59,9 86,0Отношение пируват - оксалоацетат2,62 (норма 1,43), Выявлено понижение количества оксалоацетата приумеренном увеличении содержания пирувата.Данные хронокардиографии левогожелудочка сердца указывают на некоторое удлинение Фазы напряжения (0,10 с35 при,цолжной величине 0,084 с), изотермического сокращения (0,04 с при должной 0,029 с), укорочение фазы изгнайия1314269 П р и м е р. Больной, 38 лет, ацетата, отношения пируват - оксалонаходился на стационарном лечении в ацетат приведены в таблице.пульмонологическом отделении по поводу хронического диффузного бронхита, Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я ДН 0-1 ст, без клинических признаков 30 сердечной недостаточности. Способ диагностики сердечной неИсследования Контроль достаточности, включающий определение Пируват, содержания пирувата в крови, о т л имкмоль/л 143,4 123,13,5 ч а ю щ и й с я тем, что, с целью Оксалоаце-. 35 определения сердечной недостаточностат,мкмоль/л ,62,3 86,7+3,9 ти на доклинической стадии, дополни- Отношение пируват - оксалоацетат тельно определяют содержание в крови 2,3 (контроль 1,4+0,1).оксалоацетата и при отношении первого показателя к второму 2,1-2,6 диагПолученное увеличение коэффициен ностируют доклиническую стадию серта пируват - оксалоацетат обусловле- . дечной недостаточности. Группы больных Числоболь- ных ируват Оксалоацетат Пируват, окса- лоацетат Контрольнаягруппа (норма) 30 123,13,5 86,0+3,9 1,4+О,Доклиническаястадия СН178 165,0+4,6 71,6+2,0Л,2,3+0,1+Достоверность разницы по отношению к контролю при рс 0,05,ВНИИПИ Заказ 2208/46 Тираж 777 Подписное Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Отношение пируват - оксалоацетат 2,1 (контроль ,4+0,1) свидетельст-. вующее о снижении оксалоацетата при умеренном увеличении содержания пиру- вата, определяет величину коэффициента пируват - оксалоацетат, что указывает на снижение энергообразования при ранней доклинической стадии сердечной недостаточности., При хронокардиографии левого желу-О дочка выявлено некоторое удлинение фазы напряжения (0,12 с при должной 0,085 с) и изометрического сокращения (0,05 с при должной 0,03 с), укорочение фазы изгнания (0,22 с при долж ной 0,25 с). В условиях велоэргометрической пробы констатировано удлинение времени восстановления фазовых периодов до 15 мин. Приведенные изменения фазовой структуры левого желу дочка указывают на нарушение сократительной функции миокарда, начальные признаки скрытой доклинической стадии сердечной недостаточности,но снижением количества оксалоацетата при умеренном увеличении пирувата.По данным хронокардиографии левого желудочка выявлено удлинение фазы напряжения (0,13 с нри должной 0,083 с), изометрического сокращения (0,04 с при должной 0,03 с), укорочение фазы изгнания (0,20 с при должной 0,23 с), что свидетельствует о снижении сократи- тельной функции миокарда. При выполнении пробы с физической нагрузкой получено удлинение времени вбсстановления фазовых показателей до 18 мин, что подтверждает наличие доклинической стадии сердечной недостаточности.Благодаря дополнительному определению уровня оксалоацетата в крови и отношения пируват - оксалоацетат, что указывает на начальные изменения энергетического обмена в тканях, предолагаемый способ позволяет диагностировать сердечную недостаточность на доклинических стадиях ее развития.Среднестатистическиепоказатели содержания в крови пирувата и оксало