Способ дифференциальной диагностики вяло текущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита

(56) Холмого глобулинов у ческой лнхор лергическим ладов научногов Литовскос.51-52. ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ ИОТКРЫТИЙ Бюл. У 6медицинскими институт огомольцак и Е.И.Митченко 088;8)ова Г.Т. Уровень иммунобольных острой ревматидкой и инфекционно-алмиокардитом, Тезисы докконференции ревматолоССР, Вильнюс, 1979, .(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГН ТИКИ ВЯЛОТЕКУЩЕГО РЕВМАТИЗМА И ИНФ ЦИОННО-АЛЛЕРГИЧЕСКОГО МИОКАРДИТА (57) Изобретение относится к ревмато 1 логии. С целью повышения точности, дифференциальной диагностикой в пери. ферической крови определяют Т-, В-, О- и Э-лимфоциты, а также антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность и уровень иммунных комплексов. При увеличении О-лимфоцитов и уровня иммунных комплексов и при снижении Т-лимфоцитов и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности относительно нормы диагностируют вялотекущий ревматизм. Отсутствие таких изменений позволяет диагностировать инфекционно-аллергический миокардит.1 12894Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано в клинической практике при дифференциальной диагностике вялотекущего ревматизма и инфекционноаллергического миокардита.Целью изобретения является повышение точности способа.Способ осуществляется следующим образом. 10Содержание Т-, В-, О- и Р-лимфоцитов в периферической крови определяют методом двойного розеткообразования с зимозаном. Для этого из периферической венозной гепаринизированной крови выделяют лимфоциты в градиенте плотности Фиколл-верографина. В силиконированную пробирку с суспензией лимфоцитов (2 х 10 лимф/мл) ввсреде 199 добавляют 0,57-ную взвесь эритроцитов барана и 0,173-ную взвесь комплекса зимозан-комплемент. Затем последовательно смесь инкубируют при +37 С, осаждают центрифугированием, вновь инкубируют при +12 С, фиксируют глютаральдегидом и готовят мазок из тщательно ресуспензированного осадка с последующей его фиксацией в мети- ловом спирте и окраской метиловым зеленым по Браше. Т-лимфоциты определяют как Е-розеткообразующие клетки, В - как клетки, фиксировавшие на своей поверхности окрашенныйкомплекс зизимозанкомплемент, 0-лимфоциты - как клетки, не имеющие рецепторов ни к 35 эритроцитам барана, ни к комплементу, а Э-лимфоциты, как двойные розетки, т.е, несущие на своей поверхности рецепторы как к эритроцитам барана, так и к комплексу зимозан-комплемент. 40Циркулирующие в крови иммунные комплексы определяют реакцией преципитации с 3,753-ным полиэтиленгликолем, мол.вес,=6000. Для этого к предварительно растворенной в боратном . 45 буфере (0,01 М) сыворотке добавляют растворенный в этом же буфере полиэтиленгликоль, Затем инкубируют при комнатной температуре и сопоставляют с контрольным разведением сыворотки 50 без полиэтиленгликоля спектрофотометрическим методом при длине волны 450 нм. Антителозависимую клеточно-опосре 55 дованную цитотоксичность определяли спектрофотометрическим методом, Для этого из периферической гепаринизированной крови выделяют лимфоциты в59,8-65,0 11,8-14,2 21,9-25,70,7-1,0 симая клеточно-опосредованная цитотоксичность,18Содержание иммунных комплексов, усл.ед.0,075 25-30 0)03-0,045 Полученные данные подтверждают наличие иммунной перестройки организма по типу развития иммунокомплексного поражения и свидетельствует о том, что больной страдет ревматизмом, Учитывая непродолжительный характер заболевания (3 мес, от начала заболевания), отсутствие данных, свидетельствующих об органическом поражении сердца и наличии характерных иммунологических сдвигов, больному бып поставлен диагноз: ревматизм, активная фаза, 1-й степени активности, первичный ревмокардит с преимуще 97 2градиенте плотности фиколл-верограФина. В качестве клеток-мишеней используют эритроциты барабана, дона- тором антител для определения цито- токсичности служила стандартная кроличья антисыворотка в титре, превышающем агглютинирующий, т.е. 1/1280, чтобы предотвратить агглютинацию клеток-мишеней. Инкубацию клеток-эффекторов с клетками-мишенями проводят в соотношении 10:1 при +37 С в течении 18 ч. Цитотоксическую активность определяют по изменению оптической плотности супернатанта на спектрофотометре СФА при длине волны 450 нм.П р и м е р 1. Больной Ю., 16 лет, поступил в стационар с жалобами на периодические ноющие боли в области сердца, сердцебиение при физической нагрузке, слабость, общее недомогание. Данные объективного обследования не свидетельствовали с достаточной достоверностью в пользу вялотекущего ревматизма или инфекционного миокардита.Больной был обследован, получены следующие результаты:Содержаниелимфоцитов Нормальноев крови больного,7Т В О - 370-1Антителозави1289497 Нормальное содержание 59,8-65,0 11,8-14,2 21,9-25,7 0,7-1,0 Т - 59В 0-21Д Антителозависи 30,мая клеточно-опосредованная цитотоксичность Нормальноесодержание25-30 35 Составитель Г.КрюковаРедактор А.Долинич Техред В.Кадар Корректор В.Бутяга Заказ 7837/6 Тираж 617 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5Производственно-полиграфическое предприятие,г.Ужгород,ул,Проектная,4 ственным поражением миокарда, ХНК 1, Больному был проведен полный курс противоревматической терапии, больной был взят на диспансерное наблюдение, В последующем при длительном наблюдении были выявлены признаки формирования ревматического поражения клапанного аппарата сердца.П.р и м е р 2. Больной Г., 23 лет, поступил в стационар с жалобами на 10 ноющиеболи в области сердца, одышку при физической нагрузке, сердцебиение. Заболевание началось остро после перенесенного 2,5 мес. тому назад простудного заболевания. 15Данные объективного обследования не давали достаточно достоверных данных в пользу ревматизма или инфекционно-аллергического миокардита. После иммунологического обследования 20 были получены следующие результаты:Содержание лимфоцитов в кровибольного,%25 30Содержание иммунных комплексов,усл.ед., 0,045 0,030-0,045 Предположение о том, что у больного инфекционно-аллергический мио кардит, нашло свое подтверждение в развитии клинической картины и в благоприятном исходе после назначенного патогенетического лечения. Дальнейшее наблюдение за больным подтвер дило предположение о неревматической природе заболевания. Обследовано 140 больных. У 132 больных был уточнен диагноз с использованием предлагаемого способа, что составило 94,37 случаев. В остальных 8 случаях, соответственно в 5,77 случаев, очевидно имели место различные варианты клинической гипердиагностикиПо сравнению с прототипом предлагаемыйспособ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита обеспечивает высокую точность, так как устраняется возможная однонаправленность иммунологических сдвигов, представляется возможно раняя диагностика первичного ревмокардита и вялотекущего ревматизма с преимущественным поражением миокарда, повышается точность дифференциальной диагностики на 38,37, что позволяет правильно назначить патогенетическую терапию и предотвратить дальнейшее прогрессирование заболевания, а значит, сократить сроки пребывания больного в стационаре и улучшить дальнейший прогноз. Формула изобретенияСпособ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита путем исследования крови, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в исследуемой крови определяют количество Т и О лимфоцитов, антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность, уровень иммунных комплексов, сравнивают с нормой и по снижению Т, увеличению О-лимфоцитов, снижению антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности и увеличению уровня иммунных комплексов, диагностируют вяло текущий ревматизм, а по отсутствию таких изменений - инфекционно-аллергический миокардит.