Способ определения полупериода агрегации эритроцитов

ОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН я)4 С 01 И 33/4 ГО ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ НИ цем в микрокювету, промытую гепарином и высушенную. Штуцер закрываютмикропробкой и с помощью электрического разъема подсоединяют к стандарному источнику питания пьезоэлементи стандартной измерительной аппаратуре. Микрокювету устанавливают горизонтально, свет подают вертикально инсти- омском зеркала микроскопа через типовоинденсатор, пробу крови, оптическустему микроскопа на фотоэлемент. Амплитуду и частоту механических колебаний пьезоэлемента, необходимые для полной дезагрегации, задают выходным напряжением и частотой источника питания. Амплитуда 0,1-1,0 мкм, частота 1,0-20 кГц, Механическое воздействие перпендикулярно к поверх ности исследуемой пробы..скоси ю Б ОПРЕДЕЛЕНИЯЭРИТРОЦИТОВетение относиа именно к фии применение ОЛУПЕРИОДАя к области ологии, игематологии етения - повьппи способа. Исслтягивают через ние чувстедуемую про штуцер шпри АРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Научно-исследовательскитут биологии и биофизики пригосударственном университете(54) СПОСО АГРЕГАЦИИ (57) Изобр медицины, может найт Цель изобр вительност бу крови в 1262376 АИзобретение относится к медицине, а именно к физиологии (гематологии),Цель изобретения - повышение чувствительности способа за счет того, что дезагрегацию осуществляют пьезоэлементом, работающим в звуковом диапазоне частот.Способ осуществляют следующим образом.Исследуемую пробу (капиллярной, венозной, артериальной) крови втягивают шприцем через штуцера в специальную кювету, предварительно промытую гепарином (приготовленным из расчета 500 ед, на 10 мл крови) и высушенную. Штуцера закрывают микропробками, с помощью электрического разьема подсоединяют к стандартному источнику питания пьезоэлемента и стандартной измерительной аппаратуре. Микрокювету устанавливают горизонтально на предметном столике биологического микроскопа, Свет подают в вертикальном направлении с зеркала микроскопа через типовой конденсатор, исследуемую пробу крови, оптическую систему микроскопа на фотоэлемент и Фото/кинокамеру. Выходным напряжением и частотой источника питания задают амплитуду и частоту механических колебаний пьезоэлемента и жестко с ним связанной стенки кюветы необходимые для полной дезагрегации Включают источник питания и разрушения проводят механическими колебаниями с амплитудой 0,1-1,0 мкм и частотой 10 - 20,0 кГц, при этом механическое воздействие направлено перпендикулярно к поверхности исследуемой пробы. Изменения оптической плотности исследуемой пробы крови, связанные с обратимой агрегацией эритроцитов, преобразуются в электрический сигнал Фотоэлементом, усиливаются усилителем и регистрируются на бумажную лентусамописцем. Степень дезагрегации контролируют в процессе перемешиванпя Фотометрированием и микроскопированием. После достижения полной дезагрегации, соответствующей максимальнойоптической плотности исследуемой крови, выключают питание пьезоэлемента и (по изменению оптической плотности) регистрируют процесс спонтанной агрегации эритроцитов, Полупериод агрегации эритроцитов вычисляют на основании результатов измерений Фото- метрической кривой, регистрируемой самописцем, 11 олупериод агрегации - время, в течение которого амплитуда фотометрического сигнала изменяется на 50(полная амплитуда определяет ся от момента прекращения перемешивания при достижении полной дезагрегации эритроцитов - максимальная оптическая плотность, до выхода Фотометрической кривой на плато, соответствующее полной агрегации эритроцитов - минимальная оптическая плотность исследуемой пробы крови),Способ позволяет повысить точностьисследования, так как величина полупериода агрегации эритроцитов, характеризующего кинетику агрегацииэритроцитов, зависит от степени ихдезагрегации,П р и м е р . Механическое воздей 20 ствие на исслудемые пробы крови человека, собаки, кошки, крысы, мыши осуществляют с амплитудой порядка 0,1 мкми,соответственно, частотами 1,0 и20,0 кГц. 0 неполной дезагрегацииэритроцитов свидетельствуют малаяамплитуда фотометрического сигналаи наличие характерного пика на фторметрической кривой в момент прекращения перемешивания. Далее проводят30 механическое воздействие при оптимальных значениях частоты и амплитудыколебаний для эритроцитов крови мыши- 13,0 кГц, Ад =0,5 мкм), О полной дезагрегации эритроцитов свидеЗ 5 тельствует отсутствие характерногопика в момент прекращения перемешивания, а также более высокая амплитудасигналатой же самой пробы крови. Отличаются и численные значения полупериода агрегации, определенные наосновании обсчета Фотометрическихкривых,40,0; 105,0 и 70,0 с соответственно,45 Применение предлагаемого способа,на основании анализа меньшей дозыкрови (0,005 мл вместо 0,01 мл согласно известному способу), позволяетповысить чувствительность измерений 50 в чраз.Формула изобретенияСпособ определения полупериода 55 агрегации эритроцитов путем механического разрушения агрегатов эритроцитов с последующим определением оптической плотности исследуемой пробы крови,Составитель И. ПознякТехред Л.Олейник Редактор О. Бугир Корректор М. Максимишинец Заказ 5420/4 Тирах 778 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо. делам изобретений и открытий113035, Москва, Жс 35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 12 б 2376 4о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с 1,0 мкм и частотой 1,0 - 20,0 кГц,целью повышения чувствительности спо- при зтом механическое воздействиесоба, разрушение проводят механичес- направлено перпещикулярно к поверхкими колебаниями с амплитудсй 0,1 - ности исследуемой пробы.