Способ диагностики мастита у коров

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН д 60103 И КОМИТЕТ СССРТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ Т ТЕЛЬСТВ Л.В ф фЫ К- й -(56) 1. Погоняйло Д,И., БогдановЭлектрофоретическое изучение наслственных вариантов белков молокасельскохозяйственных животныхв Белоруссии,Я -лактоглобулины и(54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МАСТИТА У КОРОВ, включающий отбор проб молока и их последующий анализ, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности; анализ проб моло ка проводят путем нанесения на крахмальный гель и последующей разгонки белков молока в геле при рН электролитической среды 8,6, силе тока 120 мА, напряжении 180-200 В, а о на личии мастита судят по появлению и интенсивности окрашивания-фракции белков молока с электрофоретичес11589 Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам диагностики мастита у коров.Известен способ определения состава белков молока путем их электрофоретического разделения, включающий отбор молока, приготовление крахмаль. ного геля, нанесение пробы молока на гелевую пластинку, разгонку белков молока в переменном электрическом 10 поле, окраску и промывку геля 11,Однако данный способ не используется для диагностики маститов у коров.Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики маститов у коров, основанный на изменении(физико-химических свойств молока у больных коров и включающий использование маститного индикатора, содер-щ жащего растворимые в дистиллированной воде химические вещества 2 .Однако этот способ не позволяет точно диагностировать маститы у коровЦелью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается тем, что анализ проб молока проводят путем нанесения на крахмальный гель и последующей разгонки белков молока в геле при рН электролитической среды 8,6, силе тока 120 мА напряжении 180- 200 В, а о наличии мастита судят по появлению и интенсивности окрашивания -фракции белков молока с элект 35 рофоретической подвижностью 4.4 Х х 10 см 2 В" с" .На фиг. 1 представлена электрофореграмма белков молока; на фиг, 2электрофоретическая подвижность белковых фракций молока при рН=8,6,П р и м е р. От каждой коровы в конце дойки доярка берет в пробирку 1-2 мл молока из каждой четверти вымени.Затем готовят гель из 14,57 взвеси гидролизованного крахмала в трисцитратном буфере, заваривают крахмал в широкогорлой колбе, с помощью вакуум-насоса из горячего геля удаляют 29 2пузырьки воздуха. Формирование пластины геля и электрофорез проводят в плексиглазовой ванночке размером 130 х 200 хб мм,После разливки геля в ванночки его накрывают стеклом и сверху кладут груз в. 1-2 кг. Время созревания геля составляет 3-4 ч.На каждую ванночку наносят на хроматографических бумажках размером 7 хб мм одновременно 24 образца молока, затем пластинку накрывают полиэтиленовой пленкой. Электролит наливают в гнезда размером 235 х 80 х х 75 мм. Электрофорез длится 2,5 ч при силе тока 120 мА, После завершения разгонки гелевую пластинку разрезают вдоль на 2 части, нумеруют и окрашивают в 1 Е-ном растворе нигрозина, затем промывают.Картина фореграммы белков молока из больной и здоровой четвертей выме ни одной и той же коровы не совпадает (фиг. 1). В нормальном молоке выявляются следующие типы белков (от -к +):к-Сп,Я =Сп, Я-Ь 8, 1.8, -Сп (образцы 1,2,4). При скрытом мастите на фореграмме между к-Сп и Я-Сп появляется четко выраженная белковая фракция (К-фракция, образец 3). Кроме того, Ы, -Сп-фракция становится более растянутой. При скрытом мастите -фракция просматривается на любой стадии лактации. По четкости и интенсивности ее окрашивания можно судить о степени заболевания маститом.Электрофоретическая подвижность фракции, связанной с маститом, определяется путем измерения координаты этой фракции на фотографии и с помощью графика, приведенного на фиг. 2. Значение электрофоретической подвижности данной Фракции сос 5 2 - ф тавляет 4,4 10 см В сПо сравнению с известными способами предложенный дает возможность надежно выявить наличие фракции, связанной с заболеванием при количественной оценке электрофоретической подвижности этой фракции.1158929 р 10 сибопьв сек2 г,2,Составитель И,Тареевадактор С.Тимонина Техред С.Йовжий КорректоР А Зимоко Заказ 3579/44ВНИИПИ М Патент", г.Ужгород, ул.Проектна Тираж 897Государственного коо делам изобретенийква, Ж, Раушская Подписномитета СССРи открытийнаб., д. 4/5