Способ определения потенциальной активности денитрификации почвы

,8011 Б 33 24 ЗС 59 митет ссср ий и ОТКРьпи судА ственный пО делАм иэОБРетен(56) 1. ЯшСЬ М. БсоСС, Р 1 гезСопе Магу К., Тейе Юашез М., ТЬе асеСу 1 епе пЬЬСхоп шеСЬоб ог зЬогССегш шеазцгешепС о 7 зо 11 йепхСг 1- ИсаС 1 оп апй 1 Сз еча 1 цаСТоп цзхпй пСгоЯеп-"Яо 11 Яс 1, Яос. Ашег.д,", 1978, ч. 42, 9 , 611-615.2. К 1 ешеЫззоп Ь., Ячепззоп В,Н Ьз.пйЬегЯ Т., Воззча 11 Т, ТЬе цзе о 1 асеСу 1 епе дпЬЬСоп оГ п 1 Сгопз оххйе гейцсСазе 1 п ЧцапС 1 йу 1 п 8 бепСг 1- ГдсаС 1 оп дц зо 11.-"Ячей.1,АБг.Вез.", 1977 ч. 7, Р 4, 179-185 (прототип), (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОТЕН ЦИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ДЕНИТРИФИКАЦИИ ПОЧВЫ путем затопления пробы почвы раствором глюкозы, вакуумирования, промывки ее гелием с последующим инкубированием в затопленном состоянии при встряхивании, введения впробу ацетилена с последующим инкубированием и встряхиванием, газохроматограического анализа закисиазота в пробе и определения активности денитрийикации почвы по содержанию закиси азота, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения точности, снижение трудоемкости и ускорения способа, затопление пробы осуществляют 0,8 - 1,2 зным водным раствором глюкозы до достижения высоты столба раствора глюкозы над пробой 1,3-1,7 см, инкубирование промытой гелием пробы проводятв течение 22 - 24 ч, после введения Яв пробу ацетилена встряхивание осуществляют в течение 60 - 90 с, затем инкубируют в течение 1,5 - 2 ч, ф фа непосредственно перед газохрома- (тогращическим анализом закиси азотапробу повторно встряхивают в тече- Яние 60 - 90 с.Изобретение относится к сельско-му хозяйству, в частности почвенноймикробиологии, к способам оценкибиологической активности почв.Известен способ определения денитрифицирующей активности почвы путем инкубирования пробы почвы в атмосфере аргона или гелия после добавления к ней нитратного азота, обработки пробы ацетиленом для кнгибирования редуктазы закиси азота,вследствие чего процесс восстановления нитратов на стадии образования закиси азота прерывается, определения количества образовавшегосяв присутствии ацетилена ИО и определения денитрифицирующей активности по скорости накопления последней 1.Недостатками способа являются неВоэможность применения его для изуЧения динамики активности денитрификацкк в условиях агробиоцинозов,так как способ предполагает предварительное восстановление находящихся в почве нитратов, а также длительность и невысокая точность анализа.Известен также способ определения потенциальной активности денктрификации почвы путем затопленияпробы почвы раствором глюкозы, вакуумирования, промывки ее гелием споследующим инкубированием в затопленном состоянии прк встряхквании,введения в пробу ацетилена с последующим инкубированием к встряхиванк"ем, газохроматографического анализазакиси азота в пробе и определенияактивности денитрификации почвы посодержанию закиск азота, Встряхиванке осуществляют на роторной качалке 2 7,Недостатками известного способаявляются невозможность обнаружениямаксимально высокой денитрифицирующей активности почвы, длительностьи трудоемкость анализа, и недостаточная точность вследствие того, чтоусловия инкубации не обеспечиваютдолжной степени анаэробиозиса.Цель изобретения - увеличениеточности, снижение трудоемкости иускорение способа,Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу затопление пробы осуществляют 0,8 - 1,2 ным раствором глюкозы до достижениявысоты столба раствора глюкозы надпробой 1,3 - 1,7 см, инкубированиепромытой гелием пробы проводят в течение 22 - 24 ч, после введения в 5 10 20 25 ЗО 35 4 О 45 ЦД 55 пробу ацетилена встряхивание осуществляют в течение 60 - 90 с, затем кнкубкруют в течение 1,5 - 2,0 ч, а непосредственно перед гаэохроматографическим анализом закиси азота пробу повторно встряхивают в течение 60 - 90 с.П р и м е о 1. Навески различных почв (5 г 1 помещают в пенициллиновые Флаконы 115 мл 1, добавляют 0,8;-ного раствора глюкозы в таком количестве, что высота его столба над образцом почвы составляет 1,3 см. Затем Флаконы вакуумируют, промывают гелием и инкубируют в затопленном состоянии 22 ч при 26 С, после чего вводят 2 мл ацетилена и взбалтывают образцы 60 с. В атмосфере ацетилена почву инкубируют 1,5 ч при 26 С, затем повторно взбалтывают образцы в течение 60 с и начинают анализ атмосферы Флаконов на газовом хроматографе.П р и м е р 2, Навески почв 5 г помещают в пенициллиновые Флаконы (15 мл), добавляют 1,2 о-ного раствора глюкозы в таком количестве, что высота его столба над образцом почвы составляет 1,7 см. Затем флаконы вакуумкруют, промывают гелием и инкубируют в затопленном состоянии 24 ч при 30 С, после чего вводят 2 мл ацетилена и взбалтывают образцы 90 с. В атмосфере ацетилена почву инкубируют 2 ч при ЗООС, затем повторно взбалтывают в течение 90 с и начинают газохроматографический анализ.П р к м е р 3. Навески почв (5 г) помещают в пенициллиновые Флаконы 15 мл ), добавляют 10-ного раствора глюкозы в таком количестве, что высота его столба над образцом почвы составляет 1,5 см. Затем Флаконы вакуумируют, промывают гелием и инкубируют в затопленном состоянии 23 ч при 28 С, затем вводят 2 мл ацетилена и взбалтывают образцы 75 с, Почву кнкубкруют в атмосфере ацетилена 1 ч 45 мин при 28 С, после чего образцы повторно взбалтывают в течение 75 с и начинают анализ газовых проб на хроматографе.П р и м е р 4. Для сравнения предлагаемого и известного способов проводят анализы различных образцов почвы обоимк методами, Для определенкя КдО используют хроматограф ОННОМ.Полученные величины потенциальной активности денитрификации различных почв по примерам 1 - 4 представлены в таблице.117529 10мг/азота/кг почвы/ч по примерам Почва Известный Предлагаемыйспособ способ Дерновоподзолистая 46,3 ф 2,4 47,2 ф 2,0 45,91,9 34,2+4,1 37,3 ф 4,7 63,7+3,6 65,0+3,9 66,04,0 64,4+3,5 63,8+4,1 64,5+4,2 67,9+3,9 65,6+3,2 30,1 ф 3,8 66,2+3,1 35,1+1,6 35,2+1,2 33,9+0,9 51,1+ 2,7 49,52,9 53,3+3,4 48,2+3,0 46,5+2,1 46,8+2,7 29,5+3,5 28,114,1 26,01,7 44,9+ 6,3 46,013,5 Чернозем 45 г 32 с 8 36,2+4,2 31,6 ф 1,9 52,21, 9 50,2+2,1 50,7 ф 2,4 42,8 ф 2,2 44,7+1, 7 42,0 ф 1,6 50,1+1,9 48,2 ф 1,8 46,9 ф 2,6 49,7 2,5 50,21,5 51,42,1 Серозем 33,6+2,3 Составитель Л.РубиноваРедактор Н.Бобкова Техред О.Иеце Корректор А.Тяско Заказ 7211/28 Тираж 822 Подписное ВНИИЛИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,Из результатов приведенных в таблице следует, что предлагаемый способ обеспечивает более высокую точность в сравнении с известным. Так, доверительный интервал для величины активности денитрификации по из вестному способу 1,7 - 4,7 х 10мг азота/кг почвы/ч, а по предлагаемому 0,9 - 2,4 х 10мг азота/кг почвы/ч.Кроме того, абсолютные величины активности денитрификации, полученные 4 О предлагаемым способом, выме по сравнению с известным, Это указывает на то, что предлагаемый способ действительно выявляет предельно возможнуюденитрифицирующую способность различных почв. Кроме того, предлагаемый способ устраняет ряд трудоемких операций восстановление эндогенных нитратов, создание надежной герметичности при встряхивании на роторной качалке ), что значительно упрощает способ и сокращает время определения.