Способ определения действия антибиотика на микроорганизмы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН С 12 О 1/04 СССР РЫТ ОБРЕТЕНИ ДЕТЕЛЬСТ(71) Оренбургский государственныймедицинский институт(56) 1. Справочник по микробиологческому и вирусологическим методамисследования. Под ред. М,О. БиргерМ "Медицина", 1982, с. 180-181.2. Навашин С.М., Фомина И.П.Справочник по антибиотикам. М.,(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕЙСТВИЯ АНТИБИОТИКА НА МИКРООРГАНИЗМЫпутем инкубирования исследуемыхмикроорганизмов в питательной среГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И О ПИСАНИЕ АВТОРСНОМУ СВ де с различными концентрациями антибиотика и выявлением минимальнойбактериостатической концентрацииантибиотика, о т л и ч а ю щ и й -с я тем, что, с целью повышения точности определения действия антибиотика на внутриклеточно паразитирую-щие патогенные микроорганизмы, дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию антибиотика, параллельно высевают исследуемый материал из проб с суббактериостатической концентрацией антибиоти.ка и контрольной на питательную.среду, содержащую 1-25 мкг/мл лизоцима, инкубируют посевы и определяют действие антибиотика по величине снижения концентрации лиэоцимав среде с суббактериостатическойконцентрацией антибиотика по сравнению с контролем.1097678 П р и м е р 1. У больного И., 2 мес.,иэ клеток слущенного эпителия был выделен внутриклеточно паразитирующий возбудитель (салмонелла), Методом серийных разведений опреде.лили чувствительность к антибиотику - гентамицину в концентрации 10 мкг/мл. После этого определили суббактериостатическую концентрацию гентамицина - 5 мкг/мл, Подготовили два ряда чашек с агаровой средой, в которую ввели лизоцим в концентрациях 1-25 мкг/мл., причем каждая чашка отличалась от последующей на 1 мкг/мл. На чашки первого ряда посеяли салмонеллы из контрольной порции, на чашки второго ряда - салмонеллы из порций е суббактериостатической концентрацией антибиотика .(5 мкг/мл). Чашки инкубировали в термостате 24 ч, выросшие из них колонии возбудителя убили парами хлороформа, затем залили питательной средой с индикаторным штаммом М 1 сгососсцз 1 узоде 1 И 1 сиз. Инкубировали повторно в течение 24 ч, после чего определили наибольшие концентрации лизоцима, инактивированного салмонеллами в контроле и опыте, В контСпособ осуществляют следующимобразом,Определяют минимальную бактериостатическую концентрацию антибиотика для исследуемого возбудителя,для чего готовят в пробирках методом серийных разведений антибиотик вконцентрациях 100-0,01 мкг/мл. Го 55товят контрольную пробирку с бульоном без антибиотика. В ряд опытных пробирок и контрольную засеваютисследуемый возбудитель, Инкубируют Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается определения чувствительности патогенных микроорганизмов к антибиотикам,Известен способ определения дей ствия антибиотика на микроорганизмы с помощью дисков, пропитанных раствором антибиотика1 3.Известен также способ определения действия антибиотика на микроорганизмы путем инкубироваиия исследуемых микроорганизмов в питательной среде с различными концентрациями антибиотика и выявлением минимальной бактериостатической концентрации15 антибиотика 2 3.Однако известные способы не обеспечивают высокой точности определения действия антибиотика на внутри- клеточно паразитирующие патогенные микроорганизмы.Целью изобретения является повышение точности определения действия антибиотика на внутриклеточно паразитирующие патогенные микроорганизмы.Зта цель достигается тем, что согласно способу определения действия антибиотика на микроорганизмы путем инкубирования исследуемых микроорганизмов в питательной среде с различными концентрациями антибиотика и выявлением минимальной бактериостатической концентрации антибиотика, дополнительно определяют суббактериостатическую концент- З 5 рацию антибиотика, параллельно высевают исследуемый материал из проб с суббактериостатической концентрацией антибиотика и контрольной на питательную среду, содержащую 1- 40 25 мкг/мл лизоцима, инкубируют посевы и определяют действие антибиотика по величине снижения концентрации лизоцима в среде с суббактериостатической концентрацией анти биотика по сравнению с контролем. в течение 18-24 ч, после чего определяют минимальную бактериостатическую концентрацию антибиотика. Дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию антибиотика, затем производят посев возбудителя .из порции с суббактериостатической концентрацией и из контрольной порции на ряд сред, содержащих лизоцим в концентрациях 125 мкг/мл. На чашки первого рядавысевают исследуемую культуру возбудителя из контрольной пробирки(без антибиотика), На чашки второгоряда высевают исследуемую культуруиз опытной пробирки (с антИбиотиком). Все чашки инкубируют в термостате 18-24 ч, после чего выросшиена чашках колонии возбудителя убивают парами хлороформа и заливаютпитательной средой с индикаторнымштаммом Мхсгососсцз 1 узоде 11 хсцз,После 18-24 ч инкубации определяютнаибольшую концентрацию лизоцима,инактивированного возбудителем вконтроле и опыте. Сравнивают этипоказатели друг с другом и при снижении концентрации на 20-807 оценивают антибиотик как эффективный.1097678 25 П р и м е р 6. У больной Е,вьделена щигелла. Проверка по методу серийных разведений (см, пример 1) показала чувствительность возбудителя к ампициллину. Проверка активности предлагаемым способом показала, что концентрация инактивированного лизоцима в контроле составила 18 мкг/мл, в опыте 4 мкг/мл. Снижение составило 80%, .что подтвердило активность ампициллина по отношео к возбудителю. Лечение оказалось эффективным.Всего обследовано 214 больных салмоцеллезом, дизентерией, гонореей, при этом вьделено 88 штаммов возбудителей устойчивых к антибиотикам по методу серийных разведений, При проверке предлагаемым способом только 60% этих штаммов оказались устойчивыми, а в 40% случаев антибиотики оценены как эффективные.Использование предлагаемого спо- соба повышает точность оценки на 40%. Г. Смирноваьма Корректор А, Тяско Тираж 522 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Заказ 4152/24 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 роле определили 6 мкг/мл, в опыте6 мкг/мл. Изменений в концецтрациилизоцима не произошло. Антибиотикоценен как цеэффективньп.Клинически подтверждено, что гентамицин в этом случае оказался неэффективным. У больного на протяжении длительного времени сохранялсячастый жидкий стул с примесью зелении слизи до 10-11 раз в сутки,10П р и м е р 2. У больного А.,17 лет, из биоптата выделен внутриклеточно паразитирующий возбудитель(шигелла), Проведецнаятаким же образом, как в примере 1, проверкадействия антибиотика - тетрациклинана возбудитель по методу серийныхразведений показала его нечувствительность, Параллельно была проведена оценка действия антибиотикапредлагаемым способом,Величина концентрации ицактивированного лизоцима в контроле составила 8 мкг/мл, в опыте 5 мкг/мл.Снижение составило 38%, что позволило оценить тетрациклиц эффективным. Оценка подтверждена клинически,Больной, выписан здоровым через18 дней после начала лечения,П р и м е р 3. У больцоц К., 3026 лет, из лейкоцитов гнойного отделяемого уретры был выделен внутриклеточно паразитирующий возбудитель - гонококк, который па методусерийных разведений оказался чувст- Звительным к бициллицу (методика примера 1). У больной аблодалось затяжное течение заболевая. Проверка действия бициллина предлагаемымспособом показала, что концентрация 40инактивированного лизоцима в контроле составила 4 мкг/мл, в опыте6 мкг/мл. Так как наблюдалось увеличение, а не снижение концентрациилизоцима, антибиотик бициллин в этом 4случае оценен как неэффективный.Назначен другой антибиотик,П р и м е р 4. У больного. Н.,25 лет, была выделена шигелла. Проверка по методу серийных разведений 0СоставительРедактор Л. Веселовская Техред М,Куз(см. пример 1) показала чувствитель"ность возбудителя к левомицетицу.Проверка предлагаемым способом показала, что концентрация ицактнвированцого лиэоцима в контроле составляла 9 мкг/мл, а опыте 8 мкг/мл.Снижение составило 11%. Антибиотикоценен как неэффективный, что подтверждено клинически. Больной находился ца лечении около 4 мес.П р и м е р 5. У больного М11 лет была выделена салмонелла.Согласно прототипу антибиотик гецтамициц активен по отношению к салмоцелле, Оценка активности антибиотика по предлагаемому способу(см. пример 1) показала концентрациюицактивированного лизоцима в контроле 8 мкг/мл, в опыте 6 лкг/мл. Снижение составило 25%, Антибиотик оцеиен как эффективный. После началалечения гецтамицином у больного нормализовался стул на 4 день. Больнойвыписан здоровым через 16 дней пос;ле начала лечения,
СмотретьЗаявка
3567658, 22.03.1983
ОРЕНБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ
БУХАРИН ОЛЕГ ВАЛЕРЬЕВИЧ, УСВЯЦОВ БОРИС ЯКОВЛЕВИЧ, ЛОСИН ЕВГЕНИЙ ИОСИФОВИЧ, МАЛЫШКИН АЛЕКСАНДР ПЕТРОВИЧ, НЕМЦЕВА НАТАЛИЯ ВЯЧЕСЛАВОВНА, СИДОРОВ ВИТАЛИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, ПЕРВУШИНА ЛИЛИЯ АЛЕКСЕЕВНА, ФЕДОСЕЕВА КЛАРА ЕВДОКИМОВНА
МПК / Метки
МПК: C12Q 1/04
Метки: антибиотика, действия, микроорганизмы
Опубликовано: 15.06.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1097678-sposob-opredeleniya-dejjstviya-antibiotika-na-mikroorganizmy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения действия антибиотика на микроорганизмы</a>
Предыдущий патент: Штамм дрожжей 3912
Следующий патент: Засыпной аппарат доменной печи
Случайный патент: Анодный узел высоковольтного ртутного выпрямителя