Способ прогнозирования привычного невынашивания беременности

(54) (57) СПОСО ПРИВЫЧНОГО Н РЕМЕННОСТИ пу та эндометрия, о целью повышения тате определяют В и по его налич ное невынашивани М. Демидовано-исследовател ья матери и ре кии нка Биопсия эндометс. 9,34,46. ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(21) 3413867/ (22) 29.03.82 (46) 30.03.84. (72) В. А, Бу (71) Всесоюз центр по охра (53) 615.375( (56) 1. Топчие М Медицин Бюл.рлев и Е ный науч не здоро 088,8) ва О. И. а, 1978,Б ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЕВЫНАШИВАНИЯ БЕ- тем исследования биоптатличающийся тем, что, с точности способа, в биопантиген вируса гепатита ию прогнозируют привыче беременности.Изобретение относится к медицине и может быть использовано при прогнозированииневынашивания беременности и последую- щей этиологически обусловленной терапии.Известен способ прогнозирования привычного невынашивания беременности, заключающийся в исследовании срезов биоптата эндометрия в проходящем свете послепредварительного специального окрашивания путем визуального наблюдения сохранения структуры эндометрия .1 оОднако известный способ недостаточноточен, поскольку позволяет обнаруживатьизменения гистологической структуры ткани, т.е. идентифицировать нарушения, связанные с развитием клеточных структурэндометрия или его перерождением. Данный способ не позволяет выявлять изменения, связанные с внутриклеточными повреждениями, а именно определять повреждениеэндометрия, вызванное репликацией вируса. 20Цель изобретения - повышение точностипрогнозирования привычного невынашивания беременности.Указанная цель достигается тем, чтопри осуществлении способа исследуют биоптат эндометрия, в биоптате определяют антиген вируса гепатита В и по его наличиюпрогнозируют привычное невынаши ваннебеременности,Способ осуществляют следующим образом.зоДля диагностики поражения эндометрияполучают его биоптат, путем взятия цугаэндометрия хаммеровской кюреткой с передней стенки матки на 21-24 день цикла, После взятия цуга эндометрия его 10-15 разотмывают в 70 мл физиологического раствора и гомогенизируют. Исследуемые экстракты центрифугируют при 8-10 тыс. об/минв течение 15-30 мин.Определение поверхностного антигенагепатита В в гомогенате ткани эндометрияпроводят с использованием радиоиммуноло Огического метода. Для этого в пробиркудобавляют 0,2 мл исследуемой пробы гомогената ткани эндометрия и погружают внего полистирольный шарик диаметром6 мм, имеющий на своей поверхности высокоаффинные антитела к поверхностномуантигену гепатита В. Параллельно с исследуемым образцом (образцами) в ряд пробирок добавляют контрольную сыворотку,не содержащую поверхностный антигенгепатита В, и контрольную сыворотку, содержащую поверхностный антиген гепатита В в концентрации 20+ 5 нг/мл (положительный контроль), К положительными отрицательным контролям так же вносят полистирольные шарики с антителами к поверхностному антигену гепатита В. Все образцы:исследуемая проба, отрицательные и положительные контроли инкубируют при 4-8 С,в течение 18-20 ч, После инукбации шарики тщательно отмывают дистиллированной водой, а по окончании их отмывания погружают в равный объем (0,2 мл) раствора специфических антител к поверхностному антигену гепатита В, меченых радиоизотопом йода 125 с активностью 0,05 - 0,1 мКюри на пробу. Вновь инкубируют при 3 С в течение 60-120 мин, после чего шарики тщательно промывают дистиллированной водой и. регистрируют их радиоактивность радиометрически. Учет результатов начинают с анализа радиоактивности контрольных отрицательных и положительных образ. цов, исходя из того, что результаты положительного контроля указывают на предел чувствительности реакции, а превышение радиоактивности исследуемой пробы более чем в 2,1 раза над контрольными отрицательными образцами свидетельствует о наличии положительного результата реакции- наличие поверхностного антигена гепатита В в исследуемой пробе, Для повышения до. - стоверности результатов радиоиммунологического метода используют параллельное определение нескольких образцов (не менее 3) одной пробы гомогената эндометрия и контрольных сывороток.Пример 1, Больная К, 26 лет. В анамнезе два самопроизвольных выкидыша в сроке 9-10 недель беременности. Группа крови 0(1), резус-отрицательная. Муж 31 год, группа крови 0(1), резус-положительная. Антирезусных антител в сыворотке крови у больной не обнаружено. Менструальная функция с 12 лет, регулярная. Ректальная температура двухфазная, При гистеросальпингографии трубы проходимы, При гистологическом исследовании соскоба эндометрия на 24 день цикла - фаза секреции, патологических изменений не обнаружено. Для диагностики поражения эндометрия получат его биоптат путем взятия цуга эндометрия хаммеровской кюреткой с передней стенки матки на 24 день цикла. После взятия цуга эндометрия его 15 раз отмывали в 70 мл физиологического раствора и гомогенезировали. Исследуемые экстракты центрифугуют при 8-10 тыс. об/мин в течение 20 мин. В супернатанте определяют поверхностный антиген гепатита В с помощью высокочувствительного метода - радиоиммунологического метода. В гомогенате эндометрия обнаружен поверхностный антиген гепатита В, Антиген гепатита В не обнаружен при исследовании сыворотки крови радиоиммунологическим методом. На основании проведенного исследования установлен диагноз: привычное невынашивание беременности, поражение эндометрия вирусом гепатита В.Пример 2. Больная Ш., 27 лет. В анамнезе три самопроизвольных выкидыша в сроки 8-14 недель беременности, которые1082421 Составитель Г. Крюкова Редактор А, Мотыль Техред И. Верес Корректор О. Тигор Заказ 1604/4 Тираж 688 Подписное ВНИИ ПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 13035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4возникали вследствие хорионамнионита. Группа крови А(11), резус-положительная. Антирезусных антител в сыворотке крови у больной не обнаружено. Менструальная функция с лет-;-регулярная. Ректальная температура двухфазная, По тестам функциональной диагностики .патологии не выявлено. Больная сохраняла предыдущие беременности в стационарах, однако без терапевтического эффекта. Учитывая, что больные, страдающие привычным невынашиванием беременности, относятся к группе повышенного риска заражения вирусом гепатита В, предпринято дополнительное обследование, включившее определение поверхностного антигена гепатита В в сыворотке крови и в гомогенате ткани эндометрия. В сыворотке крови поверхностный антиген гепатита В не обнаружен. При гистологическом исследовании соскоба эндометрия на 22 день менструального цикла - фаза- секреции, патологических изменений не обнаружено. Анализ гистологической картины эндометрия у больной не позволил диагностировать его изменений, что создало небходимость применения предлагаемого способа. В результате установлено наличие поверхностного антигена гепатита В в эндометрии. Принимая во внимание, что поверхностный антиген гепатита В не обнаруживается у женщин с неизмененной репродуктивной функцией, сделано заключение о неблагоприятном прогнозе состояния привычного невынашивания беременности,Выяснение этиологического фактора, связанного с поражением эндометрия вирусом гепатита В, позволяет проводить реабилитационные и лечебные мероприятия, направленные на ликвидацию вируса в эндометрии, тем самым проводить целенаправленное лечение этого вида патологии репродуктивной системы.Под наблюдением находились 42 женщины, страдающие привычным невынашиванием беременности. В гомогенате биоптататкани эндометрия поверхностный антигенгепатита В обнаружен у 8 женщин. В одномслучае наблюдалась лимфоцитарная инфильтрация ткани эндометрия, котораялишь косвенно указывала на возможностьвоспалительного процесса в эндометрии,но без учета его специфики. У остальных7 женщин патологического процесса в эндометрии гистологическим методом обнаружить не удалось.Применение предлагаемого способа позволило у 8 женщин (100%) установитьвирусную природу привычного невынашива 20 ния беременности. В то же время по гистологическому методу изменения в эндометрии обнаружены только в одном (12,5/,) случае.Таким образом, предлагаемый способповышает достоверность способа прогнози 25рования привычного невынашивания беременности, обусловленного поражением эндометрия на 87,5/о,Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет осуществлять прогнозирование привычного невына шива ниябеременности, снизить перинатальную смертность плода, а также способствует своевременному применению этиопатогенетическихметодов лечения.