Способ определения котарнина хлорида

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и 972404 а(61) Дополнительное к авт, саид-ву(23) Приоритет оо делом кзобретенкй и отхрцткХ:543,544 (088.8),(72) Авторы изобретения А, А. Хабаров, Л. П. Хабарова и С. И, Вайстух:- .фр;. ,т г;т 009 гр,1,;фКурский государственный медицинский институт ИБДк;у,(71) Заявитель(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОТАРНИНА ХЛОРИДА1Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам качественного и количественного определениякотарнина хлорида в лекарственных формах и биологических жидкостях,Известен полярографический способопределения котарнина в таблетках, анодом служит выносной насьпценный каломельный электрод 11 )Однако чувствительность указанногоспособа составляет 40 мкг/ мл,Наиболее близким к предлагаемомуспособу является фотометрическое определение котарнина хлорнда путем взаимодействия пробы с органическим реагентомоснованное на взаимодействии бромталлиевой кислоты с котарнином хлорида с добавлением бриллиантового зеленого иэкстрагированием бензолом с последуюшим фотометрированием 21Недостатком известного способа является малочувствительность, что не позволяет его использовать для определенияв биологических жидкостях. 2Пель изобретения - повышение чувствительности способа,Поставленная пель достигается тем,что согласно способу определения котарнина хлорида путем взаимодействия пробыс органическим реагентом с последуюшимфотометрированием полученного окрашенного комплекса, пробу анализируемоговещества обрабатывают ледяной уксуснойкислотой и по интенсивности флуоресценоции полученного раствора определяют концентрацию котарнина хлорида. В основе способа определения лежитреакция взаимодействия котарнинв хлоридас ледяной уксусной кислотой с последующей регистрацией интенсивности флуоресценции полученного при этом раствора.Спектр возбуждения флуоресценции лежит от 320 до 440 нм с максимумом зо370 нм, спектр излучения флуоресценпии -от 430 до 600 нм с максимумом 510 нм.Линейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и концентрациейФ ормул а изобретения Способ определения котарнина хлорида путем взаимодействия пробы с органическим реагентом с последуюшим фотометрированием полученного окрашенногокомплекса, о т л и . а ю ш и й с ятем, что, с целью повышения чувствительности способа, пробу анализируемоговещества обрабатывают ледяной уксуснойкислотой и по интенсивности флуоресценции полученного раствора определяютконцентрацию котарнина хлорида.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Пуканов Ю.В Брутко Л,И, Поляро -графическое определение котарнина хлорида в таблетках. Фармация, 1975,с. 6, 77-792, Олешко Г.И Кудынов Г.И. Экстракционно-фотометрическое определение папаверина гидрохлорида, котарнина хлорида и димедрола, - Химфарм", 1970,% 8, с. 41-44 (прототип). Составитель Т,ЖуравкинаТехред Е,Харитончик Корректор М. Демчик Редактор С, Крупенпна Заказ 8507/35 Тираж 887 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 з 9724когарцица клорида лежит от 0,1 до 50мкгl мл.П р и м е р 1. Качественное определение котарпца хлорида.К 1-2 мг порошка или мелкораздробленцой таблетки прибавляют 2-3 мл ледяной уксусной кислоты, встряхивакгги в ультрафиолетовом свете со светофильтром УФСнаблюдают желто-зеленуюфлуоресценцию, оП р и м е р 2. Количественное определение котарнина хлорида в таблеткахпо 0,05 г.Точную навеску (0,05 г) мелкоизмельченцой таблетки помешшог в мерную 15колбу емкостью 100 мл, прибавлякг1 0 мл дистиллированной воды, энергичновстряхивают 10 мин. Затем концентрированной уксусной кислотой доводят до метки и перемешивают, К 2 мл данного раствора прибавлякгг 8 мл концентрированнойуксусной кислоты, перемешивакг, измерякг интенсивность флуоресценции полученного расгвора., Содержание котарнинахлорида рассчитывают, по калибровочному 25графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 1,02,0; 3,0; 4,0 и 5,0 млстандартного раствора котарнина хлоридав концентрированной уксусной кислоте ссодержанием 100 мкг/мл, доводят кон- Зоцентрированной, уксусной кислотой до10 мл, перемешивают, флуориметрируютодновременно с растворами исследуемыхобразцов, По результатам этих измерений строят калибровочный график,35П р и м е р 3, Определение котарнина хлорида в крови и моче (искусственн ая с месь) .К 1 мл плазмы крови или мочи, содержаших 50 мкг котарнина хлорида,прибавляют 5 мл фосфатного буферногораствора с рН 9-10, 10 ,изоамилового спирта, перемешивают в течение5 мин, центрифугируют при 5 000 об/минв течение 5 мин. Изоамиловый спирт пере 45носят в выпарительную чашку, экстрагирование повторякг, выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прилившог10 мл концентрированной уксусной кис 04 4лоты, флуориметрирукгг одновременно со стандартным раствором котарнина хлорида с содержанием 1,0; 5,0; 10,0;20,0 в концентрированной уксусной кис,поте,Установлено, что интенсивность флуоресценции ксгарнина хлорида в ледяной уксусной кислоте не изменяется в течение 2 ч.Использование предлагаемого способа позволяет без отделения от сопутствую ших ингредиентов проводить количественное определение котарнина хлорида в лекарственном препарате, что выгодно отличает его от ранее известного, а высокая чувствительность и избирательность предлагаемого способа позволяет использовать его для количественного определения котарнина хлорида в биологических жидкостях, так как он в 50 раз чувствительнее известного, что дает возможность эффективно использовать его при биофармацевтических исследованиях.