Способ дифференциальной диагностики амилоидоза

(71) Заявитель й Московский ордена Ленина и ордена Трудового КрасногЗнамени медицинский институт им, И, М. Сеченова ДИффЕРЕНЦИАЛЬНОЙ АМИЛОИДОЗА(54) СП НОСТИК уществляют следующим оЬИзобретение относится к медицине, аименно клинической иммунологии,Известен способ дифференциальнойдиагностики амилоидоза от других почечных патологий путем исследования тканейорганизма1Однако известный способ травматичен,требует длительных исследований до 710 дней и малоинформативен, что снижаетточность : .диагностики. 1 ОБелью изобретения является снижениетравматичности и ускорение способа.Эта цель достигается тем, что приосуществлении способа дифференциальнойдиагностики амилоидоза от других почечных патологий путем исследования тканейорганизма, у пациента берут кровь 1 выделяют лейкоциты, далее проводят реакциюторможения миграции лейкоцитов с амилоидной фибриллой, выделенной из труппго материала, и при значении индекса миграции от 80 до 0% диагностируют амилоидоэ. Спо"об осразом.Взятую из вены гепаринизированную кровь больного в количестве 5-6 мл при ,отемпературе 37 С отстаивают в термостате в стерильной пробирке 50 мин под углом в 45 и 5 мин - в вертикальном положении, Полученную плазму больного отсасывают в дентрифужную пробирку и в течение 10 мин центрифугируют при 1000 об/мин для получения лейковэвеси. Полученный осадок трижды промывают в среде для культивирования клеток. Отмытую лейковэвесь больного насасывают в стеклянные капилляры диаметром 0,6- 0,7 мм, свободный конец капилляра запаивают в пламени горелки и дентрифугируют 5 мин при 1000 об/мнн. Концы капилляров, содержащие клетки, нарезают на кусочки длиной 5-6 мм и немедленно погружают в камеры, заполненные средой 199 (контроль) и с добавлением вмилоидной фибриллы в концентрации 50 и 100 мкг/мл (опыт), Капилляры прикреп 3 971276 фляют иа дно камеры к нанесенной заранее больная отказалась. Реакция торможенияполоске вазелина, оставляя с,вободными миграции лейкоцитов с амилоидной фибрилдвв конца капилляра, Обычно в одну каме- лой отрицательная (индекс миграции 85%)ру помещают два капилляра, получая при с ОПА - отрицательная (индекс миграэтом 4-е зоны миграции, Камеры пред"ции 139%), с БМК почки положительнаяставляют собой стеклянные кольца разме- (индекс миграции 47%), что позволяетром 20 10-2 мм, которые приклеивают исключить диагноз амилоидоза почек н высс помощью смеси парафина и воска (4: 1) тавнтьбольнойдиагнозхроническогоннфрнтв.к стандартным, предметным стеклам,П р и м е р 3. Больная В., 21 год,обычно дйа кольца на одно предметное 10 Выявлена гепато- и спленомегалия, уйестекло, Камеры герметиэируют покровными ренное повышение общего и пря бщего и прямого бистеклами (24 24 мм) со стерильным ва лирубина в сыворотке крови Слир ина в сыворотке крови. С диагнозомзелином и инкубируют на строго горизонтальной площадке в термостате при темхронического гепатита получала лечениекортикостероидвми (преднизолон максипературе 37 С в течение 18-20 ч, после15 мально до 60 мг/сут), вскоре присоедичего полученные эоны миграции проецннилась протеинурия 2 3% о, При поступруют при, помощи фотоувеличителя наленин в клинику выявлена развернутаярентгеновскую пленку (в масштабе 1: 4),картина нефротического синдрома. РеакЗоны миграции (в контроле и опыте) зарисовывают карандашом, вырезают и вэве- цня торможения миграции лейкоцитов сшивают на торзйонных весах, Индекс миг- тигенами (БМК почки и20 почечными антигенамирации определяют по формулеОПА) была отрицательной (индексы мнгфо рации соответственно 109 и 102%) сИМ- ЮО о,камилоидной фибриллой - и оложительнаягде /Ьо - средний вес 4-х эон миграции в (индекс миграции 32%), при биопсии почопыте (с добавлением амилоид ки выявлено отложение амилоида, что.позной фибриллы); вопиет выставить больной диагноз первичМ, - средний вес 4-х эон миграции ного амилоидоза с поражением почек (пред.в контроле. ниэолон отменен).Реакцию оценивают положительной Предложенный способ применен припри индексе миграции ниже 80%. зо обследовании 148 больных с различнымиП р и м е р 1, Больная П., 19 лет. нефропатиями. Установлено, что предлоДо 3-х летнего возраста 8 рвз перенесла женный способ атрввматичен, информвтипневмонию, в последующем периодически вен и требует не более суток для поствобострение хронического бронхита, Появ новки диагноза, в то время, как приление отечного синдрома, слабость, выяв-з применениииэвестногоспособа-10 дней,лена протеинурия до 2,6%о. Поступила в ф о р м у л а и з о б р е т е н и яклинику для уточнения диагноза, Реакция Способ диффеРенциальной диагностикиторможения миграции лейкоцитов с почеч- амнлоидоза от других почечных патологийными антигенами (базальной мембраной пУтем исследовании тканей оРганизма,клубочков почки (БМК) и водно-солевым щ о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с1,экстрактом почки - общим почечным анти- целью снижения травматичности и ускогеном (ОПА) была отрицательной (индек- рения способа, у пациента берут кровь,сы миграции соответственно 105 и 100%) выделяют лейкоциты, далее проводят реакс амилоидной фибриллой - положительная цию торможения миграции лейкоцитов с(индекс миграции 59%). При биопсии сли- вмилоидной фибриллой, вьщеленной иззистой прямой кишки и ткани почки обна- трупного материала, и при значении инружен амилоид. докса миграции от 80 до 0% диагностиП р и м е р 2. Больная Ш., 28 лет.,РУют амилоидоз.В детстве перенесла ревматизм, ставился Источники информации,диагноз ревматического митрального поро-принятые во внимание при экспертизека сердца. Впоследние годы выявлена 1. Варшавский В, АБерезина Т, А.протеинурия, сначала следовая, затем до Диагностическое значение биопсий слиэис.1,2%о. Поступила в клинику с прецполо- той оболочки прямой кишки и ткани десныжительным диагнозом амилоидоза почек. при амилоидозе. Труды 1-го МосковскогоПри биопсии десны амилоид не обнаружен,медицинского института, т. 83, с. 105 от биопсий слизистой кишки и ткани почки 106, 1975 (прототип).ВНИИПИ Заказ 8767/8 Тираж 714 Подписноефилиал ППППатент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4