Способ приготовления гистологических препаратов

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеслублик(23) ПриоритетОпубликовано 2802.82, Бюллетень Мо 8Дата опубликования описания 2802,82 5 М. Кл.з 6 01 И 1/28А 61 В 10/00 Государственный комитет СССР по делам нзобретеннй н открытнй(72) Авторы изобретения Башкирский государственный медицинский институт - " ф им. 15-летия ВЛКСМ(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХПРЕПАРАТОВ Изобретение относится к медицине, в частности к технике приготовления гистологических препаратов, используемых в морфологических исследованиях в различных отраслях науки, н может быть также использовано в биологии и ветеринарии.Известен способ приготовлениягистологических препаратов путем фик" сации и заключения в парафнновую среду (1). Однако по известному способу приготовление препаратов длительное и многоэтапное наблюдается низкая проникаемость фиксатора в ткань, что приводит к деструктивным изменениям, связанным с аутолическими процессами, что качественно изменяет строение ткани.Цель изобретения - сокращение времени приготовления препаратов.Укаэанная цель, достигается тем, что в способе приготовления гистоло" гических препаратов путем Фиксации и заключения в парафиновую среду фиксацию ведут в растворе состава, вес.:Тиофансульфоксид 20-50 Этиловый спирт 96 о 76-46 в течение от 30 с до 3 ч, причем после фиксации препараты непосредственно переносят в парафиновую среду.Тиофансульфоксид и его спиртовыерастворы хранят в темном месте прикомнатной температуре в сосуде схорошо притертой пробкой. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворыобеспечивают быструю и надежную фиксацию. Кусочки органов, размерами0,5-1 см, Фиксируют при экспозицииот 0,5 ч (30 мин) до 3-4 ч в 20-номспиртовом растворе тиофансульфоксида.Эффективность фиксации зависитот плотности и толщины объекта. Приналичии кусочков более 2 см изменяютусловия Фиксации путем повышенияконцентрации тиофансульфоксида до50-ного или применения чистоготиофансульфоксида, а также удлинением времени фиксации (экспозиции)до 12 24 ч.Тиофансульфоксид обеэвоживаетткани, свертывает белки и уплотняет 25 объект, не вызывая резкого сжатиябИологических структур. ТиофансульФоксид имеет преимущество передшироко применяеьвм фиксатором (спирт)при Фиксации рыхлых н отечных 30 тканей,909622 20 Формула изобретения Составитель А, Бражникова Редактор СКрупенина Техред А, Бабинец Корректор В, СиницкаяЗаказ 884/68 Тираж 883 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП фПатентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 После процесса фиксации кусочки органов переносят в смесь тиофансульфоксида, ксилола и парафина в разных частях, Кусочки в этой смеси в зависимости от их величины выдерживают в термостате 1 - 3 ч при 5 37 С, затем переносят в следующуюопорцию смеси, состоящую иэ тиофансульфоксида и ксилола по 25 ч и 50 ч парафина. Концентрацию парафина во второй смеси повышают и выдержи- )О вают в этой смеси в термостате при 37 " 1 - 3 ч,Из смеси тиофансульфоксида, ксилола и гарафина материал переносят в расплавленный чистый парафин и )5 выдерживают 1-2 ч в термостате при 54-56 С, а затем переносят во вторую порцию чистого парафина также на 1-2 ч при 54-56 С. Пропитывание парафином завершают заливкой объекта в чистый расплавленныйй парафин в формочк ах и охлаждением В ВодефПосле укрепления кусочков на деревянные блоки делают срезы на микротоме которые после удаления параФина окрашивают необходимыми красками соответственно поставленным задачам (гематоксилин-зозин, Ванизон и др.), и заключают до известной методике в бальзам. Для Фиксаций таких объектов, как рыхлая соединительная ткань, наиболее приемлемым является 50-ный тиофансульфоксид на этиловом спирте. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы обеспечивают быструю фиксацию, не вызывая существенного искажения строения тканей и органов, что дает 40 тиофансульфоксиду и его спиртовым растворам большие преимущества перед известными фиксаторами (разведения формалина, этиловый спирт, жидкость .Буэна). Тиофансульфоксид рекоменду ется как фиксатор при изготовлении обзорных препаратов и для более тонких исследований. Преимуществом тиофансульфоксида и его спиртовых растворов (20,30- и 50%-ные) является то, что такая фиксация не требует последующей промывки в воде для его удаления и обезвоживания объекта перед уплотнением парафином путем проведения через спирты.Предлагаемый способ обеспечивает сокращение времени при изготовлении гистологических препаратов, сокращение числа реактивов, через .которые необходимо провести исследуемый объектУскоренная проводка уменьшает также время пребывания биологического объекта в реактивах, что повышает качественное сохранение структур, подвергающихся обработке. Сокращение многоэтапной проводки обеспечивает экономию реактивов, в частности этилового спирта, и рабочую силу,Используемый в предлагаемом способе фиксатор позволяет Фиксировать любую ткань и кусочки органов, обеспечивая качественное изготовление препаратов для микроскопирования. Способ приготовления гистологических препаратов путем фиксации и заключения в парафиновую среду, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью сокращения времени приготовления препаратов, Фиксацию ведут в растворе состава, вес,В:Тиофансульфоксид 20-50 Этиловый спирт 96 76-46 в течение от 30 с до 3 ч, причем после Фиксации препараты непосредственно переносят в парафиновую среду. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., фИностранная литература, 1953, с. 62-67,