Способ определения биологической активности холерного токсина

Союз Советских Социалистических РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ889700 1) Дополнительное к авт. свид-ву -2) Заявлено ОМ 779 (21) 2794325/28-13 51 Кз С 12 И 1/00 . вки Йо сприсоединением Государственный комнте СССР яо делам изобретений и открытий(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКХОЛЕРНОГО ТОКСИНА АКТИВНОСТИ й и екре олоч ляют рных ощей ии в и эти биоло токси едицине,ксиколоноси аль ц К энте отде гиче нов. У ичы (холероксин) парени интоксиканой полости резки тонков соответст оением, вняв ства и кона, калия, атов, белка ела кишечни- истологичесржанием ме 10 овыпосл го к вени кише жимо конц хлор лени ивен- холе кг ка ие по акопл рия, нию с П р 5 ном вв ного э сы жив казате ния жиИзобретение от тся к м а именно к бактери ной то гии.Известен способ определения био- логической активности холерного токсина путем введения исследуемой пробы животному с последующим исследованием содержимого кишечника 11.Однако известный способ не обеспечивает воэможности выявить количественные и качественные изменения конкретно в каждом из отделов кишечника, что снижает точность полученных результатов.Целью изобретения является п шение точности способа.Эта цель достигается.тем, что согласно способу определения биологической активности холерного токсина, осуществляющемуся путем введения исследуемой пробы животному седующим исследованием содержимоишечника, пробу вводят внутрио, изолируют различные отделычника и определяют в его содерм индекс накопления жидкости,ентрацию ионов натрия, калия иа и по увеличения индекса накопя жидкости, повышению концентрации натрия, калия, хлора в двенадиперстной, подвздошн ках, появлению гипер роцитах слизистой о лов кишечника опред скую активность хол Способ осуществляют сл образом. Животным вводят токс ген или холерный эндото терально, в разные срок ции после вскрытия брюш лигатурами, отделяют от го и толстого кишечника 15 вии с анатомическим стр ленные изменения количе центрации ионов водород натрия, хлора, бикарбон содержимого каждого отд 20 ка сопоставляют с паточ кими нарушениями и соде авиаторов в его стенке.и м е р 1. При внут дении кристаллическог тероксина в дозе 2 мг тного получены следующ и увеличения индекса кости и содержания нахлора в ней по сравн4 аказ 10898/44 Тираж 531 Подписное. ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений.и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г. Ухгород, ул. Проектная, 4 контролем, которые приняты за эталонные.Ичдекс накопле- Контрольния жидкости,мг/см420 62Концентрация ионов, Контрольмэкв/лнатрия 148 57,2калия 6,8 , 3,7хлора 568 38,1П р и м е р 2. При внутривенноМвведении холерного токсина серии А(условное обозначение), полученногов дозе 0,5 мл/кг массы кролика, получейы .следующие показатели в сравнении с контролем.Эталон, %Индекс накопления (очищенныйжидкости, холерный энмг/см теротоксин)280 66,7Концентрация ионов,мэкв/лнатрия 88 59,5калия 5,5 80,9хлора 44,3 78,9П р и м е р 3. При внутривенномвведении холерного, токсина серии В,полученного .в дозе 0,5 мл/кг массыкролика, получены следующие показатели в сравнении с эталонными.Эталон, Ъ.(очищенныйхолерный энтероксин)19,8 Как видно из данных, приведенныхв примерах, при сопоставлении индек"са накопления жидкости и содержания ионов натрия, калия, хлора при внутривенном введении холерного энтеротоксина серии А и В в дозе 0,5 мл на 1 кг массы кролика с эталонными показателями дает воэможность оценить их биологическую активность в процентном отношении и заключить, что биологическая активность энтеротоксина серии А выше, чем в серии В.Предлагаемый способ внутривенного введения холерных .токсинов дает возможность оценивать результаты уже через 3-5 ч и является более точным по сравнению с известным, так как исключает воэможность дополнительного накопления хидкости в ки шечнике вследствие оперативного воздействия. Способ применен в трех сериях опытов на 120 кроликах и 65 сирийских хомяках. 20формула изобретенияСпособ определения, биологическойактивности холерного токсина путемвведения исследуемой пробй хивотномус последующим исследованием. содержимого кишечника, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности спосОба, пробу вводят .внутривенно, изолируют различные отделыкишечника и определяют .в его содер жимом индекс накопления жидкости,концентрацию ионов натрия, калия ихлора и по. увеличению индекса накопления жидкости, .повышению .концентрации натрия, калия, хлора в двенадца типерстной, подвздошной и тощей кишках, появлению гиперсекреции в энтероцитах. слизистой оболочки этих отделов кишеЧника определяют биологическую активность холерных токсинов.40 Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Оп 9 аг. 5 йцд 1 ев оп с 1 о 1 ега сох и апд ап й 1 йох 1 п. С. Уеп .п 1 сго Ь 1 о 1 о,т. 64, 9 1, 1970, с. 1-10.