Способ скрининга антгельминтиков

С нзз Советских Социалистических РеспубликОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТИЛЬСТВУ(22) Заявлено 2 Я 11.79 (21) 2843357/30-15с присоединением заявки йо(51)м, кл,з 6 01 М 33/48 Государственный комитет СССР по делам нзобртеннй н открытий(72) Автор изобретения Р.А.Пенькова 71) Заявите амйф .институти юзный ордена Трудового Кра гельминтологии им. К г(54) СПО КРИНИНГА АНТРЕЛЬМИНТИКО сится к сельско- тности к ветерия скрининга (поов при гельминтот быть испольэоданных эаболеваИзобретение отн му хозяйству, в ча нарии для проведен ис ка) ан тгельмин тн эах животных и мож вано в медицине пр виях. отем, что в каплаэьы испольа в качестве творцы Рингении 0,9-. н Известно использование для проведения скрининга антгельминтиков подбора веществ из ряда химических соединений, близких по строению, и метода скрининга на экспериментальных моделях 11.Недостатком данных способов является трудоемкость изыскания,. требующего больших затрат.Изв естен метод флюорометрического определения серотонина в тромбозитах для поиска препаратов и определе ния их антидепрессивного действия, основанный на том, что препараты по разному действуют на трансмембранный транспорт серотонина. Измерение скорости поглощения серотонина тромбоцитами человека используют для скрининга антидепрессантов 21 и 3.Недостатком этого способа является приготовление специального раствора для разведения тромбоцитов, который ужно часто готовить, так как он не подлежит длительному х нию, и определение серотонина в боцитарном осадке, что усложн яет тодику постановки реакции, а такж использование централизованной пл мю иэ пунктов переливания крови, что связано со специальным подбором дон ров для взятия крови.Цель изобретения - эффективныйотбор ангельмин тиков .Эта цель достигаетсякачестве тромбоцитарнойэуют плазму крови крыс,буферных растворов - расра или Тиродэ, в соотноше1,1:1-3.П р и м е р 1. Берем крысу, получаем иэ нее 3 мл крови, добавляем 0,1 мл раствораТрилон Б , цен О трнфугируем 15 мин при 1000 об/мин.Полученную плазму разводим раство" ром Рингера в соотношении 0,9:1,0.К 1 мл разбавленной плазма добавляем 1 мкг серотонина, инкубируем при То н определяем с помощью флюориметра скорость поглощения серотоннна тромбоцитами плазмы . Полученные данные являются иеходной концентрацией серотонина. Затем берем пробирки с ЗО раэбавленной плазмой и добавляем855500 формула изобретения Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе35 1. Дидгельминтдоцидныминых органф чение анфена. Дис енко П.П. Поиски ков с нематоцидн свойствами сре ических соединен гельминтных свой сертация, М 19 новы ыми и ди раз ий и ств 72 х ант- цестоизлу- сульс,15-48й химии,-330,стаглобун 04 ВопросыТ,19. Вып едицин ск 3, с. 32 10 4 3 Диэ тил стилбэс тролСкополамин 204 3биолос. 5 Бюллетень эксперимеи и медицины . 1976 2. льной 1 0" 10 Составитель Т.Тулякова.Решетник еда каз 68 Подписнмитета СССРоткрытийкая наб.,д,4 иал ППП фПатент, г, Ужгород, ул. Проектна препарат (например, левамиэол) в количестве 0,1 мп, через 5 мин добавляем 1 мкг серотонина и инкубируем 15 мин при Т 37 о, а затем быстро охлаждаем и с помощью флюориметра определяем скорость поглощения серотонина, сравнивая с исходными данными исчисляем в процентах.П р и м е р 2. Аналогично получаем из крови плазму и разводим 1 мл плазма 3 мл раствора Тиродэ или Рингера с последующим добавлением в 1 мл 10 разбавленной плазмы 1 мкг серотонина и инкубируем 15 мин при Т 37 е . Затем определяем скорость поглощения серо- тонина тромбоцитами, Полученные данные являются исходной концентрацией серотонина. Затем берем пробирки с разбавленной плазмой и добавляем препарат (например, гисталобулин) в количестве 0,1 мп, через 5 мин добав-, ляем 1 мкг серотонина и инкубируем 15 мнн при.Т=37 о, а затем быстро ох-. лаждаем,и с помощью флкюриметра определяем скорость поглощения серотонина, сравнивая с исходными данными, исключаем в процейтах.В таблице представлены результаты исследований, Наилучшей концентрацией является.10 4, так как поглощение серотонииа с препаратом меньше исходной серотонина, а с увеличением концентрации увеличивается и процент 30 поглощения./61 Тираж 907ВНИИПИ Государственногопо делам изобретений13035, Москва, ЖРауш Иэ таблицы видно, что заведомо известный препарат антгельминтиклевамизол имеет замедленную скорость поглощения серотонина тромбоцитами. Для подтверждения антгельминтных свойств препаратов, например, гистаглобулина, проведены дополнительно проверки, акт комиссионной проверки прилагается, Следовательно, чем медленее происходит поглощение серо- тонина тромбоцитами в сравнении с исходными данными, тем увереннее можно сказать, что препарат обладает антгельминтными свойствами н может использоваться как антгельминтик. Способ скрининга антгельмннтиков. включающий получение тромбоцитарной плаэж, разведение буферными растворами и определение скорости поглощения серотонина тромбоцитами плазмы в растворах с добавлением и без добавления препаратов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью эфФективного отбора антгельминтиков, в качестве тромбоцитарной плазмы используют плазму крови крыс, а в качестве буферных растворов - растворы Рингера или Тиродэ в соотношении 0,9-1,1:1-3,