Способ диагностики угрозы выкидыша

Союэ Советских Социалистических РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 822814 61) Дополнительное(22) Заявлено 30. 07. 79 (21) 2808809/28-13 присоединени 23) Приоритет эаяв осударственный комит СССР по делам изобретений и открытий(53) У 16,06088,8) Дата опубликования сания 23,04,81 72) Авторы изобретения С, Толмачев и Е, И, Боровиц ггс(54 ОБ ДИАГНОСТИКИ УГРОЗЫ ВЫ диагностики угрокультивирования питательной сре 5 Види сти ная вод Ацетатн рН 4,4 Раствор ре 10 10 М 10 М фер 20 5 ЛО на буфе 1 5 чают в каплю сусодержашео краси закрывают иокровредотвраценил вы 10 МПрепараты заклерного раствора,ель АО (10 М), иым стеклом. Для О зобретение относится к медици а именно к акушерству и гинекологии,Известен способзы выкидыша путемлимфоцитов крови вде 1,Недостатком известного способаявляется большой срок диагностиро"вания, что задерживает проведениесоответствующей терапии.Цель изобретения - ускорение способа диагностики угрозы выкидьзда,Указанная цель достигается тем,что при осуществлении диагностикиугрозы выкидыша путем культивированилимфоцитов крови в питательной среде, культивируют лимфоциты кровидоноров в присутствии сыворотки крови обследуемой, после чего из культуры выделяют лимфоциты, окрашиваютих акридиновым оранжевым и измеряютинтенсивность флуоресценции,при уменшении которой по сравнению с контролем диагностируют угрозу выкидыша,Способ осуществляют следующим образом,Берут кровь обследуемой и донора отстаивают в течение 1 ч, сливают асадочную жидкость с лимфоцитами и центрифугируют ее. к лимфоцитамдонора добавляют питательную среду и собственную сыворотку в однупробирку, а в другую - сывороткуобследуемой до 20 от общего объема. Культивируют в термостатепри 37 оС, После 5 мин инкубации центрифугируют, из осадка делают мазки,которые фиксируют в смеси спирт-ацетон (1:1) 30 мин при комнатной822814 Формула изобретения Составитель Ю. АлмазовРедактор В. Иванова Техред Е.Гаврилешко Корректор Н.ШвыдкаяЗаказ 1929/3 Тираж 687 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 сыхания клеток края покровных стеколокатывают парафином или резиновымклеем,Измерение интенсивности связываниякрасителя АО с клетками определяютна флуориметре. О количестве свяэанног ядрами лимфоцитов красителя судят по интенсивности зеленой люминесценции при длине волны 530 нм. В каждом препарате иэмеряют по 10 клеток.Окраску препаратов проводят одновремснно для всех изучаемых групп. Результаты измерения клеток для каждогослучая усредняют, вычисляют ошибкусреднего и достоверность различияпо критерию Стьюдента-Фишера. Результаты показывают,что добавление сыворотки крови беременных женщин су=розой выкидыша к лимфоцитам донораснижает. интенсивность флуоресценциив среднем на 17% по сравнению с собственной сывороткой донора, Изучениедобавления сыворотки крови женщинвне беременности, имевших привычныевыкидыши, выявляет снижение интенсивности флуоресценции лимфоцитовдоноров, культивируемых с собственнои сывороткой. Обнаруженные четкиеразличия интенсивности флуоресценции лимфоцитов донора при добавлении сыворотки крови беременных, имевших выкидыши, позволяет рекомендовать данный способ для ранней дианостики угрозы выкидыша.П р и м е р . Больная, 25 лет,история родов Р 97, обратилась вклинику с жалобами на наличие болейвнизу живота и в пояснице. Анамнез;1-я беременность в 1971 году - срочные роды; 2-5-е беременности - медицинские аборты в сроке 9-10 недельбеэ осложнений; б-я беременность в197 б году - самопроизвольный выкидышс выскабливаением в сроке 13 недель;7-я беременость в 1977 году - самопроизвольный выкидыш в сроке 27 недель с выскабливанием; 8-я беременность, данная - 22 недели. Объективно: положение плода продольное, сердцебиение прослушивается, матка возбудимая. На основании объективногоклинического осмотра поставлен диагноз; беременность 22 недели, угрозавыкидыша Результаты лабораторногообследования: из периферической крови больной добавили сыворотку икультуру лимфоцитов донора, пригото-,вили мазки, зафиксировали, окрасили.Результаты цитофлуориметрии показали, что интенсивность флуоресценциилимфоцитов донора при добавлении сыворотки пациента составила 85+ 3,1отн,ед. и уменьшилась на 20 по сравнению с интенсивностью флуоресценции лимфоцитов донора, культивируемых15 в собственной сыворотке (102+4,08 р.0,00 Ц.Предлагаемый способ обеспечиваетускорение диагностики угрозы выкидышана 2 дня по сравнению с известным20 способом и может применяться в качестве контроля при лечении, позволяя экономить 1215 руб в год.Данные подтверждены клиническимии лабораторными испытаниями на 1825 обследованных больных,Способ диагностики угрозы выкидышапутем культивирования лимфоцитов крови в питательной среде, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, культивируют лимфоцитыкрови доноров в присутствии сыворотки крови обследуемой, после чего изкультуры выделяют лимфоциты, окрашивают их акридиновым оранжевым и измеряют интенсивность флуоресценции,при уменьшении которой по сравнению40 с контролем диагносцируют угрозу выкидыша.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Мирохмедов У. М. и Резни 4 ков Л. А. Методы исследования вклинической медицине, 1975, с. 1 б 5.