Способ консервирования спермы рыб

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик(45) Дата опубликования описания Я,01.78 ооударстввиии 1 й комитетСовета Миииотров СССРпо делам изоорвтвиийи открытий 53) УДК 639.3. .034. 2 (088.8 Н. С. Пушкарь, Ю. Е. А. Горпиенко, В 72) Авторы изобретения нститут проблем криобиологии и криомедицины АН Украинской ССР 71) Заявител ПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ РЫБ Изобретение относится к воспроизведению ценных пород рыб, а именно к способам консер; вирования спермы рыб, преимущественно осетровых, и может найти применение на рыбозаводах.Известен способ консервирования спермы рыб, предусматривающий охлаждения спермы и смешивание ее с защитным раствором в соотношении 1:2 с последующим замораживанием, В состав защитного раствора входят следующие компоненты, г/л: ЯаС - О, 125, КС - 0,00509, СаС 1 г. 2 НгО - 0,00157, МаНС 0,00119, ХаНгР 04- 0,00297, Мд 504 7 НгО - 0,000933, фруктоза - 0,00555, лецитин - 5,00.Замораживание смеси спермы с защитным раствором ведут в парах азота в присутствии криопротектора до температуры -196 С.Этим способом консервировали сперму стальноголового лосося. В случае консервирования спермы осетровых рыб данным способом сохранность оплодотворяющей способности реконсервированной спермы небольшая,Цель предлагаемого способа - наиболее полное сохранение оплодотворяющей способности спермы рыб после ее восстановления,Для этого перед смешиванием спермы с защитным раствором в последний вводят трисНС 1-буфер, количество защитного раствора бекин, Е, ф. Копейка,Бронштейн и Т. А. Глушко рут из расчета обеспечения соотношения его и,спермы 1:1; замораживание ведут вначале соскоростью снижения температуры 0,5 - 5 С вминуту до -12 - -14 С, а затем со скоростьюснижения температуры 20 - 30 С в минуту до-196 С,В качестве криопротектора применяют диметилсульфоксид.Предлагаемый способ заключается в,следующем.о Сперму разбавляют в соотношении 1:1 расОв твором, содержащим трис-НС 1-буфер, куриныйжелток и криопротектор-диметилсульфоксид.Разбавленную сперму разливают в ампулы нпомещают в установку для замораживания,.которое ведут вначале со скоростью снижениятемпературы 0,5 - 5 ф С в минуту до -12 - -14. С;а затем со скоростью снижения температуры20 - 30 С в минуту до -196 С,Пример. Сперму осетра или севрюги (несодержащую примесей воды, грязи и других2 р веществ и имеющую активность 80 - 100%) вколичестве 20 мл смешивают с 20 мл раствора,содержащего 6,5 мл 0,2 М трисбуфера (24,33 гоксиметил-аминометана в 1000 мл НгО),6,5 мл0,1 ЯНС 1, 2 мл желтка куриного яйца й 5 мл26диметилсульфоксида. После размешивения по.лученную смесь разливают в ампулы по 1 мл.591164 Формула изобретения Составитель М. Андреева Техред О. Луговая Тираж тЧЗ Редактор О. ИвановаЗаказ 473/4 Корректор В. СердюкПодписное ЦНИИПИ Государтвенного омнтта Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., л. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Ампулы помешают в замораживающую установку и охлаждают до -196 С, причем замораживание ведут с переменной скоростью охлаждения: до -12 - - 14 С. Скорость снижения температуры равна от 0,5 до 5 С в минуту, а дальнейшее охлаждение до конечной температуры ведут со скоростью снижения температуры, равной -20 - -30 С в минуту.Эффективность предлагаемого способа подтверждена исследованиями, показавшими, что активность размножения реконсервированной спермы составляет в среднем 60 о/ 1. Способ консервирования спермы рыб, заключающийся в смешивании ее с защитным раствором и в последующем замораживании в парах азота в присутствии криопротектора до температуры -196 С, отличающийся тем, что, с целью наиболее полного сохранения оплодотворяющей способности реконсервированной спермы осетровых рыб, предварительно перед смешиванием спермы с защитным раствором в последний вводят трис-НС 1-буфер, смешивание осуществляют в соотношении 1:1, а замораживание ведут вначале со скоростью снижения температуры 0,5 - 5 С в минуту до -12 - -14 С, а затем - со скоростью снижения температуры 20 - 30 С в минуту до -196 С.10 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что вкачестве криопротектора применяют диметилсул ьфоксид.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. Шевцова Е. Оплодотворение икры стальноголового лосося спермой, хранящейся при низкой температуре. - Текущая информация ЦНИИТЭИРХ, Рыбохозяйственное использование внутренних водоемов, М., серия 8, вып. 6, 1970.