Способ определения концентрации стероидов

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Союз Советских Сс циалистических Республик) Приоритет - (32) 11.12.73 асударственньФ кометеСовета Министров СССео делам изобретенийи открытий 31) 57 43) Опу (45) Дат 33/73 РЗ) Великобританияликовано 15.08,77. Бюллетень30И ноиранцы сселл Джеймс Вейли, Вирджиния Эдит и Реджинальд МонксМзй Чеймберс 4)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ СТЕРОИД е, в частности отопами итием,анализа по предл оактивной метки Изобретение относится к медициндиагностике с помощью соединений, меченых ра. дноактнвными изотопами.Известен способ определения гормонов щитовидной железы в сыворотке, заключающийся в том, что пробу подкисляют смешивают с неорганическим кристаллическим сорбентом, отделяют и путем подщелачивания переводят в раствор гормона, меченый радиоактивным изотопом, удаляют свободный тироксин и измеряют активность 11. 1 Известен также способ определения концентраеии гормонов в пробе, заключающийся в проведении реакции анализируемого соединения в пробе с его производной, меченой радиоактивным изото. пом в присутствии реагента, концентрация которо. го недостаточна для связывания анализируемого соединения и его производной, отделении связанно. го соединения от несвязанного и измерении их радиоактивности, по которым рассчитывают кон. центрацию анализируемого соединения в пробе 2.Известные способы определения концентрации гормонов в пробе могут быть применены с больши. ми ограничениями для определения концентрации стероидов, в частности, изза использования произ 2водных, меченых радиоактивнымирода - 14, йода - 125, йода - 131 и трДля повышения точностигаемому способу в качестве радироизводных стероидов испо л льзуют изотоп се. лен - 75.Для определения концентрации стероидов обра. зуют смесь из пробы, производной стероидов мече. ных радиоактивным изотопом селени реагента, концентрация которого. недостаточна для соедине. ния с общим количеством стероидного соединения и его производной, В результате реакции часть стероидного соединения и часть его производной образуют с реагентом связанный комплекс,Полученный связанный комплекс отделяют от несвязанного стероидного соединения и его произ водной, Затем изменяют радиоактивную концентрацию связанного комплекса или несвязанного стероидного соединения и его производной. Из резуль.татов измерений определяют концентрацию стероидов в пробе.Экспериментальньй набор для проведения ан лиза на кортизол в человеческой сыворотке или плазме содержит: 25 ампул, содержащих одно и то же количество гранул абсорбента и тот же объем569298 Составитель Г, СавельевТехред, М. Лееидкая Корректор Б, Югас Тираж 1101 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Заказ 2027/694 Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, уп. Проектная, 4 буферного раствора корти 1 ь.транскортизона, мече ного селеном - 75; четыре ампулы с лиофилизовм. ной человеческой сывороткой содержицие номи. нально 2,5; 7,0; 18,5 и 50 мкг кортизола на 100 мл; 25 стеклянных трубок для тепловой дена. турации; бланки для фиксации результатов.Пробы сыворотки сначала разбавляют водой и нагревают в стеюпппщх трубках для денатурации зидогенного картизольного собдиненйя протеина (кортни транс) и освобождения кортизола. Аликвотную пробу разбавленной денатурированной сыворотки вводят в ампулу, которая содержит меченный селеномкортизол, связанный с кортиком . транс, и гранулы адсорбеита. Затем аьп 1 улу вращают, чтобы произвести суспендироваиие гранул и получить смесь. Кортизол из сыворот. ки и меченный селеномкортизол конкурируют при вязывании с кортиком.транс Свободная фракция одновременно распределяется между гра. пулами и ва 1 лывающей жидкостью. В состоянии равновесия гранулы можно устаналивать на место й аликвотную пробу всплывающей жидкости берут ня анализ. Ряд кортизольных стандартов человеческой Вывороткиобрабат 1 вают тем же способом, что и,неизвестные пробы сыворотки, чтобы произвести зине сение результатов калибровки, из которых значенияпля неизвестных можно синтерполировать,Формула изобретенияЭСпособ определения концентрации стероидов в пробе, заключающийся в проведении реакции ана. лизируемого соединения в пробе с его производной, меченной радиоактивнььа изотопом, в присутствии реагента, концентрация которого недостаточна для связывания анализируемого соединения и его про. изводной, отделении связанного соединений от не. связанного и измерении их радиоактивности, по которым . рассчитывают концентрацию анализи руемого соединения в пробе, о тли чающий ся тем, что, с целью повып 1 енйя точности анализа, в качестве радиоактивного изотопа используют изо. гоп селен. 75.Источники информации принятые во внимание при экспертизе;1. Патент ФРГ 922 б 455, кл.601 й 33/16, опублик, 1973.