Способ получения -лизина

Союз Советск Социалмстнцеск ееесяублинА-Н- И ЕНИ ЯЛЬ СТВО АВТОРСКОМ авт. свнд вунитель(22) Заявлено 24,04.73(21) 1817072 ф 8 13с присоединением заявки М. КлС 12 Ы 13/О ооударотвеииый комитетСооото Ииниетроо СССРоо делам изобретеиийи открытий) Опубликовано 25,12,75,Бюллетень4 Ь) Дата опубликования описания 22.04.7 668,3(088,8 В, Д, Беляев, А, Я.КалниньшЯ ш, А, Р, Вальдман. В, ф, Бекере ков, Э, Б, рУсле, Р, Я. Каркл Т, Лука и А, В, Пономаренко В, Эпштейн, У, Э, Виестур,нь, 3. К. Зоммер,. Кирхенштейна Инстктут ми ит иологии(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ обиологио к .полу- робной ме чению . -лизина способом микферментацки.Известен способ полу ен.я-лизинапутем глубинной фермектации продуцентакультуры беиьас 8 е г ив /7 е 22 при непрерывной аэрации в питательной среде,содержащей источники углерода, азота, необходимые минеральные соли и стимуляторы роста с последующим выделением-лизина. Для получения-лизина используют дефицитные крахммсодержацие маътериалы,Для расширения сырьевой базы и снижения себестоимости продукта предлагается способ, по которому в питательную.среду вводят в качестве источника углерода нейтрализованный гидролизат торфа. Дляувеличения выхода 1 -лизина в составпитательной среды дополнительно вводятмелассу в количестве 10-50% от количества редуцируюших веществ (РВ) среды,Верховой торф со степенью разложения.до 20% гидролизуют минеральной кислотой рабатевают в ш105-1 10 С, где йрская д.струкцияводораствори мыхИзобретение относитсяеской промьшленности,например серной. Сернокислый гидролизатторфа очищают активированным углем илие1 ионообменными смолами и концентрируютвакуумной упаркой до повышения РВ и очн 5 щенном гидролизате до 15-16%,К очищенному концентрированому нейтрализованному гидролизату торфа добавля,ют стимуляторыроста, минеральные солии воду, а затем стерилизуют среду.1 О П р и м е р ., Верховой торф оо степеньюразложения 1 Я% и влажностью 25 30%измельчают на молотковой дробилке до размеров частиц 10 мм, а затем смешиваютс серной кислотой концентрации 02%, по1 б даваемой в количестве 20% от веса сухого торфа,Полученную смесь об е вковом гидролизере при,исходит:. механохимичеполисахаридов торфа допродуктов,Полученный твердый полупродукт гидролиза растворяют в горячей воде при г ромодуле 2-4 кг/кг, нагревают до 120- ф 130 С и выдерживают при этой темпо496300 ЦИИИПИ Заказ Щ 9 Изд,1 ФЯ Тираж 5 Подписное филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ратуре в течение 20-30 мин для превращения олигосахаридов в моносахара.После охлаждения до 70-80 С пульпу фильтруют для отделения негндролизуемого остатка.5Выход редуцирующих веществ составляет 72-75% от начального содержания полисахаридов.Полученный гидролизат очищают от посторонних примесей; битумных и восковыхвеществ и минеральных веществ, с помощькактивированного угля с последующей фильтрацией под вакуумом либо с помощью ионообменных смол, например смолы ИАф,Очищенный гидролизат нейтрализуют дорН 4,0-4,5 окисью кальция, а затем фильтруют. Дальнейшую нейтрализацию проводят25%-ной аммиачной водой.Образовавшийся при этом сернокислыйаммоний обеспечивает потребность продуцента в минеральном азоте во время ферментации.Нейтрализованный .гидролизатконцентрируют вакуумной упаркой при 7080 С до повышения РВ до 15-16%,Для получения ( -л;.пп;л используюткультуру ВтеИьасСет сиа .чр. 22 Л, котораяразмножается вначалелабораторных условиях на агаровых косяках, а затем в колбах на качалке, пос;и. чего материал выращивают в посевных ферментаторах на питательной среде на основе нейтрализованного гидролизата, торфа с содержанием РВ3-4% вес.В состав питательной среды входят также 4-5% кукурузного экстракта и 1,5% вес. Меульфата аммония.Среда для производственной форментациисодержит 4-5% об. кукурузного экстракта(в зависимости от содержания дефицитныхфакторов-биотина, треонина и метионина), 460,05% вес, солей фосфорной кислоты и воду до 7,5% вес РВ питательной среды.Для увеличения выхода С -лизина и состав среды вводят 10-50% мелассы отобщего количества, РВ. 45Стериалиэацию среды проводят при120 С в течение 1 часа.Продуцент ВгепЬасФегит, яр, 22 Лкультивируют при аэрации 1 объем воэдухапа 1 объем среды в минуту,В течение первых 24 час культивирования концентраюао растворенного кислорода поддерживают на уровне 15-20% отполного насьпцения, а затем до конца процесса в пределах 1-5% от полного насьпцения при интенсивном перемешивании. Температура культивирования 2 9 + 1 С. Длянепогашения применяют кашалотовый жирили силиконовый пеногаситель.Через 62-72 час, культивированияуровень , лизина в культуральной жидкости достигает 16-25 г/л (считая помонохлоргидрату лизина).При добавлении Э 0% мелассы от количества РВ среды выход ( пизина повышается до 30 гl и,Из комплекса РВ гидролиэата торфапри ферментации ассимилируются моносахьриды и дисахариды,Уровень неассимилированных РВ к концу процесса ферментации составляет0,7-1,0%,Для получения кормового кошентратаЬ.лизина культуральную жидкость упаривают на вакуум-выпарной установке и высушивают на распылительной сушилке.Для получения-лизина культуральиую жидкость сепарируют и выделяют1 -лизин в кристаллическом виде однимиз, известных способов.Получение, лизина на гидролизатах позволяет снизить себестоимость продуктаболее чем в 28 раза. Формула изобретения 1, Способ получения-лизина путем глубинной ферментации продуцентакультуры 5 гечьас 1 е нт р. 22 принепрерывной аэрации . г.тательной среде,содержащей, источники углерода, азота,необходимые минеральные боли и стимуляторы роста с последуюшим выделением-лизина, о т л и ч а ю ш и й с ятем, что, с целью расширения сырьевойбазы и снижения себестоимости продукта,в качестве источника углерода в питательную среду вводят нейтрализованный гидролиэат торфа,2, Способ по и, 1, о т л и ч а ю шийс я тем, что, с целью повышения выхода лизина, в состав питательной среды.дополнительно вводят мелассу в количестве 10-50% от количества редуцируюшихвеществ среды.