Способ количественного определения гексозаминов

Номер патента: 493710

Авторы: Болобова, Линевич, Степаненко

ZIP архив

Текст

".ьГ;.о- .-3.Щ 9 я но тфна щ.= д 1111 493710 ОП И САН Й Е ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических(23) ПриоритетОпубликовано 30.11.75, Бюллетень44 Государственный квинте Совета аенннстров СССР(53) УДК 543 43(088 8) по делам изобретений н открытийписания 18,0 та опубликовани 72) Авторы изобретения И. Линевич, А. В. Болобова и Б. Н, Степаненкодена Ленина институт биохимии им. А. Н. БахаЕДЕЛЕ является длитель 20 Изобретение относится к области исследования и анализа полупродуктов, в частности к количественному определению гексозаминов.Известен способ определения гексозаминов в биологическом материале, заключающийся в 5 выделении гексозаминов на колонке с полистироловым сульфокатионитом, элюировании определяемого вещества водой, взаимодействии его с ацетилацетатом при 89 - 92 С в течение 45 мин в щелочной среде с последующим 10 взаимодействием образовавшихся при этом хромогенов с п-диметиламинобензальдегидом в кислой среде в присутствии этилового спирта в течение 2 час и измерением оптической плотности полученных продуктов при 530 нм, Чув ствительность этого способа (5 - 14) 10-5моль/л.Недостатком известного способаневысокая чувствительность его иность (12,5 час).Предложено в качестве катионообменной смолы использовать карбоксильный полиакриловый катионит и оптическую плотность измерять при 222,5 нм после обработки элюированных фосфорной кислотой гексозаминов с 25 периодатом в щелочной среде.Предлагаемый способ заключается в том, что гексозамины отделяют с помощью карбоксильного полиакрилового катионита, элюируют гексозамины 1 н. фосфорной кислотой, 30 окисляют 0,0001 М раствором периодата калия в ацетатном буферном растворе с рН 6,3 при температуре 18 21 С с последующим определением измерением оптической плотности полученной смеси при 222,5 нм.П р и м е р. Количественное определение гексозаминов в растворах, содержащих глюкозамин, нейтральные и кислые сахара (глюкоза и галактуроновая кислота), и оксиаминокислоты (серии и треонин).2 мл раствора смеси наносят на колонку (7 35 мм) с карбоксильным полиакриловым катионитом амберлит ССШар колонку промывают тремя порциями воды по 5 мл. Гексозамин элюируют с колонки 1 н. фосфорной кислотой и доводят объвм элюата до 10 мл.К 2 мл элюата прибавляют 2 н. едкого калия до рН 6,3 и доводят объем до 3 мл. К элюату добавляют равный объем 0,0001 М раствора КУ 04 в ацетатном буфере с рН 6,3. Смесь оставляют на 1 час в темноте при комнатной температуре.Оптическую плотность реакционной смеси измеряют относительно ацетатного буфера на СФ.Количество гексозамина определяют по калибровочному графику, выражающему зависимость оптической плотности от содержания гексозамина в пробе (см. чертеж), Гексозамины определяют в концентрациях (2 - 40) 10 е моль/л,известным способомф ф Средняя относительная ошибкаспособа 6%.фф То же 4%. Примечание. 10 0810 б Хб вьюг/ю Составитель В. ЧехлатТехред А. Камышникова едактор В. Лысенх рректор Л. Денискина Изд.2000 Тираж 902Государственного комитета Совета Минист по делам изобретений и открытий 3035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 ПодписноССР аказ 124/17ЦНИИПИ Типография, пр, Сапунова,32,0 28,8 25,6 22,6 20,4 19,2 16,8 12,8 11,3 9,6 8 32,0 30,0 25,4 24,0 20,0 21,0 14,0 13,6 11,0 11,0 8,4 32,0 28,0 24,5 23,0 20,4 19,5 15,6 13,0 10,8 10,5 8,6 Результаты, полученные в серии опытов известным и предлагаемым способами, сведены в таблицу. Предмет изобретенияСпособ количественного определения гексозаминов в биологических материалах, включающий выделение гексозаминов при помощи катионообменной смолы, злюирование их и 10 измерение оптической плотности реакционнойсмеси, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, в качестве катионообменной смолы используют карбоксильный полиакриловый ка тионит, и оптическую плотность измеряют при322,5 нм после обработки элюированных фосфорной кислотой гексозаминов периодатом в щелочной среде,

Смотреть

Заявка

1926742, 16.05.1973

ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМ. А. Н. БАХА АН СССР

ЛИНЕВИЧ ЛЮДМИЛА ИВАНОВНА, БОЛОБОВА АЛЛА ВАЛЕНТИНОВНА, СТЕПАНЕНКО БОРИС НИКОЛАЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 21/24

Метки: гексозаминов, количественного

Опубликовано: 30.11.1975

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-493710-sposob-kolichestvennogo-opredeleniya-geksozaminov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ количественного определения гексозаминов</a>

Похожие патенты