358360

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 358360 Союз Советскиз Социалистические Республик.т 1, Кл, С 12 с 1 13/10 Комитет по делам изоеретеиий и открытий при Совете Министров СССРУДК 577,15.07(088.8) Р. В, Фениксова, Н. А, Тиунова, Н, Я. Кобзева, Л, И. Костычева и В, Д. Кузнецов Ордена Ленина институт биохимии имени А. Н. БахаАвторып.-,обретения Заявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ Изобретение относится к производству ферментных препаратов, в частности к способуполучения литических ферментов,Известен способ получения литическихферментов путем выращивания их продуцентов на питательной среде.В предлагаемом способе используют Ас 1 потпусез се 11 ц 1 озае, что повышает активностьферментов,Для получения литических ферментов целесообразно использовать штамм Асйпотпусезсе 11 п 1 озае41.В качестве питательной среды можно использовать питательную среду следующегосостава (в %): глюкоза 0,25; крахмал 0,7; 15отруби пшеничные 0,7; дрожжи пекарские (посухому весу) 1,0; кукурузный экстракт (по сухому весу) 0,5; мел 0,5; двузамещенный сернокислый аммоний 0,3 при рН равном 7,0.Способ заключается в следующем, 20П р и м е р. Посевной материал выращиваютв колбах емкостью 750 мл на качалке в течение 1 - 2 суток. Посевной материал вносят всреду в количестве 4% от общего объема среды. Состав посевной среды и среды для 25культивирования актиномицета следующий(в %): глюкоза 0,25; крахмал 0,7; отруби пшеничные (измельченные) 0,7; дрожжи пекарские (по сухому весу) 1,0; двузамещенныйсернокислый аммоний (1 чН 4) 2304 0,3, куку рузный экстракт (по сухому весу) 0,5, мел 0,5, рН после стерилизации должен быть равен 7,0, температура выращивания 27 - 28, аэрация 1 - 2 объема воздуха на 1 объем среды в минуту, скорость вращения мешалки 300 - 400 об/мин, длительность культивирования 4 суток.Культуральная жидкость, полученная после отделения мицелия, способна полностью растворять вещества клеточных стенок дрожжей, в том числе трудногидролизуемый дрожжевой глюкан клеточных стенок с образованием восстанавливающих сахаров, среди которых преобладает глюкоза.1 мл культуральной жидкости, разведенной в 15 раз за 1 час при 40 С, рН 75 - 80 в 1,5 мл инкубационной смеси способен лизировать 20% прогретых при 100 в течение 10,кин дрожжей Яассйаготпусез сегелз 1 ае, когда их концентрация в инкубационной смеси составляет 0,20% (по весу сухого вещества). Дрожжи выращивают на сусле 7,5 Балл в течение 17 час.мл неразведенной культуральной жидкости за то же время и в тех же условиях лизирует прогретые дрожжи Я. сегечз 1 ае при Сапс 11 с 1 а дш 111 еггпопс 111 за 2 час на 90%.1 мл неразведенной культуральной жидкости предлагаемого актиномицета способен в тех же условиях рас:.щепить 25% клеток жиТехред Л. Богданова Редактор С. Титова Заказ 4420/6 Изд.1720 Тираж 406 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 вых дрожжей за 4 час и 90% клеток живых дрожжей за 1 сутки.Сухой препарат лизирующих ферментов может быть получен путем осаждения ферментов четырьмя объемами этилового спирта, двумя объемами ацетона или сернокислым аммонием при 80% насыщения.В процессе получения сухого препарата наименьшая инактивация (на 10 - 15/,) наблюдается в случае осаждения сернокислым аммонием.Культурно-морфологическая характеристика Ас 11 потусез се 11 ц 1 озае штамма 41 на 10-е сутки роста,На агаре Ваксмана и на синтетической среде СР 1 с глюкозой. Воздушный мицелий очень скудный, белесый (д) в обозначен окраски - по Шкале цветов Вондарцева, 1954, собственный мицелий светло-оливково-серый (н 1), пигмента нет, колонии округлые, уплощенные, слегка фестончатые,На синтетической среде СР 1 с к р а х м а л о м, Воздушный мицелий мучнистый бледно-розоватый (а 5), субстратный мицелий палевый (о 4), пигмента нет.Н а кукурузный ср еде2. Воздушный мицелий палевый (о 4), субстратный мицелий оливковый (н 1), пигмент буроватый.Н а овся ной среде. Воздушный мицелий скудный, белесый (д 1), субстратный мицелий сливковый (п 1), пигмент буроватый.На среде Гаузе2. Воздушный мицелий отсутствует, субстратный мицелий коричневый (в 7), пигмент светло-буроватый.Спороносцы прямые, искривленные, спорыкруглые и овальные.5 Физиолого-биохимические свойства А. се 1- 1 ц 1 озае штамма 41. Не образует меланоидного пигмента, Гидролизует крахмал (зоны гидро- лиза - 19 мм), Использует в качестве единственных источников углерода: глюкозу, кси лозу, арабинозу, маннит и фруктозу. Не потребляет: рамнозу, сахарозу, рафинозу и инозит.Штамм синтезирует в глубинных условияхсистему ферментов, состоящую из р - 1,3 - 15 глюканазы, протеиназы и хитиназы. Предмет изобретения1. Способ получения литических ферментовпутем выращивания их продуцентов на пита 20 тельной среде, отличающийся тем, что, с целью повышения активности ферментов, в качестве продуцентов используют Ас 11 потусезсе 11 ц 1 озае.2, Способ по п. 1, отличающийся тем, что25 используют штамм Ас 11 погпусез се 11 ц 1 озае41,3. Способ по пп, 1 и 2, отличающийся тем,что используют питательную среду следующего состава (в %): глюкоза 0,25; крахмал 0,7;30 отруби пшеничные 0,7; дрожжи пекарские(по сухому весу) 0,5; мел 0,5; двузамещенныйсернокислый аммоний 0,3 при рН равном 7,0.